2.6.5. Cold saponification of lipids and extraction of the unsaponifiable
matter
A 250-mg lipid sub-fraction of the extract was added with
150 lL of a solution of betulin (1.0 mg/mL in n-hexane/isopropanol
(3:2, v/v)) and 200 lL of a solution of 5a-cholestane (5.0 mg/mL in
n-hexane), used as internal standards for the quantiication of COPs
and cholesterol, respectively. The sample was then dried under
nitrogen flow and added with 10 mL of 1 M KOH solution in methanol,
wrapped with aluminium foil and shaken for 18 h in order to
produce saponification (Soto-Rodríguez et al., 2008).For the extraction
of the unsaponifiable matter, 10 mL of water and 10 mL of
diethyl ether were added to the samples, which were vigorously
shaken. The diethyl ether fraction was then separated; diethyl
ether extraction was repeated twice. Ether extracts were pooled
and washed with 5 mL of 0.5 M KOH and 5 mL of saturated NaCl.
The extracts were dried over anhydrous sodium sulphate. The organic
solvent was removed with a rotary evaporator at 40 C; the
unsaponifiable fraction was then transferred to a conical vial with
diethyl ether and dried under nitrogen flow. The unsaponifiable extract
was dissolved in 1 mL of n-hexane/isopropanol (3:2, v/v),
from which 100 and 900 lL were used for the determination of
cholesterol and COPs, respectively.
2.6.5 การสะพอนิฟิเย็นโครงการและสกัดการ unsaponifiableเรื่องเศษส่วนย่อยไขมัน 250 มิลลิกรัมของการดึงข้อมูลถูกเพิ่มเข้ามาด้วย150 จะของโซลูชันของ betulin (1.0 mg/mL ในเอ็นเฮก เซน/isopropanol(3:2, v/v)) และ 200 จะของโซลูชันของ 5a-cholestane (5.0 mg/mL ในเอ็นเฮกเซน), ใช้เป็นมาตรฐานภายใน quantiication ของตำรวจและ ไขมัน ตามลำดับ ตัวอย่างอบแห้งภายใต้กระแสไนโตรเจน และเพิ่ม ด้วย 10 mL ของเกาะ 1 M ในเมทานอลห่อ ด้วยฟอยล์อะลูมิเนียม และหวั่นไหวใน 18 h เพื่อผลิตสะพอนิฟิ (Soto Rodríguez et al., 2008) การสกัดเรื่อง unsaponifiable, 10 mL ของน้ำ และ 10 mL ของอีเทอร์ diethyl ได้เพิ่มตัวอย่าง ซึ่งโยคะเขย่า แยกออกเศษ diethyl อีเทอร์แล้ว diethylอีเทอร์สกัดถูกซ้ำสอง สารสกัดอีเทอร์ถูกทางถูกพูและหิน 5 mL 0.5 เมตรเกาะและ 5 mL ของ NaCl ที่อิ่มตัวสารสกัดได้แห้งมากกว่าไดโซเดียมซัลเฟต การเกษตรอินทรีย์ตัวทำละลายถูกเอากับ evaporator โรตารี่ที่ 40 C ที่เศษ unsaponifiable ถูกถ่ายโอนไปคอนแทคทรงกรวยด้วยแล้วdiethyl อีเทอร์และไนโตรเจนแห้งภายใต้กระแส สารสกัด unsaponifiableถูกละลายใน 1 mL ของเอ็นเฮก เซน/isopropanol (3:2, v/v),จากที่ 100 และ 900 จะใช้สำหรับกำหนดการไขมันและตำรวจ ตามลำดับ
การแปล กรุณารอสักครู่..