Hormones and ACC were analysed most

Hormones and ACC were analysed mostly as described previously (Albacete et al., 2008). The analyses were carried out on an HPLC/MS systemconsisting of an Agilent 1100 Series HPLC (Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA), equipped with a l-wellplate autosampler and a capillary pump, connected to an Agilent Ion Trap XCT Plus mass spectrometer (Agilent Technologies) using an electrospray (ESI) interface. Prior to injection, 100 ll of each fraction were filtered through 13-mm-diameter Millex filters having a 0.22-lm pore-size nylon membrane (Millipore, Bedford, MA, USA). Mobile phase A consisting of water/acetonitrile/formic acid (94.9:5:0.1) and mobile phase B consisting of water/acetonitrile/ formic acid (10:89.9:0.1) were used for the chromatographic separation. Of each sample, 8 ll, dissolved in the mobile phase A,was injected onto a Zorbax SB-C18 HPLC column (5 lm, 150 0.5 mm, Agilent Technologies), thermostated at 40 C and eluted at a flow rate of 10 ll min1. The elution consisted of maintaining 100% A for 5 min, then a linear gradient from 0% to 6% B in 10 min, followed by another linear gradient from6% to 100% B in 5 min and finally 100% B was maintained for another 5 min. The column was equilibrated with the starting composition of the mobile phase for
30 min before each analytical run. The UV chromatogram was recorded at 280 nm with the DAD (diode-array detector) module (Agilent Technologies). Different control samples with known concentrations of each analysed component (0.05, 0.075, 0.1, 0.2 and
0.5 mg l 1) were also run in the same conditions. The mass spectrometer was operated in the positive mode, with a capillary spray voltage of 3500 V and a scan speed of 22000 (m/z)/s from50 to 500 m/z. The nebulizer gas (He) pressure was set to 30 psi and the drying gas was set to a flow of 6 l min1 at a temperature of 350 C. Mass spectra were obtained using the DataAnalysis program for LC/MSD Trap Version 3.2 (Bruker Daltonik, GmbH, Germany). For quantification of ABA, IAA, JA and Ze, calibration curves were con-
structed for each component analysed (0.05, 0.075, 0.1, 0.2 and0.5 mg l1) and corrected for 0.1 mg l1 internal standards:[2H5]trans-zeatin, [2H6]cis,trans-abscisic acid and [2
H5](±)-jasmonic acid (Olchemin Ltd., Olomouc, Czech Republic) and [13C6]indole-3-acetic acid (Cambridge Isotope Laboratories Inc., Andover, MA,USA). The ACC and SA were quantified by the external standard method using the same concentration range (purchased from Sigma–Aldrich Inc., St. Louis, MO, USA). Recovery percentages ranged between 92% and 95%. All samples were run in triplicate.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ฮอร์โมนและบัญชีได้ analysed ส่วนใหญ่ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (ภาค et al., 2008) วิเคราะห์จะถูกดำเนินบน systemconsisting การ HPLC/MS เป็น Agilent 1100 ชุด HPLC (Agilent เทคโนโลยี ซานตาคลารา CA, USA), พร้อม autosampler l wellplate และปั๊มรูพรุน การเชื่อมต่อกับการ Agilent จับไอออน XCT บวกโดยรวมสเปกโตรมิเตอร์ (Agilent เทคโนโลยี) ใช้อินเทอร์เฟซวิธีพ่นละอองไฟฟ้า (ESI) ก่อนฉีด 100 ของทุกฝ่ายจะได้ filtered ผ่าน filters Millex 13-มม.เส้นผ่าศูนย์กลางที่มีเยื่อไนล่อนขนาดรู$ 0.22-lm (มาก กลาสโกว์ MA สหรัฐอเมริกา) เฟสเคลื่อนประกอบด้วยกรด น้ำ/acetonitrile/formic (94.9:5:0.1) และโมบายเฟส B ประกอบด้วย acetonitrile/น้ำ/กรด (10:89.9:0.1) ใช้สำหรับแยก chromatographic ของแต่ละอย่าง 8 ll ละลายในระยะเคลื่อน A ถูกฉีดลงในคอลัมน์ HPLC Zorbax SB-C18 (5 lm, 150 0.5 มม. เทคโนโลยี Agilent), thermostated ที่ 40 C และ eluted ในอัตรา flow 10 1 นาทีจะ การ elution รักษา 100% A สำหรับ 5 นาทีประกอบด้วย แล้วไล่เส้นจาก 0% ถึง 6% B ใน 10 นาที ตาม ด้วยอีกเส้นไล่ระดับ from6% 100% B ใน 5 นาทีและ finally 100% B ได้รับการรักษาอีก 5 นาที คอลัมน์ถูก equilibrated กับองค์ประกอบเริ่มต้นของเฟสเคลื่อนที่สำหรับ30 นาทีก่อนทำการวิเคราะห์แต่ละ บันทึก UV chromatogram ที่ 280 nm กับโมพ่อ (ไดโอดอาร์เรย์จับ) (Agilent เทคโนโลยี) ตัวอย่างควบคุมต่าง ๆ ด้วยทราบความเข้มข้นของส่วนประกอบแต่ละ analysed (0.05, 0.075, 0.1, 0.2 และl 0.5 มิลลิกรัม 1) ถูกเรียกใช้ในเงื่อนไขเดียวกัน สเปกโตรมิเตอร์จำนวนมากถูกดำเนินในโหมดบวก มีเส้นเลือดฝอยสเปรย์แรงดันของ 3500 V และความเร็วการสแกนของ from50 /s (m/z) 22000 ไป 500 m/z มีการตั้งค่าความดันก๊าซ (เขา) ฝอยละอองถึง 30 psi และก๊าซแห้งที่ถูกตั้งค่าให้ flow 6 l นาที 1 ที่อุณหภูมิของมวล C. แรมสเป็คตราได้รับโดยใช้โปรแกรม DataAnalysis สำหรับ LC/มือ จับรุ่น 3.2 (Bruker Daltonik, GmbH เยอรมนี) 350 สำหรับ quantification ของ ABA, IAA, JA และหรุนเซ โค้งเทียบได้คอน-structed สำหรับคอมโพเนนต์แต่ละ analysed (0.075, 0.05, 0.1, 0.2 and0.5 มิลลิกรัม l1) และสำหรับมาตรฐานภายใน l 1 0.1 mg: [2H 5] ทรานส์ซีเอติน [2H 6] cis กรดแอบไซซิกทรานส์และ [2H5] (±) -กรดจัสโมนิก (Olchemin Ltd. โอโลมุช สาธารณรัฐเช็ก) และ [13 C 6] กรดอินโดล-3-อะซิติก (เคมบริดจ์ไอโซโทป Laboratories Inc. แอนโดเวอร์ MA สหรัฐอเมริกา) บัญชีและ SA ถูก quantified โดยวิธีมาตรฐานภายนอกที่ใช้ช่วงความเข้มข้นเดียวกัน (ซื้อจากซิก-Aldrich Inc., St. Louis, MO สหรัฐอเมริกา) เปอร์เซ็นต์การกู้คืนที่อยู่ในช่วงระหว่าง 92% และ 95% ตัวอย่างทั้งหมดถูกเรียกใช้ใน triplicate

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ฮอร์โมนและแม็กวิเคราะห์ส่วนใหญ่ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (อัลวา et al., 2008) การวิเคราะห์ได้ดำเนินการบน HPLC / MS systemconsisting ของ Agilent 1100 ซีรีส์ HPLC (Agilent Technologies, ซานตาคลารา, แคลิฟอร์เนียสหรัฐอเมริกา) พร้อมกับฉีดตัวอย่างอัตโนมัติ l-wellplate และปั๊มเส้นเลือดฝอยที่เชื่อมต่อกับ Agilent ไอออนกับดัก XCT พลัสมวล สเปกโตรมิเตอร์ (Agilent Technologies) ใช้ electrospray (ESI) อินเตอร์เฟซ ก่อนที่จะมีการฉีด 100 LL ส่วนของแต่ละสาย ltered ถึง 13 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลาง Millex ไฟกรองการมี 0.22 LM-เยื่อไนลอนขนาดรูขุมขน (คฟอร์ด, MA, USA) ขั้นตอนการมือถือประกอบด้วยน้ำ / acetonitrile / กรด (94.9: 5: 0.1) และ B เฟสเคลื่อนที่ที่ประกอบด้วยน้ำ / acetonitrile / กรด (10: 89.9: 0.1) ที่ใช้ในการแยกสาร ของแต่ละตัวอย่าง, 8 LL, กลืนหายไปในระยะที่มือถือถูกฉีดลงบน Zorbax SB-C18 คอลัมน์ HPLC (5 LM 150? 0.5 มม Agilent Technologies) thermostated ที่ 40 องศาเซลเซียสและชะในอัตราโอ๊ยชั้น 10 LL นาที 1 ชะประกอบด้วยการรักษา 100% สำหรับ 5 นาทีแล้วลาดเชิงเส้นจาก 0% ถึง 6% B ในเวลา 10 นาทีตามด้วยอีกลาดเชิงเส้น from6% ไป B 100% ใน 5 นาทีและสาย Nally 100% B ถูกเก็บรักษาไว้อีก 5 นาที. คอลัมน์ถูก equilibrated กับองค์ประกอบเริ่มต้นของเฟสเคลื่อนที่สำหรับ
30 นาทีก่อนที่จะทำงานแต่ละวิเคราะห์ chromatogram รังสียูวีเป็นบันทึกที่ 280 นาโนเมตรกับพ่อ (เครื่องตรวจจับไดโอดอาร์เรย์) โมดูล (Agilent Technologies) ตัวอย่างการควบคุมที่แตกต่างกันมีความเข้มข้นเป็นที่รู้จักกันของแต่ละองค์ประกอบวิเคราะห์ (0.05, 0.075, 0.1, 0.2 และ
0.5 มิลลิกรัมต่อลิตร? 1) ก็ยังทำงานในเงื่อนไขเดียวกัน สเปกโตรมิเตอร์มวลดำเนินการในโหมดบวกกับแรงดันสเปรย์ฝอย 3500 V และความเร็วในการสแกนของ 22000 (m / z) / s from50 ถึง 500 เมตร / z ก๊าซ nebulizer (เขา) ความดันถูกกำหนดให้วันที่ 30 ปอนด์ต่อตารางนิ้วและก๊าซอบแห้งถูกกำหนดให้ฟลอริด้าโอ๊ย 6 ลิตรนาที 1 ที่อุณหภูมิ 350 องศาเซลเซียส สเปกตรัมมวลที่ได้รับการใช้โปรแกรม DataAnalysis สำหรับดัก LC / เอ็มเอสรุ่น 3.2 (Bruker Daltonik, GmbH ประเทศเยอรมนี) สำหรับไอออนบวกสาย quanti ของ ABA, IAA, เจษรและเส้นโค้งการสอบเทียบที่ได้รับจะประกอบด้วย
structed สำหรับแต่ละองค์ประกอบวิเคราะห์ (0.05, 0.075, 0.1, 0.2 มิลลิกรัม and0.5 l1) และการแก้ไข 0.1 มิลลิกรัมต่อลิตรภายใน 1 มาตรฐาน: [2H5] ทรานส์ -zeatin [2H6] ถูกต้องกรดทรานส์แอบไซซิกและ [2
H5] (±) กรด -jasmonic (Olchemin จำกัด Olomouc, สาธารณรัฐเช็ก) และ [13C6] indole-3-กรดอะซิติก (เคมบริดจ์ไอโซโทปห้องปฏิบัติการอิงค์ Andover, MA, USA) แม็กและ SA เป็นสาย quanti ed โดยวิธีมาตรฐานภายนอกโดยใช้ช่วงความเข้มข้นเดียวกัน (ซื้อมาจาก Sigma-Aldrich อิงค์เซนต์หลุยส์สหรัฐอเมริกา) เปอร์เซ็นต์การกู้คืนอยู่ระหว่าง 92% และ 95% ตัวอย่างทั้งหมดได้รับการทำงานในเพิ่มขึ้นสามเท่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ฮอร์โมนและบัญชีวิเคราะห์ส่วนใหญ่ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( อัล et al . , 2008 ) การวิเคราะห์ได้ดำเนินการใน HPLC / MS ที่ประกอบด้วยการ Agilent 1100 ชุด HPLC ( Agilent Technologies , ซานตา คลาร่า , แคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา ) , อุปกรณ์ที่มี autosampler l-wellplate และปั๊มฝอย ,เชื่อมต่อกับด้านบวกไอออนกับดัก xct แมสสเปกโตรมิเตอร์ ( Agilent Technologies ) โดยใช้วิธีพ่นละอองไฟฟ้า ( ESI ) อินเตอร์เฟซ ก่อนฉีด 100 จะถูกถ่ายทอดผ่านแต่ละส่วน ltered 13 มม. เส้นผ่าศูนย์กลาง millex จึง lters มีขนาดรูพรุน 0.22-lm ไนลอนเมมเบรน ( มิลลิ , ฟอร์ด , MA , USA ) เป็นเฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยน้ำ / ไน / กรด ( 94.9:5:0 .1 ) และเฟสเคลื่อนที่ B ประกอบด้วยน้ำ / ไน / กรด ( 10:89.9:0.1 ) ใช้สำหรับแยกทางโครมาโทกราฟี ของแต่ละตัวอย่างที่ 8 จะละลายในเฟสเคลื่อนที่เป็น ถูกฉีดลงบน zorbax sb-c18 HPLC คอลัมน์ ( 5 , LM , 150  0.5 มม. Agilent Technologies ) thermostated 40  C และตัวอย่างที่flโอ๊ยอัตรา 10 จะมิน  1 การใช้จำนวนการรักษา 100% เป็นเวลา 5 นาทีแล้วลาดเชิงเส้นจาก 0% ถึง 6 % B ใน 10 นาที ตามด้วยเส้นไล่ระดับสีอื่น from6 % 100 % B ใน 5 นาที และจึงแนลลี่ 100% B ไว้อีก 5 นาที คอลัมน์ คือ เริ่ม equilibrated กับองค์ประกอบของเฟสเคลื่อนที่สำหรับ
ก่อนเวลา 30 นาทีแต่ละวิเคราะห์วิ่ง UV โครมาเป็นบันทึกที่ 280 nm กับพ่อ ( เครื่องตรวจจับเรย์ไดโอด ) โมดูล ( ด้านเทคโนโลยี )ตัวอย่างการควบคุมที่แตกต่างกันกับที่ทราบค่าความเข้มข้นของแต่ละวิเคราะห์องค์ประกอบ ( 0.075 , 0.05 , 0.1 , 0.2 และ 0.5 มิลลิกรัมต่อลิตร 
1 ) ยังวิ่งอยู่ในเงื่อนไขเดียวกัน สเปกโตรมิเตอร์มวล ดำเนินการในโหมดบวกกับเส้นเลือดฝอยพ่นแรงดัน 3500 V และสแกนความเร็วของ 22 , 000 ( M / Z ) s / from50 500 M / Znebulizer ก๊าซ ( เขา ) ความดัน 30 psi และการอบแห้งชุดแก๊สชุดไป . . fl 6 L มิน  1 ที่อุณหภูมิ 350 องศาเซลเซียส  มวลสเปกตรัม ที่ได้รับการใช้โปรแกรมการวิเคราะห์ข้อมูลสำหรับ LC / เอ็มเอสกับดักรุ่น 3.2 ( BRUKER daltonik GmbH , Germany ) สำหรับการไฟฟ้า การถ่ายทอดของเอบีเอ เอ และ ซี จาโค้งสอบเทียบเป็น con -
จากแต่ละส่วนประกอบวิเคราะห์ ( 0.05 , 0.1 , 0.2 and0 0.075 , .5 มก. L1 ) และการแก้ไขสำหรับ 0.1 mg L  1 ภายในมาตรฐาน : [ Trans ] 2h5 ซีเอติน [ 2h6 ] CIS , ทรานส์และกรด abscisic [ 2
h5 ] ( ± ) จังหวัดเอซอน ( olchemin จำกัด โอโลมุช , สาธารณรัฐเช็ก ) และ [ 13c6 ] กรดกระเพาะ ( เคมบริดจ์ไอโซโทปห้องปฏิบัติการอิงค์ , Andover , MA , USA ) ด้านบัญชีและซาการไฟฟ้าจึงเอ็ดโดยวิธีมาตรฐานภายนอกโดยใช้ช่วงความเข้มข้นเดียวกัน ( ซื้อจาก Sigma –ดิชอิงค์ , เซนต์หลุยส์ , มิสซูรี , สหรัฐอเมริกา ) กู้คืนค่าอยู่ระหว่างร้อยละ 92 ถึง 95 % ตัวอย่างทั้งหมดจะถูกเรียกใช้ทั้งสามใบ