samples to check for RNA integrity, followed by spectrophoto-metric quantification. Contaminating DNA was removed using aTURBO DNA-free kit (Ambion, www.ambion.com). RNA was thenreverse-transcribed using an iScriptTMcDNA synthesis kit (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA; www.bio-rad.com). Expressionanalysis of tomato drought stress marker genes (Solyc02g084840and Solyc03g025810) was performed by real-time PCR using anABI Prism 7000 sequence detection system (Applied Biosystems).These genes were selected because they are orthologous of Ara-bidopsis RAB18 and RD29B genes, respectively (Lang and Palva,1992; Cutler et al., 2010). Both RAB18 and RD29B are stronglyupregulated by drought (Ding et al., 2011). Quantitative PCR wasperformed using 40 ng cDNA and iQTMSYBR®Green Supermix (Bio-rad Laboratories, Hercules, CA; www.bio-rad.com), according tothe manufacturer’s instructions. SlEF1A (S. lycopersicum elongationfactor 1-alpha) and SlUBQ (S. lycopersicum ubiquitin) were used asreference genes. The relative quantization of each individual geneexpression was performed using the geometric averaging method(geNorm; http://medgen.ugent.be/∼jvdesomp/genorm/).
ตัวอย่างการตรวจสอบความสมบูรณ์ของอาร์เอ็นเอ ตาม spectrophoto วัดนับ ดีเอ็นเอขยะถูกเอาออกโดยใช้ชุดของดีเอ็นเอฟรี aTURBO (Ambion, www.ambion.com) อาร์เอ็นเอมี thenreverse-ทับศัพท์โดยใช้ชุดการสังเคราะห์ iScriptTMcDNA (ห้องปฏิบัติการชีวภาพ Rad เฮอร์คิวลิส CA, www.bio-rad.com) Expressionanalysis ของยีนเครื่องหมายความเครียดภัยแล้งของมะเขือเทศ (Solyc02g084840and Solyc03g025810) ที่ดำเนินการ โดย PCR แบบเรียลไทม์โดยใช้ระบบการตรวจสอบลำดับ anABI ปริซึม 7000 (Biosystems ใช้)ยีนเหล่านี้ถูกเลือกเพราะเป็น orthologous ของ Ara bidopsis ยีน RAB18 และ RD29B ตามลำดับ (Lang และ Palva, 1992 Cutler et al., 2010) ทั้ง RAB18 และ RD29B เป็น stronglyupregulated โดยภัยแล้ง (ดิง et al., 2011) Wasperformed PCR เชิงปริมาณที่ใช้ ng cDNA 40 และ iQTMSYBR ® Supermix เขียว (ห้องปฏิบัติการชีวภาพ rad เฮอร์คิวลิส CA, www.bio-rad.com), ตามคำแนะนำของผู้ผลิต SlEF1A (S. lycopersicum elongationfactor 1-อัลฟ่า) และ SlUBQ (S. lycopersicum ubiquitin) ยีน asreference ใช้ ทำ quantization ญาติของ geneexpression แต่ละแต่ละใช้วิธี averaging เรขาคณิต (geNorm, http://medgen.ugent.be/ ∼jvdesomp/genorm /)
การแปล กรุณารอสักครู่..

ตัวอย่างเพื่อตรวจสอบความสมบูรณ์ของอาร์เอ็นเอตามปริมาณ Spectrophoto-ตัวชี้วัด การปนเปื้อนดีเอ็นเอถูกลบออกโดยใช้ชุดดีเอ็นเอฟรี aTURBO (Ambion, www.ambion.com) อาร์เอ็นเอเป็น thenreverse-คัดลอกโดยใช้ชุดการสังเคราะห์ iScriptTMcDNA (ชีวภาพ -Rad ห้องปฏิบัติการ, ดาว, CA; www.bio-rad.com) Expressionanalysis ของยีนเครื่องหมายความเครียดภัยแล้งมะเขือเทศ (Solyc02g084840and Solyc03g025810) ได้รับการดำเนินการโดย Real-time PCR โดยใช้ Anabi ปริซึม 7000 ระบบการตรวจสอบลำดับ (Applied Biosystems) ยีนเหล่านี้ได้รับการคัดเลือกเพราะพวกเขาเป็น orthologous ของ RAB18 บูชา-bidopsis และยีน RD29B ตามลำดับ (Lang และพอลว่า 1992;. ด et al, 2010) ทั้ง RAB18 และ RD29B จะ stronglyupregulated จากภัยแล้ง (Ding et al., 2011) ปริมาณ PCR wasperformed ด้วยเทคนิค cDNA 40 ng และiQTMSYBR®Green Supermix (ไบโอราดห้องปฏิบัติการ, ดาว, CA; www.bio-rad.com) ตาม tothe คำแนะนำของผู้ผลิต SlEF1A (เอส lycopersicum elongationfactor 1-alpha) และ SlUBQ (เอส lycopersicum ubiquitin) ถูกนำมาใช้ asreference ยีน วอนญาติของแต่ละ geneexpression บุคคลได้ดำเนินการโดยใช้วิธีการเฉลี่ยเรขาคณิต (geNorm; http://medgen.ugent.be/~jvdesomp/genorm/)
การแปล กรุณารอสักครู่..

ตัวอย่างของการตรวจสอบเพื่อดูความสมบูรณ์ ตามด้วย spectrophoto เมตริกตันปริมาณ . ปนเปื้อนดีเอ็นเอถูกใช้ aturbo ดีเอ็นเอฟรี Kit ( ambion www.ambion , . com ) ซึ่งเป็น thenreverse และใช้ iscripttmcdna การสังเคราะห์ Kit ( ไบโอ ราดห้องปฏิบัติการ , Hercules , CA ; www.bio-rad . com )expressionanalysis ภัยแล้งมะเขือเทศความเครียดเครื่องหมายยีน ( solyc02g084840and solyc03g025810 ) โดยใช้ PCR แบบเรียลไทม์ โดยใช้ anabi ปริซึม 7000 ลำดับระบบตรวจจับ ( Applied Biosystems ) ยีนเหล่านี้ถูกเลือกเพราะพวกเขามี orthologous ของอารา bidopsis และ rab18 rd29b ยีนตามลำดับ ( Lang และ palva , 1992 ; Cutler et al . , 2010 )และเป็นทั้ง rab18 rd29b stronglyupregulated จากภัยแล้ง ( Ding et al . , 2011 ) เทคนิคเชิงปริมาณและการใช้ยีน iqtmsybr 40 ng และ®สีเขียว supermix ( ไบโอ ราดห้องปฏิบัติการ , Hercules , CA ; www.bio-rad . com ) และตามคำแนะนำของผู้ผลิต slef1a ( S . lycopersicum elongationfactor 1-alpha ) และ slubq ( S . lycopersicum ข้างนอก ) ใช้ประกอบการตัดสินใจในการยีนโดยอาศัยญาติของแต่ละบุคคล geneexpression โดยใช้รูปทรงเรขาคณิตวิธีการเฉลี่ย ( genorm ; http : / / medgen . เกนต์ . / ∼ jvdesomp / genorm / )
การแปล กรุณารอสักครู่..
