Bioreactor experimentsA 2L dished b

Bioreactor experiments
A 2L dished bottom bioreactor Z6110/Coob (Cole-Parmer Instrument) was used,
which consisted of 3 liter vessel equipped with lipseal stirrer assembly, automatic pH
controller, automatic dissolved O2 controller, CO2 controller, automatic temperature
controller, foam controller and multi-channel peristaltic pump (for feeding). The
PHAs producing bacteria were grown in the bioreactor as batch, two-stage batch and
fed-batch (pulsed, continuous and high cell density) cultivation. During all
fermentations, temperature, dissolved O2 and agitation speed were kept at 30°C,
20% of saturation and 500 rpm, respectively. Initial pH was adjusted to 7±0.1 which
was not controlled during the fermentation period. Samples (10 ml) were aseptically
withdrawn from the fermentation vessel periodically. The samples were centrifuged
at 15000 x g for 4 min at 4°C. The sediment (biomass) was washed twice with
distilled water, and then dried at 70°C to constant weight. Polymer in bacterial cells
was determined using the chloroform-sodium hypochlorite method (Hahn et al.,
1994). Residual carbon was determined in supernatant according to Walinga et al.
(1992). PHAs and copolymer parameters were calculated. The parameters of
polymer production; yield (%), conversion coefficient (%) and carbon utilization
efficiency were calculated according to Ramadan et al. (1985). Polymer content (%)
and productivity were calculated according to Lee & Choi (1998) and Lee (1996),
respectively.
Bioreactor as a batch culture (one-stage)
In this experiment, the fermentation vessel containing 1950 ml productive
medium was autoclaved at 121°C for 20 min. The bioreactor was inoculated with
1% standard inoculum (5 x 108 cfu/ml) of Ps. fluorescens S48. The final working
volume was 2 liter.
Bioreactor as two-stage culture
The production of PHAs was carried out by two-stage cultivation. In the first
stage, 1 liter of nutrient broth inoculum culture of Ps. fluorescens S48 was
centrifuged at 15000 x g for 4 min at 4°C and the bacterial cells were collected
and suspended in additional sterile productive medium to inoculate the
fermentation vessel to give a final working volume of 1 liter.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การทดลอง bioreactorใช้ 2L สกล่างถังปฏิกรณ์ชีวภาพ Z6110/Coob (โคล Parmer มือ)ซึ่งประกอบด้วยเรือ 3 ลิตรมี lipseal ช้อนคนชุมนุม pH อัตโนมัติควบคุม อัตโนมัติละลายอุณหภูมิอัตโนมัติ ควบคุม CO2, O2 ควบคุมควบคุม ควบคุมโฟม และปั๊ม peristaltic หลายช่อง (สำหรับให้อาหาร) การแบคทีเรียผลิต PHAs ที่ปลูกในถังปฏิกรณ์ชีวภาพที่เป็นชุด ชุดสองขั้นตอน และการเพาะปลูกเลี้ยงชุด (ความหนาแน่นเซลล์พัล ต่อเนื่อง และสูง) ในระหว่างที่ทั้งหมดหมักแหนม อุณหภูมิ O2 ละลาย และก่อกวนความเร็วที่ถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 30° C20% ของความเข้มและ 500 rpm ตามลำดับ ปรับปรุงค่า pH เริ่มต้นเพื่อ 7±0.1 ซึ่งถูกควบคุมในช่วงระยะเวลาหมัก ตัวอย่าง (10 ml) ถูก asepticallyถอนออกจากภาชนะหมักเป็นระยะ ๆ ตัวอย่างได้จากที่ 15000 x กรัมสำหรับ 4 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส ตะกอน (ชีวมวล) ถูกล้างสองครั้งด้วยน้ำกลั่น และอบแห้งที่อุณหภูมิ 70° C น้ำหนักคง พอลิเมอร์ในเซลล์แบคทีเรียกำหนดโดยใช้วิธีคลอโรฟอร์มโซเดียมไฮโปคลอไรต์ (Hahn et al.,1994) กำหนดคาร์บอนที่ตกค้างใน supernatant ตาม Walinga et al(1992) คำนวณ PHAs และพารามิเตอร์โคพอลิเมอร์ พารามิเตอร์ของการผลิตพอลิเมอร์ ผลผลิต (%), สัมประสิทธิ์การแปลง (%) และการใช้ประโยชน์ของคาร์บอนประสิทธิภาพมีคำนวณตามรอมฎอน et al. (1985) เนื้อหาพอลิเมอร์ (%)และผลผลิตถูกคำนวณตามลี แอนด์ชอย (1998) และลี (1996),ตามลาดับถังปฏิกรณ์ชีวภาพเป็นชุดวัฒนธรรม (ระยะหนึ่ง)ในการทดลองนี้ เรือหมัก 1950 ml ผลิตที่ประกอบด้วยกลางถูกนึ่ง 121° c 20 นาที ถังปฏิกรณ์ชีวภาพถูก inoculated กับ1% มาตรฐาน inoculum (5 x 108 cfu/ml) ของชุบ fluorescens S48 การทำงานขั้นสุดท้ายจุได้ 2 ลิตรถังปฏิกรณ์ชีวภาพวัฒนธรรมสองขั้นตอนการผลิต PHAs ได้ดำเนินการ โดยสองขั้นตอนการเพาะปลูก ในครั้งแรกชาว 1 ลิตรของสารอาหารซุป inoculum วัฒนธรรมของชุบ fluorescens S48จากที่ 15000 x กรัมสำหรับ 4 นาทีที่ 4° C และเซลล์แบคทีเรียที่ถูกเก็บรวบรวมและระงับในเพิ่มเติมผ่านการฆ่าเชื้อมีประสิทธิภาพปานกลางปลูกฝีภาชนะหมักจะให้เสียงทำงานสุดท้ายของ 1 ลิตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การทดลองเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพแบบ
2L dished เครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพด้านล่าง Z6110 / Coob (โคล Parmer ตราสาร) ถูกนำมาใช้
ซึ่งประกอบด้วย 3 เรือลิตรพร้อมกับการชุมนุม lipseal กวนค่า pH อัตโนมัติ
ควบคุมอัตโนมัติควบคุม O2 ละลายควบคุม CO2 อุณหภูมิอัตโนมัติ
ควบคุมควบคุมโฟมและ หลายช่องทางปั๊ม peristaltic (สำหรับการให้อาหาร)
PHAs แบคทีเรียที่ผลิตถูกปลูกในเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพเป็นชุดชุดสองขั้นตอนและ
เฟดแบทช์ (ชีพจรต่อเนื่องและความหนาแน่นของเซลล์สูง) การเพาะปลูก ในทุก
กระบวนการหมักอุณหภูมิละลาย O2 และกวนความเร็วจะถูกเก็บไว้ที่ 30 ° C,
20% ของความอิ่มตัวและ 500 รอบต่อนาทีตามลำดับ pH เริ่มต้นการปรับถึง 7 ± 0.1 ซึ่ง
ไม่ได้ถูกควบคุมในช่วงระยะเวลาการหมัก ตัวอย่าง (10 มล.) ได้รับการปลอดเชื้อ
ถอนตัวออกจากเรือหมักเป็นระยะ ๆ ตัวอย่างถูกหมุนเหวี่ยง
ที่ 15000 XG 4 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส ตะกอน (ชีวมวล) ครั้งที่สองถูกล้างด้วย
น้ำกลั่นแล้วแห้งที่ 70 ° C ถึงน้ำหนักคงที่ ลิเมอร์ในเซลล์แบคทีเรีย
ถูกกำหนดโดยใช้วิธีคลอโรฟอร์มโซเดียมไฮโปคลอไรต์ (Hahn et al.,
1994) คาร์บอนที่เหลือถูกกำหนดในสารละลายตาม Walinga et al.
(1992) PHAs และพารามิเตอร์ลิเมอร์ที่ถูกคำนวณ พารามิเตอร์ของการ
ผลิตพอลิเมอ; อัตราผลตอบแทน (%) ค่าสัมประสิทธิ์การแปลง (%) และการใช้คาร์บอน
ที่มีประสิทธิภาพจะถูกคำนวณตามเดือนรอมฎอน, et al (1985) เนื้อหาพอลิเมอ (%)
และการผลิตจะถูกคำนวณตาม Lee & Choi (1998) และลี (1996),
ตามลำดับ.
เครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพเป็นวัฒนธรรมชุด (หนึ่งขั้นตอน)
ในการทดลองนี้เรือหมักที่มี 1,950 มล. ผลิต
สื่อที่ได้รับการนึ่งฆ่าเชื้อที่ 121 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาที เครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพได้รับเชื้อด้วย
เชื้อมาตรฐาน 1% (5 x 108 CFU / ml) ของ ps fluorescens S48 การทำงานสุดท้าย
ปริมาณ 2 ลิตร.
เครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพเป็นวัฒนธรรมสองขั้นตอน
การผลิต PHAs ได้ดำเนินการโดยการเพาะปลูกสองขั้นตอน ในครั้งแรกที่
เวที 1 ลิตรของวัฒนธรรมน้ำซุปหัวเชื้อสารอาหารของ ps fluorescens S48 ถูก
หมุนเหวี่ยงที่ 15000 XG 4 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียสและเซลล์แบคทีเรียที่ถูกเก็บรวบรวม
และการระงับการผลิตในระดับปานกลางเพิ่มเติมผ่านการฆ่าเชื้อเพื่อฉีดวัคซีน
เรือหมักเพื่อให้ปริมาณการทำงานสุดท้ายของ 1 ลิตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ขนาดทดลองเป็นเครื่อง 2L ได้ด้านล่าง z6110 / coob ( โคล พาร์เมอร์เครื่องดนตรี ) ที่ใช้ซึ่งประกอบด้วย 3 ลิตรเรือพร้อมกับ lipseal หมุนอัตโนมัติประกอบอควบคุมอัตโนมัติ , O2 CO2 ที่ละลายในน้ำควบคุมอุณหภูมิอัตโนมัติควบคุมปั๊ม peristaltic และหลายช่องทาง โฟม ( สำหรับอาหาร ) ที่แบคทีเรียที่ผลิตยังเติบโตในแบบเป็นชุด สองชุดเลี้ยงรุ่น ( พัลอย่างต่อเนื่องและความหนาแน่นเซลล์สูง ) ปลูก ในทั้งหมดfermentations อุณหภูมิ ปริมาณออกซิเจนและอัตราการกวนไว้ที่ 30 องศา C20 % ของความเข้มและ 500 รอบต่อนาที ตามลำดับ ปรับพีเอชเริ่มต้น 7 ± 0.1 ซึ่งไม่ได้ถูกควบคุมในช่วงระยะเวลาการหมัก ตัวอย่าง ( 10 ml ) asepticallyถอนตัวจากการหมักเรือเป็นระยะ ๆ จำนวนระดับ12 , 000 x g 4 นาทีที่ 4 ° C ( ชีวมวล ) ตะกอนล้างสองครั้งด้วยน้ำกลั่น แล้วอบที่อุณหภูมิ 70 องศา C น้ำหนักคงที่ พอลิเมอร์ในเซลล์แบคทีเรียตั้งใจใช้คลอโรฟอร์มวิธีโซเดียมไฮโปคลอไรต์ ( Hahn et al . ,1994 ) คาร์บอนที่เหลือคือความตั้งใจสูงตาม walinga et al .( 1992 ) และยัง - พารามิเตอร์ได้ พารามิเตอร์ของการผลิตพอลิเมอร์ ผลตอบแทน ( % ) , สัมประสิทธิ์การเปลี่ยนแปลง ( % ) และการใช้คาร์บอนประสิทธิภาพได้ตามเดือนรอมฎอน et al . ( 1985 ) ปริมาณพอลิเมอร์ ( % )และผลผลิตได้ตามลี & ชอย ( 1998 ) และ ลี ( 1996 )ตามลำดับแบบเป็นชุด ( one-stage ) วัฒนธรรมในการทดลองนี้ เรือที่มีประสิทธิภาพการหมัก 1950 มลอาหารสังเคราะห์ที่ 121 ° C เป็นเวลา 20 นาที ( เป็นเชื้อด้วย1 % เชื้อมาตรฐาน ( 5 x 108 CFU / ml ) ปล . fluorescens s48 . สุดท้ายทำงานปริมาณ 2 ลิตรเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพเป็นวัฒนธรรมสองขั้นตอนการผลิตยังกระทำโดยการปลูกแบบ . ในที่แรกเวที 1 ลิตรของน้ำปริมาณธาตุอาหารของโรค s48 เป็นวัฒนธรรม .ระดับ 12 , 000 x g 4 นาทีที่ 4 ° C และจำนวนเซลล์แบคทีเรียอยู่ในงานผลิตสื่อแก่ที่เพิ่มเติมภาชนะที่หมักให้ปริมาณงานสุดท้าย 1 ลิตร