Scanning electron microscopyScannin

Scanning electron microscopy
Scanning electron microscopy was used to visualize
BOEC polarity (i.e., monolayer formation, confluency, cell
orientation) and differentiation level of BOECs grown on
polyester membranes of hanging inserts (ThinCert, Greiner
Bio-One). Hereto, BOEC monolayers were washed twice
with Krebs solution and fixed with 2.5% glutaraldehyde (in
0.1-M Naþ-cacodylate) at 4 C for 24 hours. The cells were
rinsed three times for 20 minutes in cacodylate buffer containing
7.5% saccharose after which the insert membranes
(polyester) were removed from their polystyrene housing
and placed in a clean well of a 12-well plate containing
cacodylate buffer. Subsequently, cells were dehydrated in an
ascending series of ethanol concentrations (70%, 90%, 95%
each for 15 minutes at room temperature, and 100%, three
times, for 30 minutes) and submitted to critical point drying
in a Leica EM CPD030 after which the monolayers were
mounted on a stub and gold coated in a sputter coater.
Scanning electron microscopy imagingwas performed with
an SEM 515 (Philips, The Netherlands) at different magnifications.
Monolayers were assessed on cell polarity, the
presence of microvilli and cilia, monolayer integrity, and cell
growth [35]. For each treatment, two monolayers were
processed, and all results are descriptive, not quantified.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนสแกนกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราดถูกใช้ในการเห็นภาพขั้วBOEC (เช่นการก่อ monolayer, confluency เซลล์ปฐมนิเทศ) และระดับความแตกต่างของ BOECs ปลูกในเยื่อโพลีเอสเตอร์แทรกแขวน(ThinCert, Greiner Bio-One) ท้าย, monolayers BOEC ถูกล้างครั้งที่สองกับการแก้ปัญหามะเร็งและแก้ไขด้วยglutaraldehyde 2.5% (ใน0.1-M-cacodylate ภูมิพลอดุลยเดช) วันที่ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง เซลล์ที่ถูกล้างสามครั้งเป็นเวลา 20 นาทีในบัฟเฟอร์ cacodylate มี saccharose 7.5% หลังจากที่เยื่อแทรก(โพลีเอสเตอร์) ที่ถูกถอดออกจากที่อยู่อาศัยของพวกเขาสไตรีนและวางไว้ในที่สะอาดเป็นอย่างดีของแผ่น12 ดีที่มีบัฟเฟอร์cacodylate ต่อจากนั้นเซลล์ถูกอบแห้งในซีรีส์จากน้อยไปมากความเข้มข้นของเอทานอล (70%, 90%, 95% ในแต่ละเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิห้องและ 100% สามครั้งเป็นเวลา30 นาที) และส่งไปอบแห้งจุดสำคัญในLeica EM CPD030 หลังจากที่ monolayers ถูกติดตั้งอยู่บนต้นขั้วและทองเคลือบCoater ปะทุได้. กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนสแกน imagingwas ดำเนินการกับSEM 515 (ฟิลิปส์, เนเธอร์แลนด์) ที่กำลังขยายที่แตกต่างกัน. monolayers มีการประเมินในขั้วของเซลล์ที่การปรากฏตัวของmicrovilli และตา สมบูรณ์ monolayer และเซลล์เจริญเติบโต[35] สำหรับการรักษาแต่ละสอง monolayers ถูกประมวลผลและผลทั้งหมดจะอธิบายไม่ได้วัด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสแกนกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน
กล้องจุลทรรศน์อิเลคตรอนแบบส่องกราด เคยเห็นภาพ
เลี้ยงขั้ว ( เช่น อย่างการ confluency ปฐมนิเทศเซลล์
) และการเติบโตในระดับ boecs
โพลีเอสเตอร์เยื่อแขวนแทรก ( thincert ไกรเนอร์ไบโอ ,
) เลี้ยงได้ซัก 2 ครั้ง เพื่อ monolayers ,
กับปูโซลูชั่นและแก้ไขด้วย 2.5% glutaraldehyde (
0- จากนั้นนำกรด na þ ) ที่ 4  เป็นเวลา 24 ชั่วโมง เซลล์ถูก
ล้างสามครั้งเป็นเวลา 20 นาทีจากนั้นนำในบัฟเฟอร์ที่มี
7.5% แซคคาโรสหลังจากที่ใส่เยื่อ
( โพลีเอสเตอร์ ) ถูกถอดออกจากพอลิสไตรีนที่อยู่อาศัย
และวางไว้ในสะอาดดี ของดี
จากนั้นนำจานที่มีบัฟเฟอร์ เมื่อเซลล์มีการแห้งใน
ขึ้นชุดความเข้มข้นเอทานอล ( 70% , 90% ,95 %
แต่ละ 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง และ 100 % 3
ครั้ง นาน 30 นาที ) และส่งให้
แห้ง จุดวิกฤตในไลก้าเอ็ม cpd030 หลังจากที่ monolayers ถูก
ติดโคนและทองเคลือบในละล่ำละลักเครื่องเคลือบ
สแกนกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนการ imagingwas
เป็น SEM 515 ( ฟิลิปส์ , เนเธอร์แลนด์ ) ที่ magnifications แตกต่าง
monolayers ครั้ง ในมือถือจ
มี cilia อย่างสมบูรณ์ และพบ , และการเจริญเติบโตของเซลล์
[ 35 ] สำหรับการรักษาแต่ละ สอง monolayers ถูก
ประมวลผล และผลทั้งหมดจะพรรณนา ไม่สามารถวัดได้