.
In vitro AChE activity
Rats were killed and the cerebral tissue was rapidly dissected and placed on ice. Tissues were immediately homogenized in cold 50 mM Tris–HCl, pH 7.5 (1/10, w/v). The homogenate was centrifuged for 10 min at 4000 × g to yield a pellet that was discarded and a low-speed supernatant (S1) that was used for the AChE assay. AChE was determined according to Ellman et al. (1961) modified by Rocha et al. (1993). The reaction mixture (2 mL final volume) was composed of 100 mM phosphate buffer pH 7.5, 1 mM 5,5'-dithio-bis-2-nitrobenzoic acid (DTNB). The method is based on the formation of yellow anion, 4,4'-dithio-bis-2-nitrobenzoic measured by absorbance at 412 nm during 5 min at 25 °C. An aliquot of 100 µL of S1 was pre-incubated in the presence or absence of plant extracts (0, 1, 10, 100 and 1000 µg/mL) or isolated compounds (quercetin or gallic acid 0, 0.1, 1 and 10 µg/mL) for 20 min. The reaction was initiated by adding 0.8 mM acetylthiocholine iodide. The enzyme activity was estimated in terms of percentage change in absorbance compared to the control. Physostigmine (Eserine) 1 µM was used as the reference standard.
. In vitro AChE activityRats were killed and the cerebral tissue was rapidly dissected and placed on ice. Tissues were immediately homogenized in cold 50 mM Tris–HCl, pH 7.5 (1/10, w/v). The homogenate was centrifuged for 10 min at 4000 × g to yield a pellet that was discarded and a low-speed supernatant (S1) that was used for the AChE assay. AChE was determined according to Ellman et al. (1961) modified by Rocha et al. (1993). The reaction mixture (2 mL final volume) was composed of 100 mM phosphate buffer pH 7.5, 1 mM 5,5'-dithio-bis-2-nitrobenzoic acid (DTNB). The method is based on the formation of yellow anion, 4,4'-dithio-bis-2-nitrobenzoic measured by absorbance at 412 nm during 5 min at 25 °C. An aliquot of 100 µL of S1 was pre-incubated in the presence or absence of plant extracts (0, 1, 10, 100 and 1000 µg/mL) or isolated compounds (quercetin or gallic acid 0, 0.1, 1 and 10 µg/mL) for 20 min. The reaction was initiated by adding 0.8 mM acetylthiocholine iodide. The enzyme activity was estimated in terms of percentage change in absorbance compared to the control. Physostigmine (Eserine) 1 µM was used as the reference standard.
การแปล กรุณารอสักครู่..

.
ในหลอดทดลองกิจกรรมเจ็บหนูถูกฆ่าตายและเนื้อเยื่อสมองที่ถูกชำแหละอย่างรวดเร็วและวางไว้บนน้ำแข็ง เนื้อเยื่อถูกหดหายทันทีในเย็น 50 มิลลิ Tris-HCl, pH 7.5 (1/10 w / v) homogenate ถูกปั่นเป็นเวลา 10 นาทีที่ 4000 ×กรัมจะให้ผลผลิตเม็ดที่ถูกทิ้งและใสความเร็วต่ำ (S1) ที่ใช้สำหรับการทดสอบเจ็บ เจ็บถูกกำหนดตาม Ellman et al, (1961) แก้ไขโดยโรเอตอัล (1993) ผสมปฏิกิริยา (2 ปริมาณมลสุดท้าย) ประกอบด้วย 100 มิลลิค่า pH ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 7.5, 1 มิลลิ 5,5'-dithio ทวิ-2-nitrobenzoic กรด (DTNB) วิธีการที่จะขึ้นอยู่กับการก่อตัวของไอออนสีเหลือง 4,4'-dithio ทวิ-2-nitrobenzoic วัดจากการดูดกลืนแสงที่ 412 นาโนเมตรในช่วง 5 นาทีที่ 25 ° C หาร 100 ไมโครลิตรของ S1 ได้รับก่อนการบ่มในที่ที่มีหรือไม่มีสารสกัดจากพืช (0, 1, 10, 100 และ 1,000 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) หรือสารที่แยก (quercetin หรือกรดฝรั่งเศส 0, 0.1, 1 และ 10 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) เป็นเวลา 20 นาที ปฏิกิริยาที่ได้ริเริ่มขึ้นโดยการเพิ่ม 0.8 มิลลิ acetylthiocholine ไอโอไดด์ เอนไซม์เป็นที่คาดกันในแง่ของอัตราการเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงเมื่อเทียบกับการควบคุม สติก (Eserine) 1 ไมครอนถูกใช้เป็นมาตรฐานอ้างอิง
การแปล กรุณารอสักครู่..

.
การปวดกิจกรรม
หนูถูกฆ่าและชำแหละเนื้อสมองเป็นอย่างรวดเร็วและวางไว้บนน้ำแข็ง เนื้อเยื่อที่เป็นโฮโมทันทีในเย็น 50 มม. โดย–กรดไฮโดรคลอริก pH 7.5 ( 1 / 10 W / V ) โดยแยกเป็นระดับ 10 นาทีที่ 4 ×กรัมให้ผลผลิตเม็ดที่ถูกทิ้งและต่ำความเร็วสูง ( S1 ) ที่ใช้สำหรับอาการปวด ตามลำดับ ปวดก็กำหนดตามเอลเมิ่น et al .( 1961 ) แก้ไขโดย Rocha et al . ( 1993 ) ปฏิกิริยาผสม ( 2 มล. สุดท้ายเล่ม ) จำนวน 100 mM ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.5 , 1 มม. 5 , 5 ' - dithio-bis-2-nitrobenzoic acid ( dtnb ) โดยอาศัยโครงสร้างของไอออนสีเหลือง , 4 - dithio-bis-2-nitrobenzoic วัดการดูดกลืนแสงที่ 412 นาโนเมตรในช่วง 5 นาทีที่ 25 ° Cเป็นส่วนลงตัวของ 100 µ L S1 เป็น Pre บ่มในการแสดงตนหรือขาดสารสกัดจากพืช ( 0 , 1 , 10 , 100 และ 1000 µ g / ml ) หรือแยกสาร ( เคอร์หรือเพิ่มขึ้น 0 , 0.1 , 1 และ 10 µ g / ml ) 20 นาที ปฏิกิริยาที่ถูกริเริ่มโดยการเพิ่มไอโอไดด์ acetylthiocholine 0.8 มิลลิเมตร กิจกรรมของเอนไซม์ถูกประเมินในแง่ของร้อยละของการเปลี่ยนแปลงในค่าเมื่อเทียบกับการควบคุมphysostigmine ( เซอรีน ) 1 µเมตรถูกใช้เป็นมาตรฐานอ้างอิง
การแปล กรุณารอสักครู่..
