Viability assay by staining for apo

Viability assay by staining for apoptotic cells with the fluorescent dye ethidium bromide is also based on the principle of dye exclusion. The ethidium bromide homodimer can permeate dead cells and fluorescently stain the nuclei as it chelates DNA; intact cells remain unstained. 7,20
When viewed under a fluorescence microscope, the nuclei of dead cells have a bright red fluorescence. 21 The other fluorescent dye frequently used in similar experiments is propidium iodide (PI). PI is also a membrane impermeable nuclear dye, under a fluorescence microscope the stained dead cells emit red fluorescence upon green excitation. 6,22,23
The advantage of using both these dyes for viability assay is that in addition to distinguishing between live and dead cells based on membrane integrity, they also stain the nucleus, and thus
differentiate a normal nucleus from a condensed, apoptotic one. One advantage of using fluorescent dyes for cell viability assay over trypan blue is that the count of stained cells remains constant with time. 24
However, while counting several hundred cells under a fluorescence microscope, the fluorescent dye tends to bleach. This problem is overcome by photographing various fields and counting stained cells from the photographs.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ชีวิตวิเคราะห์ โดยย้อมสีสำหรับเซลล์ apoptotic โบรไมด์ ethidium ย้อมฟลูออเรสยังอยู่บนหลักการของการแยกสี Homodimer โบรไมด์ ethidium สามารถ permeate เซลล์ตาย และ fluorescently ติดแอลฟาเป็นดีเอ็นเอ chelates นั้น เซลล์เหมือนเดิมยังคง unstained 7,20เมื่อดูภายใต้กล้องจุลทรรศน์ fluorescence แอลฟาเซลล์ตายมี fluorescence สีแดงที่สดใส 21 อื่น ๆ ฟลูออเรสย้อมมักใช้ในการทดลองที่คล้ายกันคือ propidium ไอโอไดด์ (PI) PI เป็นสีนิวเคลียร์การซึมผ่านของเมมเบรน ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ fluorescence เซลล์ตายทิ้งคราบกิ๊ก fluorescence สีแดงตามสีเขียวในการกระตุ้น 6,22,23ประโยชน์ของการใช้สีเหล่านี้ทั้งเป็นนี้วิเคราะห์ ว่า นอกจากการแยกความแตกต่างระหว่างเซลล์ตาย และสดขึ้นอยู่กับความสมบูรณ์ของเมมเบรน พวกเขายังติดนิวเคลียส และดังนั้นแบ่งแยกนิวเคลียสปกติจาก apoptotic บีบ หนึ่ง ประโยชน์ข้อหนึ่งของการใช้สีเรืองแสงสำหรับวิเคราะห์ชีวิตของเซลล์ผ่าน trypan blue เป็นที่จำนวนเซลล์ทิ้งคราบยังคงคงที่กับเวลา 24อย่างไรก็ตาม ในขณะที่นับหลาย ๆ ร้อยเซลล์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ fluorescence ย้อมฟลูออเรสมีแนวโน้มที่จะ ฟอกสี ปัญหานี้เป็นการเอาชนะ โดยเขตข้อมูลต่าง ๆ การถ่ายภาพ และการนับสีเซลล์จากภาพ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การทดสอบความมีชีวิตโดยการย้อมสีเซลล์ apoptotic กับสีย้อมเรืองแสง ethidium bromide ยังเป็นไปตามหลักการของการยกเว้นสีย้อม โบรไมด์ ethidium homodimer สามารถซึมเซลล์ที่ตายแล้วและ fluorescently เปื้อนนิวเคลียสในขณะที่มัน chelates ดีเอ็นเอ ยังคงอยู่เหมือนเดิมเซลล์ไม่มีรอยเปื้อน 7,20
เมื่อดูภายใต้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงนิวเคลียสของเซลล์ที่ตายแล้วมีการเรืองแสงสีแดงสดใส 21 สีย้อมเรืองแสงอื่น ๆ ที่ใช้บ่อยในการทดลองที่คล้ายกันคือไอโอไดด์ propidium (PI) PI นี้ยังมีเยื่อสีย้อมนิวเคลียร์ผ่านไม่ได้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงเซลล์ที่ตายแล้วออกมาสีเรืองแสงสีแดงเมื่อกระตุ้นสีเขียว 6,22,23
ประโยชน์ของการใช้ทั้งสีเหล่านี้สำหรับการทดสอบความมีชีวิตคือการที่นอกเหนือไปจากความแตกต่างระหว่างเซลล์ที่อยู่อาศัยและที่ตายแล้วขึ้นอยู่กับความสมบูรณ์ของเมมเบรนที่พวกเขายังเปื้อนนิวเคลียสและทำให้
ความแตกต่างจากปกตินิวเคลียสย่อ apoptotic หนึ่ง ข้อดีอย่างหนึ่งของการใช้สีเรืองแสงสำหรับการทดสอบความมีชีวิตเซลล์มากกว่าสีฟ้า Trypan คือนับเซลล์สียังคงมีเวลา 24
อย่างไรก็ตามในขณะที่การนับหลายร้อยเซลล์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง, สีย้อมเรืองแสงมีแนวโน้มที่จะฟอกสี ปัญหานี้จะเอาชนะโดยการถ่ายภาพด้านต่าง ๆ และการนับเซลล์สีจากภาพถ่าย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

และการทดสอบโดยการย้อมด้วยสีย้อมฟลูออเรสเซนต์สำหรับเนื้อเยื่อทิเดียมโบรไมด์จะขึ้นอยู่กับหลักการของสียกเว้น ทิเดียมโบรไมด์โฮโมไดเมอร์ที่สามารถซึมผ่านเซลล์ที่ตาย และคราบ fluorescently นิวเคลียสเป็นคีเลตดีเอ็นเอ ของเซลล์ยังคงไม่มีรอยเปื้อน 7,20
เมื่อมองภายใต้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง , นิวเคลียสของเซลล์ที่ตายแล้วมีการเรืองแสงสีแดงสด21 อีกเรืองแสงย้อมบ่อยที่ใช้ในการทดลองที่คล้ายคลึงกันคือ propidium ไอโอไดด์ ( PI ) พี่ยังไม่ได้ย้อมเยื่อนิวเคลียร์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงย้อมเซลล์ตายคายเรืองแสงสีแดงบนแผ่นสีเขียว 6,22,23
ประโยชน์ของการใช้ทั้งสองสีเหล่านี้สามารถทดสอบว่านอกจากจะแตกต่างอยู่ระหว่างเซลล์ที่ตายแล้วและยึดเยื่อความซื่อสัตย์ พวกเขายังคราบนิวเคลียสจึง
แยกนิวเคลียสปกติจากย่อกลุ่มที่มีหนึ่งหนึ่งประโยชน์ของการใช้สีเรืองแสงสำหรับเซลล์ ( กว่าไตรแพนสีฟ้านั่นนับย้อมเซลล์คงที่กับเวลา 24
ในขณะที่นับหลายร้อยเซลล์ภายใต้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง , สีเรืองแสง มีแนวโน้มที่จะ เทพมรณะ ปัญหานี้ถูกเอาชนะโดยการถ่ายภาพด้านต่าง ๆและนับย้อมเซลล์ จากภาพ