solution was added to hydrolyze the carotenol ester. The mixture was then gently mixed and stored at 85 oC for 10 min. Since the high temperature could cause isomerization of the carotenoids, the effect of heating should not exceed 85 oc. During the process, cold deionized water (3 mL) was added and mixed with a vortex mixer then immediately placed in an ice bath. Petroleum ether-diethyl ether 2:1, vlv) was added, thoroughly mixed and centrifuged at 1400 x g for 10 min using a Sorvall legend 1.6R Mach centrifuge (Thermo Scientific, Waltham, MA, USA). The supernatant was collected and the extraction repeated two more times. Supernatants were pooled then evaporated at 40 oC under vacuum. The extracts were stored at -20 oc until analyzed.
2.4. Quantification of lutein and zeaxanthin
Quantification of lutein and zeaxanthin in the corn kernels was determined as per Kurilich and Juvik (1999), with slight modifications. Each sample was dispersed in 500 HL of mobile phase (acetonitrile: dichloromethane: methanol, 70:20:10, vlvlv) then mixed until dissolved. Analytical chromatographic separation was determined using high-performance liquid chromatography (HPLC). The HPLC system (Waters; Milford, MA, USA) was connected to a Phenomenex C18 security guard cartridge column (Torrance, CA, USA), which included a SIL-10AD VP auto-injector; SCL-10A VP system controller: UV-VIS detector) at a wavelength of 450 nm: YMC carotenoid C30, 4.6 mm x 250 mm column. The mobile phase was filtered and pumped into the HPLC at a flow rate of 1 mL/min. A 50-HL aliquot was injected into the HPLC system and the lutein and hin separation took place at 11.69 and 15.02 min, respectively. The entire HPLc run time was 30 min. A calibration curve for each chromatogram was constructed using lutein and zeaxanthin as the standards (Fig. 1) Data analyses were performed using 717 Pluse Waters Millennium 32 software version 3.05 (Waters, Milford, MA, USA) Each sample was analyzed in duplicate.
โซลูชันที่มีเพิ่มการ hydrolyze เอส carotenol ผสมแล้วค่อย ๆ ผสม และเก็บไว้ที่ 85 องศาเซลเซียสใน 10 นาที เนื่องจากอุณหภูมิสูงอาจทำให้เกิด isomerization carotenoids ผลของความร้อนควรไม่เกิน 85 oc. ในระหว่างกระบวนการ เย็นน้ำ deionized (3 mL) ถูกเพิ่ม และผสม ด้วยเครื่องผสม vortex ที่ นั้นทันทีอยู่ในน้ำเป็นน้ำแข็ง ปิโตรเลียมอีเทอร์ diethyl อีเทอร์ 2:1, vlv) ถูกเพิ่ม ผสม ทั้ง centrifuged ที่ 1400 x g สำหรับ 10 นาทีโดยใช้การ Sorvall ตำนาน 1.6R เครื่องจักรเครื่องหมุนเหวี่ยง (วิทยาศาสตร์เทอร์โม Waltham, MA สหรัฐอเมริกา) Supernatant ถูกรวบรวม และสกัดซ้ำสองครั้ง Supernatants ถูกทางถูกพู แล้วหายไปที่ 40 องศาเซลเซียสภายใต้สุญญากาศ บางส่วนถูกเก็บไว้ที่-20 องศาเซลเซียสจนกว่าจะวิเคราะห์ 2.4 การนับของลูทีนและ zeaxanthin นับของลูทีนและ zeaxanthin ในเมล็ดข้าวโพดที่ถูกกำหนดตาม Kurilich และ Juvik (1999), มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย แต่ละตัวอย่างที่กระจายใน HL 500 ของเฟสเคลื่อนที่ (acetonitrile: dichloromethane: เมทานอล 70:20:10, vlvlv) แล้ว ผสมจนกระทั่งส่วนยุบ แยกวิเคราะห์ chromatographic ถูกกำหนดใช้ประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (HPLC) ระบบ HPLC (น้ำ ดพา MA, USA) ได้เชื่อมต่อกับ Phenomenex C18 รักษาความปลอดภัยตลับคอลัมน์ (รันซ์ CA, USA), ซึ่งรวมตัว VP ภาษาศาสตร์-10AD อัตโนมัติหัวฉีด SCL-10A VP ระบบควบคุม: เครื่องตรวจจับรังสียูวีวิ) ที่ความยาวคลื่นของ 450 nm: YMC carotenoid C30 คอลัมน์ 4.6 mm x 250 mm เฟสเคลื่อนที่ถูกกรอง และขุ่นเป็น HPLC ที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร/นาที ส่วนลงตัว 50 HL ถูกฉีดเข้าไปในระบบ HPLC และลูทีนและหินแยกเอา 11.69 และ 15.02 นาที ตามลำดับ HPLc ทั้งที่ใช้เวลา 30 นาทีได้ เส้นโค้งการปรับเทียบสำหรับแต่ละ chromatogram ถูกสร้างขึ้นโดยใช้ลูทีน และ zeaxanthin เป็นมาตรฐานวิเคราะห์ข้อมูล (Fig. 1) ได้ดำเนินการใช้รุ่น 717 Pluse น้ำมิลเลนเนียม 32 ซอฟต์แวร์ 3.05 (น้ำ ลฟอร์ด MA สหรัฐอเมริกา) วิเคราะห์ตัวอย่างแต่ละสำเนา
การแปล กรุณารอสักครู่..

วิธีการแก้ปัญหาได้ถูกเพิ่มเข้าไปย่อยสลายเอสเตอร์ carotenol ส่วนผสมที่ถูกแล้วผสมเบา ๆ และเก็บไว้ที่ 85 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที เนื่องจากอุณหภูมิสูงอาจก่อให้เกิด isomerization ของ carotenoids, ผลของความร้อนไม่ควรเกิน 85 oc ในระหว่างกระบวนการน้ำปราศจากไอออนเย็น (3 มิลลิลิตร) ถูกบันทึกและผสมกับน้ำวนผสมแล้ววางไว้ในห้องอาบน้ำน้ำแข็ง ปิโตรเลียมอีเทอร์อีเทอร์-diethyl 2: 1, vlv) ถูกเพิ่มเข้ามาผสมอย่างทั่วถึงและหมุนเหวี่ยงที่ 1,400 XG เป็นเวลา 10 นาทีโดยใช้ตำนาน Sorvall 1.6R centrifuge Mach (เทอร์โมวิทยาศาสตร์มบริดจ์, สหรัฐอเมริกา) สารละลายที่ถูกเก็บรวบรวมและการสกัดซ้ำสองครั้ง supernatants ถูกรวบรวมระเหยแล้วที่ 40 องศาเซลเซียสภายใต้สูญญากาศ สารสกัดถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 oc จนวิเคราะห์.
2.4 ปริมาณของลูทีนซีแซนทีนและปริมาณลูทีนซีแซนทีนและในเมล็ดข้าวโพดถูกกำหนดตาม Kurilich และ Juvik (1999) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย
ตัวอย่างแต่ละคนก็แยกย้ายกันไปใน 500 HL ของเฟสเคลื่อนที่ (acetonitrile: ไดคลอโรมีเทน: เมทานอล 70:20:10, vlvlv) แล้วผสมจนละลาย การแยกสารการวิเคราะห์ถูกกำหนดโดยใช้ของเหลว chromatography ที่มีประสิทธิภาพสูง (HPLC) ระบบ HPLC (น้ำ; ฟอร์ด, MA, USA) ได้รับการเชื่อมต่อกับ Phenomenex C18 คอลัมน์ตลับหมึกยามรักษาความปลอดภัย (Torrance, CA, USA) ซึ่งรวมถึงการ SIL-10AD VP หัวฉีดอัตโนมัติ; SCL-10A ตัวควบคุมระบบ VP: UV-VIS เครื่องตรวจจับ) ที่ความยาวคลื่น 450 นาโนเมตร: YMC carotenoid C30 4.6 mm x 250 มมคอลัมน์ ขั้นตอนที่มือถือถูกกรองและสูบเข้าไปใน HPLC ที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาที aliquot 50 HL ถูกฉีดเข้าไปในระบบ HPLC และการแยกลูทีนและฮินที่เกิดขึ้นที่ 11.69 และ 15.02 นาทีตามลำดับ เวลาทำงาน HPLC ทั้งหมดได้ 30 นาที เส้นโค้งการสอบเทียบ chromatogram แต่ละคนถูกสร้างขึ้นโดยใช้ลูทีนซีแซนทีนและเป็นมาตรฐาน (รูปที่ 1). การวิเคราะห์ข้อมูลดำเนินการโดยใช้ 717 Pluse น้ำมิลเลนเนียมซอฟต์แวร์รุ่น 32 3.05 (Waters, ฟอร์ด, MA, USA) ตัวอย่างแต่ละคนได้รับการวิเคราะห์ในที่ซ้ำกัน
การแปล กรุณารอสักครู่..

สารละลาย , การเพิ่ม carotenol เอสเตอร์ ผสมส่วนผสมแล้วเบา ๆผสมและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 85 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที เนื่องจากอุณหภูมิสูงอาจทำให้เกิดการแยกของ carotenoids , ผลของความร้อนไม่ควรเกิน 85 องศาเซลเซียส ในระหว่างกระบวนการน้ำคล้ายเนื้อเยื่อประสานเย็น ( 3 ml ) คือการเพิ่มและผสมกับ Vortex ผสมแล้ววางไว้ในน้ำแข็ง อาบ ปิโตรเลียมอีเทอร์อีเทอร์ 21 , vlv ) เพิ่มให้ละเอียดผสมไฟฟ้าที่ 1400 x G สำหรับ 10 นาทีในการใช้ sorvall ตำนาน 1.6r Mach เครื่องหมุนเหวี่ยง ( เทอร์โมวิทยาศาสตร์ , วอลแทม , MA , USA ) การรวบรวมและนำสกัดซ้ำอีก 2 ครั้ง supernatants ถูกรวมแล้วระเหยที่อุณหภูมิ 40 องศาเซลเซียสภายใต้สุญญากาศ สารสกัดที่อุณหภูมิ - 20 องศาเซลเซียส จนกระทั่งวิเคราะห์
2.4 . ปริมาณของลูทีนและซีแซนทีน
ปริมาณของลูทีนและซีแซนในเมล็ดข้าวโพด พิจารณาตาม kurilich และ juvik ( 1999 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย แต่ละตัวอย่างถูกกระจายตัวใน 500 HL ของเฟสเคลื่อนที่ ( ไน : : เมทานอล ไดคลอโรมีเทน 70:20:10 vlvlv , ) แล้วผสมจนละลาย การแยกวิเคราะห์และพิจารณาโดยใช้วิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( HPLC )ระบบ HPLC ( น้ำ มิลฟอร์ด , MA , USA ) เชื่อมต่อกับ phenomenex c18 รักษาความปลอดภัยตลับคอลัมน์ ( Torrance , CA , USA ) ซึ่งรวม sil-10ad VP Auto หัวฉีด ควบคุมระบบ VP scl-10a : เครื่องตรวจจับไอออน ) ที่ความยาวคลื่น 450 nm : ymc แคโรทีน C30 4.6 มม. คอลัมน์ x 250 mm ระยะเคลื่อนที่กรองและปั๊มใน HPLC ที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาทีเป็น 50-hl ส่วนลงตัว ถูกฉีดเข้าไปในระบบ HPLC และลูทีนและหินแยกเอาสถานที่ที่ 11.69 และ 15.02 นาที ตามลำดับ ทั้ง 2 วิ่งในเวลา 30 นาที เป็นรูปโค้งสําหรับแต่ละถูกสร้างขึ้นโดยใช้โครมาลูทีนและซีแซนเป็นมาตรฐาน ( รูปที่ 1 ) วิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้ pluse เรื่องน้ำสหัสวรรษ 32 ซอฟแวร์รุ่น 3.05 ( น้ำที่ Milford , แม่สหรัฐอเมริกา ) โดยนำข้อมูลที่ซ้ำกัน
การแปล กรุณารอสักครู่..
