Nitric oxide (NO) has been shown to

Nitric oxide (NO) has been shown to inhibit neointimal hyperplasia after arterial interventions in several animal
models. To date, however, NO-based therapies have not been used in the clinical arena. Our objective was to combine
nanofiber delivery vehicles with NO chemistry to create a novel, more potent NO-releasing therapy that can be used clinically.
Thus, the aim of this study was to evaluate the perivascular application of spontaneously self-assembling NO-releasing
nanofiber gels. Our hypothesis was that this application would prevent neointimal hyperplasia.
Methods: Gels consisted of a peptide amphiphile, heparin, and a diazeniumdiolate NO donor (1-[N-(3-Aminopropyl)-N-
(3-ammoniopropyl)]diazen-1-ium-1,2-diolate [DPTA/NO] or disodium 1-[(2-Carboxylato)pyrrolidin-1-yl]diazen-1-
ium-1,2-diolate [PROLI/NO]). Nitric oxide release from the gels was evaluated by the Griess reaction, and scanning
electron microscopy confirmed nanofiber formation. Vascular smooth muscle cell (VSMC) proliferation and cell death
were assessed in vitro by 3
H-thymidine incorporation and Personal Cell Analysis (PCA) system (Guava Technologies,
Hayward, Calif). For the in vivo work, gels were modified by reducing the free-water content. Neointimal hyperplasia
after periadventitial gel application was evaluated using the rat carotid artery injury model at 14 days (n
6 per group).
Inflammation and proliferation were examined in vivo with immunofluorescent staining against CD45, ED1, and Ki67
at 3 days (n
2 per group), and graded by blinded observers. Endothelialization was assessed by Evans blue injection at
7 days (n
3 per group).
Results: Both DPTA/NO and PROLI/NO, combined with the peptide amphiphile and heparin, formed nanofiber gels and
released NO for 4 days. In vitro, DPTA/NO inhibited VSMC proliferation and induced cell death to a greater extent than
PROLI/NO. However, the DPTA/NO nanofiber gel only reduced neointimal hyperplasia by 45% (intima/media [I/M] area
ratio, 0.45 0.07), whereas the PROLI/NO nanofiber gel reduced neointimal hyperplasia by 77% (I/M area ratio, 0.19
0.03, P < .05) vs control (injury alone I/M area ratio, 0.83 0.07; P < .05). Both DPTA/NO and PROLI/NO nanofiber
gels significantly inhibited proliferation in vivo (1.06 0.30 and 0.19 0.11 vs injury alone, 2.02 0.20, P < .05), yet had
minimal effect on apoptosis. Only the PROLI/NO nanofiber gel inhibited inflammation (monocytes and leukocytes). Both
NO-releasing nanofiber gels stimulated re-endothelialization.
Conclusions: Perivascular application of NO-releasing self-assembling nanofiber gels is an effective and simple therapy to
prevent neointimal hyperplasia after arterial injury. Our study demonstrates that the PROLI/NO nanofiber gel most
effectively prevented neointimal hyperplasia and resulted in less inflammation than the DPTA/NO nanofiber gel. This
therapy has great clinical potential to prevent neointimal hyperplasia after open vascular interventions in patients.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ไนตริกออกไซด์ (NO) ได้รับการแสดงเพื่อยับยั้งการเจริญเกินของ neointimal หลังจากรักษาต้วในสัตว์ต่าง ๆรูปแบบจำลอง วันที่ อย่างไรก็ตาม โดยไม่มีการรักษายังไม่ได้ใช้ในเวทีทางคลินิก วัตถุประสงค์ของเราคือการ รวมยานพาหนะจัดส่ง nanofiber กับเคมีไม่สร้างเป็นนวนิยาย มีศักยภาพมากขึ้นปล่อยไม่บำบัดที่สามารถนำมาใช้ทางคลินิกดังนั้น จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือการ ประเมินการประยุกต์ perivascular ทหลายตัวประกอบไม่ปล่อยnanofiber เจ สมมติฐานของเราถูกโปรแกรมประยุกต์นี้จะป้องกันการเจริญเกิน neointimalวิธีการ: เจประกอบด้วย amphiphile เพปไทด์ เฮพาริน และ diazeniumdiolate เป็นผู้บริจาคไม่ (1- [N (3-Aminopropyl) - N-(3-ammoniopropyl)]diazen-1-ium-1, 2-diolate [DPTA/NO] หรือหัว 1-[(2-Carboxylato) pyrrolidin-1-yl] diazen-1 -ium-1, 2-diolate [PROLI/NO]) ปล่อยไนตริกออกไซด์จากเจมีค่า โดยปฏิกิริยา Griess และการสแกนอิเล็กตรอน microscopy ยืนยัน nanofiber ก่อ เซลล์ (VSMC) กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือดขยายตัวและเซลล์ตายได้ประเมินใน 3H-thymidine ประสานและระบบวิเคราะห์เซลล์ส่วนบุคคล (PCA) (เทคโนโลยีฝรั่งHayward, Calif) สำหรับงานในสัตว์ทดลอง เจถูกปรับเปลี่ยน โดยการลดเนื้อหาน้ำฟรี การเจริญเกิน Neointimalหลังจาก periadventitial เจลแอพลิเคชันถูกประเมินโดยใช้แบบจำลองการบาดเจ็บหลอดเลือด carotid ราษฎร์ใน 14 วัน (n 6 สำหรับแต่ละกลุ่ม)อักเสบและการแพร่หลายถูกตรวจสอบในสัตว์ทดลอง ด้วยการย้อมสี immunofluorescent กับ CD45, ED1 และ Ki67ใน 3 วัน (n 2 ต่อกลุ่ม), และระดับ โดยผู้สังเกตการณ์มองไม่เห็น Endothelialization ถูกประเมิน โดยฉีดอีแวนสีฟ้าที่7 วัน (n 3 ต่อกลุ่ม)ผลลัพธ์: ทั้ง ห้อง DPTA และ ห้อง PROLI รวม amphiphile เพปไทด์และเฮพาริน รูปเจ nanofiber และนำออกใช้สำหรับ 4 วัน ในหลอด DPTA ห้องห้ามขยาย VSMC และเหนี่ยวนำให้เซลล์ตายไปขอบเขตยิ่งกว่าPROLI/หมาย เลข อย่างไรก็ตาม เจ DPTA ห้อง nanofiber เท่าลดลง neointimal เจริญเกิน 45% (intima/สื่อ [ฉัน / M] ตั้งอัตรา 0.45 0.07), ในขณะที่เจ nanofiber PROLI ห้องลดลง neointimal เจริญเกิน 77% (ฉัน / M ตั้งอัตรา 0.19P 0.03, < .05) เทียบกับตัวควบคุม (บาดเจ็บคนเดียวฉัน / อัตราพื้นที่ M, 0.83 0.07 P < .05). ห้อง DPTA และ ห้อง PROLI nanofiberเจห้ามการแพร่หลายในสัตว์ทดลองอย่างมีนัยสำคัญ (1.06 0.30 และเทียบกับ 0.19 0.11 บาดเจ็บคนเดียว 2.02 0.20, P < .05), ยัง มีผลกระทบน้อยที่สุด apoptosis เฉพาะเจ PROLI ห้อง nanofiber ห้ามอักเสบ (monocytes และ leukocytes) ทั้งสองอย่างเจ nanofiber ปล่อยไม่ถูกกระตุ้นอีกครั้ง endothelializationบทสรุป: ประยุกต์ Perivascular ไม่ปล่อยตนเองประกอบ nanofiber เจเป็นการง่าย และมีประสิทธิภาพเพื่อป้องกันการเจริญเกินของ neointimal หลังจากบาดเจ็บต้ว การศึกษาของเราแสดงให้เห็นที่ nanofiber PROLI ห้องเจมากที่สุดการเจริญเกิน neointimal ป้องกันอย่างมีประสิทธิภาพและส่งผลให้น้อยอักเสบกว่าเจ nanofiber DPTA ห้อง นี้ศักยภาพทางคลินิกที่ดีเพื่อป้องกันการเจริญเกินของ neointimal หลังจากเปิดการรักษาหลอดเลือดในผู้ป่วยที่บำบัดได้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ไนตริกออกไซด์ (NO) ได้รับการแสดงที่จะยับยั้งการ hyperplasia neointimal หลังจากการแทรกแซงของหลอดเลือดในสัตว์หลาย
รุ่น จนถึงวันนี้ แต่การรักษาที่ไม่ใช้ยังไม่ได้ถูกนำมาใช้ในเวทีทางคลินิก วัตถุประสงค์ของเราคือการผสมผสาน
ส่งมอบรถเส้นใยนาโนที่มีคุณสมบัติทางเคมีที่ไม่มีการสร้างนวนิยายมีศักยภาพมากขึ้นการรักษาด้วย NO-ปล่อยที่สามารถใช้ในทางการแพทย์.
ดังนั้นจุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือการประเมินผลการประยุกต์ใช้ perivascular ธรรมชาติของตัวเองประกอบ NO-ปล่อย
เส้นใยนาโน เจล สมมติฐานของเราคือว่าโปรแกรมนี้จะช่วยป้องกันไม่ hyperplasia neointimal.
วิธีการ: เจลประกอบด้วย amphiphile เปปไทด์, เฮและ diazeniumdiolate บริจาค NO (1- [N- (3 Aminopropyl) -N-
(3 ammoniopropyl)] diazen-1 -ium เท่านั้น-1,2-diolate [DPTA / NO] หรือ disodium 1 - [(2-Carboxylato) pyrrolidin-1-YL] diazen-1-
ium-1,2-diolate [ProLi / NO]) ปล่อยไนตริกออกไซด์จากเจลได้รับการประเมินโดยปฏิกิริยา Griess และสแกน
กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนได้รับการยืนยันการสร้างเส้นใยนาโน เซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือด (VSMC) การแพร่กระจายและการตายของเซลล์
ได้รับการประเมินในหลอดทดลอง 3
การรวม H-thymidine และการวิเคราะห์เซลล์ส่วนตัว (PCA) ระบบ (ฝรั่ง Technologies,
เฮย์เวิร์ด, แคลิฟอร์เนีย) สำหรับการทำงานในร่างกายเจลมีการแก้ไขโดยการลดเนื้อหาฟรีน้ำ hyperplasia Neointimal
หลังจากการประยุกต์ใช้เจล periadventitial ได้รับการประเมินโดยใช้หนู carotid รูปแบบได้รับบาดเจ็บที่หลอดเลือดแดงที่ 14 วัน (n 6 คนต่อกลุ่ม).
การอักเสบและการขยายมีการตรวจสอบในร่างกายด้วยการย้อมสี immunofluorescent กับ CD45, ED1 และ Ki67
ที่ 3 วัน (n? 2 ต่อกลุ่ม) และอย่างช้า ๆ โดยผู้สังเกตการณ์ตาบอด Endothelialization ได้รับการประเมินโดยการฉีดอีแวนส์สีน้ำเงินที่
7 วัน (3 n ต่อกลุ่ม?).
ผล: ทั้งสอง DPTA / NO และ ProLi / NO รวมกับ amphiphile เปปไทด์และเฮรูปเจลเส้นใยนาโนและ
ปล่อยออกมาไม่เป็นเวลา 4 วัน ในหลอดทดลอง DPTA / NO ยับยั้งการงอก VSMC และเหนี่ยวนำให้เกิดการตายของเซลล์ในระดับสูงกว่า
ProLi / NO อย่างไรก็ตาม DPTA / NO เส้นใยนาโนเจลลดลงเพียง hyperplasia neointimal 45% (Intima / สื่อ [I / M] พื้นที่
อัตราส่วน 0.45 0.07) ในขณะที่ ProLi / NO เส้นใยนาโนเจลลด hyperplasia neointimal โดย 77% (I / M อัตราส่วนพื้นที่ 0.19
0.03, p <0.05) เทียบกับการควบคุม (ได้รับบาดเจ็บเพียงอย่างเดียว I / M อัตราส่วนพื้นที่, 0.83 0.07; p <0.05) ทั้ง DPTA / NO และ ProLi / NO เส้นใยนาโน
เจลยับยั้งการแพร่กระจายอย่างมีนัยสำคัญในร่างกาย (1.06 0.30 และ 0.19 0.11 vs ได้รับบาดเจ็บเพียงอย่างเดียว 2.02 0.20, p <0.05) แต่มี
ผลกระทบน้อยที่สุดในการตาย เฉพาะ ProLi / NO เส้นใยนาโนเจลยับยั้งการอักเสบ (monocytes และเม็ดเลือดขาว) ทั้ง
NO-ปล่อยเส้นใยนาโนเจลกระตุ้นอีกครั้ง endothelialization.
สรุป: การประยุกต์ใช้ perivascular ของ NO-ปล่อยตนเองประกอบเส้นใยนาโนเจลเป็นรักษาที่มีประสิทธิภาพและง่ายต่อการ
ป้องกันโรค neointimal หลังจากได้รับบาดเจ็บของหลอดเลือด การศึกษาของเราแสดงให้เห็นว่า ProLi / NO เส้นใยนาโนเจลมากที่สุด
ป้องกันได้อย่างมีประสิทธิภาพ hyperplasia neointimal และส่งผลให้เกิดการอักเสบน้อยกว่า DPTA / NO เจเส้นใยนาโน นี้
มีศักยภาพในการบำบัดทางคลินิกที่ดีในการป้องกันโรค neointimal หลังจากการแทรกแซงหลอดเลือดเปิดในผู้ป่วย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ไนตริก ออกไซด์ ( ไม่ ) ถูกแสดงเพื่อยับยั้ง neointimal hyperplasia หลังจากในการแทรกแซงในรูปแบบสัตว์
หลาย วัน อย่างไรก็ตาม ไม่ตามรักษาไม่ได้ถูกใช้ในเวทีทางคลินิก วัตถุประสงค์ของเราคือการรวม
ยานพาหนะส่งนาโนไฟเบอร์ที่ไม่มีเคมี เพื่อสร้างใหม่ มีศักยภาพมากขึ้น ไม่มีการรักษาที่สามารถใช้ในทางการแพทย์ .
ดังนั้นจุดมุ่งหมายของการศึกษานี้คือ เพื่อประเมินการใช้ perivascular ของตนเองประกอบเองไม่ปล่อย
นาโนไฟเบอร์เจล สมมติฐานของเราคือว่าโปรแกรมนี้จะป้องกัน neointimal hyperplasia .
วิธีเจลประกอบด้วยเปปไทด์ amphiphile , เฮปารินและ diazeniumdiolate ไม่มีผู้บริจาค ( 1 - [ - ( 3-aminopropyl ) - -
( 3-ammoniopropyl diazen-1-ium-1 ) ] ,2-diolate [ ไม่ ] หรือ dpta / หรือ 1 - [ ( 2-carboxylato ) pyrrolidin-1-yl ] diazen-1 -
ium-1,2-diolate proli / [ ไม่ ] ) ปล่อยไนตริกออกไซด์จากเจลที่ประเมินโดย griess ปฏิกิริยาและการสแกน
จุลทรรศน์อิเล็กตรอนยืนยันรูปแบบนาโนไฟเบอร์ . เซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือด ( vsmc ) proliferation และการตายของเซลล์ในหลอดทดลองโดย
3
ครั้งบริษัท h-thymidine และการวิเคราะห์เซลล์ส่วนบุคคล ( PCA ) ระบบ ( ฝรั่งเทคโนโลยี
เฮย์เวิร์ดด ) สำหรับฤทธิ์ในการทำงาน , เจลดัดแปลงโดยการลดปริมาณน้ำอิสระ neointimal hyperplasia
หลังจากใช้เจล periadventitial ถูกประเมินโดยใช้แบบจำลองที่หลอดเลือดแดง carotid หนูบาดเจ็บ 14 วัน ( N
6
ต่อกลุ่ม )การอักเสบและการทดสอบฤทธิ์ในการต่อต้านกับ cd45 ed1 , immunofluorescent และ ki67
3 วัน ( N
ละ 2 กลุ่ม ) และให้คะแนนโดยไปสังเกตการณ์ endothelialization ถูกประเมิน โดย อีแวนส์สีน้ำเงินฉีดที่
7 วัน ( N
3 / กลุ่ม ) .
ผลลัพธ์ : ทั้ง dpta / ไม่ และ proli / ไม่รวมกับเปปไทด์และ amphiphile ใส่ยารูปแบบนาโนไฟเบอร์เจลและ
ปล่อยไม่เป็นเวลา 4 วัน