Objectives To evaluate effect of ch

Objectives To evaluate effect of chemical agents on enzymatic browning in plant . To determine the phenolic content in plant.
Methods
Chemicals and reagents
1. control buffer : 0.1 M Tris-HCl/0.02% w/v SDS, pH 9 2. substrate solution : 0.01 M disodium tyrosine/0.1M 0.1 M Tris-HCl/0.02% w/v SDS, pH 9 3. 2% citric acid 4. 2% ascorbic acid 5. 2% cysteine 6. 2% sodium acid pyrophosphate 7. 2% sodium bisulfite 8. Plant samples such as potato and apple
Procedure: Experimental 1 : Evaluation of enzymatic browning reaction Control sample 1. Slice plant sample with the thickness 5 mm, width 5 cm and length 5 cm. 2. Place plant sample in individual Petri dishes. 3. Spread 200 l of control buffer over the whole surface of sample. 4. Spread 200 l of substrate solution over the whole surface of sample.
20
FSN 361 Food chemistry Laboratory 1-2558
5. Lid the Petri dishes and incubate at ambient temperature for 0.5 h. 6. Check area of black melanins. 7. The darkening of a representative number of 1 cm2 squares of a slice can be calculated using a 1 cm2 template overlay. Each square that is completely black is counted and recorded as a percentage of the total number of complete squares covered by the template.
Treatment samples 1. Slice plant sample with the thickness 5 mm, width 5 cm and length 5 cm. 2. Place plant sample in individual Petri dishes. 3. Spread 200 l of control buffer over the whole surface of sample. 5. Spread 200 l of each anti-browning agent over the whole surface of sample. Treatment 1 is 2% citric acid Treatment 2 is 2% ascorbic acid Treatment 3 is 2% cysteine Treatment 4 is 2% sodium acid pyrophosphate Treatment 5 is 2% sodium bisulfite 4. Spread 200 l of substrate solution over the whole surface of sample. 5. Lid the Petri dishes and incubate at ambient temperature for 0.5 h. 6. Check area of black melanins. 7. The darkening of a representative number of 1 cm2 squares of a slice can be calculated using a 1 cm2 template overlay. Each square that is completely black is counted and recorded as a percentage of the total number of complete squares covered by the template.
Experimental 2 Determination of phenolic content 1. Extract juice from plant foods from each treatment in experimental 1. 2. Clarify the juice by centrifuging at 4500 rpm for 10 minutes. 3. Mix 0.5 ml clarified juice, 0.5 Folin–Ciocalteu reagent and 0.5 ml distilled water. 4. Add 2.5 ml of 2% sodium carbonate 5. Incubate 20 minutes at ambient temperature under dark condition. 6. Prepare blank by following the procedure No. 3-4 and use distilled water instead of juice. 7. Turn on the spectrophotometer at least 20 minutes before use. 8. Measure the absorbance at 725 nm by using spectrophotometer.
Quantitative analysis by using calibration curve 1. Prepare the gallic acid at the concentration of 200 ppm by using distilled water as a solvent. 2. Dilute gallic acid solution to various concentrations including 25, 50, 75, 100 and 150 ppm by using distilled water as a solvent. 3. Mix each concentration of gallic acid standard (0.5 ml) with 0.5 Folin–Ciocalteu reagent, 0.5 ml distilled water and 2.5 ml of 2% sodium carbonate. 4. Incubate 20 minutes at ambient temperature under dark condition. 4. Measure the absorbance of the resulting mixture at 725 nm by spectrophotometer
21
FSN 361 Food chemistry Laboratory 1-2558
5. Create the calibration curve by plotting the graph between concentration of ascorbic acid (x axis) and absorbance (y axis). 6. Calculate the concentration of gallic acid by using calibration curve and express the result in term of mg/g sample.
Report of results Describe the change in visual appearance and take photograph.
Discussion  Explain briefly the mechanism of each anti-browning agent to inhibit PPO.  Explain effect of antibrowning agents on phenolic content in plants.
References Balage A. and Benjakul S., Use of kiam wood extract as gel enhacer for mackerel (Rastrelliger Kanagurta ). Int J Food Sci Techno.2009; 44.1664-1669. Busch, J.M. 1999. Enzymic browning in potatoes: a simple assay for a polyphenol oxidase catalysed reaction. Biochemical Education. 27: 171-173. Connie M. Weaver. James R. Daniel. 2005. The Food Chemistry Laboratory A Manual for Experimental Foods, Dietetics, and Food Scientists. CRC Press LLC. UK.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัตถุประสงค์เพื่อประเมินผลของสารเคมีเอนไซม์ในระบบ browning ในโรงงาน เพื่อกำหนดเนื้อหาฟีนอในโรงงาน วิธีการ สารเคมีและ reagents 1. ควบคุมบัฟเฟอร์: 0.1 M Tris-HCl/0.02% w/v SDS, pH 9 2 แก้ปัญหาพื้นผิว: tyrosine หัว 0.01 M / 0.1M 0.1 M Tris-HCl/0.02% w/v SDS, pH 9 3 2% กรดซิตริก 4 2% แอสคอร์บิคกรด 5 cysteine 2% 6 2% โซเดียมกรด pyrophosphate 7 2% โซเดียม bisulfite 8 ตัวอย่างพืชเช่นมันฝรั่งและแอปเปิ้ล ขั้นตอน: 1 ทดลอง: ประเมินผลของเอนไซม์ในระบบ browning ปฏิกิริยาควบคุมตัวอย่าง 1 ตัวอย่างพืชชิ้น มีความหนา 5 มม. กว้าง 5 ซม.และยาว 5 ซม. 2 ทำตัวอย่างพืชในแต่ละจาน Petri 3. ราด l 200 บัฟเฟอร์ควบคุมพื้นผิวทั้งหมดของตัวอย่าง 4. ราด l 200 ของพื้นผิวพื้นผิวทั้งหมดของตัวอย่าง 20 ผล FSN 361 อาหารเคมีห้องปฏิบัติการ 1-2558 5. จาน Petri lid และฟักที่อุณหภูมิสำหรับ 0.5 h. 6 ตรวจสอบพื้นที่ของ melanins สีดำ 7. darkening จำนวนสี่เหลี่ยม cm2 1 ชิ้นเป็นของพนักงานสามารถคำนวณได้โดยใช้การซ้อนทับแบบ cm2 1 แต่ละช่องที่เป็นสีดำสนิทนับ และบันทึกเป็นเปอร์เซ็นต์ของจำนวนรวมของกำลังสองสมบูรณ์แบบครอบคลุม ตัวอย่างการรักษา 1 ตัวอย่างพืชชิ้น มีความหนา 5 มม. กว้าง 5 ซม.และยาว 5 ซม. 2 ทำตัวอย่างพืชในแต่ละจาน Petri 3. ราด l 200 บัฟเฟอร์ควบคุมพื้นผิวทั้งหมดของตัวอย่าง 5. ราด l 200 ตัวแทนแต่ละ browning ป้องกันพื้นผิวทั้งหมดของตัวอย่าง รักษา 1 เป็น 2% กรดซิตริก 2 รักษาคือกรดแอสคอร์บิค 2% 3 รักษา cysteine 2% 4 รักษาคือ 2% โซเดียมกรด pyrophosphate 5 รักษา bisulfite โซเดียม 2% 4 ราด l 200 ของพื้นผิวพื้นผิวทั้งหมดของตัวอย่าง 5. จาน Petri lid และฟักที่อุณหภูมิสำหรับ 0.5 h. 6 ตรวจสอบพื้นที่ของ melanins สีดำ 7. darkening จำนวนสี่เหลี่ยม cm2 1 ชิ้นเป็นของพนักงานสามารถคำนวณได้โดยใช้การซ้อนทับแบบ cm2 1 แต่ละช่องที่เป็นสีดำสนิทนับ และบันทึกเป็นเปอร์เซ็นต์ของจำนวนรวมของกำลังสองสมบูรณ์แบบครอบคลุม กำหนด 2 ทดลองของฟีนอเนื้อหา 1 สกัดน้ำจากพืชอาหารจากแต่ละทรีทเม้นต์ใน 1 ทดลอง 2. ชี้แจงการน้ำ โดย centrifuging ที่ 4500 rpm 10 นาที 3. ผสมน้ำ 0.5 ml ขึ้ การ 0.5 Folin-Ciocalteu รีเอเจนต์ และ 0.5 ml กลั่นน้ำ 4. เพิ่ม 2.5 ml ของ 2% โซเดียมคาร์บอเนต 5 ฟัก 20 นาทีที่อุณหภูมิภายใต้เงื่อนไขที่เข้ม 6. เตรียมว่าง โดยทำตามขั้นตอนหมายเลข 3-4 และใช้น้ำกลั่นแทนน้ำ 7. เปิดเครื่องทดสอบกรดด่างน้อย 20 นาทีก่อนใช้ 8. วัด absorbance ที่ 725 nm โดยใช้เครื่องทดสอบกรดด่าง วิเคราะห์เชิงปริมาณ โดยใช้การเทียบเส้นโค้ง 1 เตรียมกรด gallic ที่เข้มข้น 200 ppm โดยใช้น้ำกลั่นเป็นตัวทำละลาย 2. แก้ปัญหากรด gallic dilute การต่าง ๆ ความเข้มข้นรวม 25, 50, 75, 100 และ 150 ppm โดยใช้กลั่นน้ำเป็นตัวทำละลาย 3. ผสมแต่ละความเข้มข้นของ gallic กรดมาตรฐาน (0.5 มล.) กับ 0.5 Folin-Ciocalteu รีเอเจนต์ 0.5 ml กลั่นน้ำ และ 2.5 ml ของ 2% โซเดียมคาร์บอเนต 4. ฟัก 20 นาทีที่อุณหภูมิภายใต้เงื่อนไขที่เข้ม 4. วัด absorbance ของส่วนผสมได้ที่ 725 nm โดยเครื่องทดสอบกรดด่าง 21 ผล FSN 361 อาหารเคมีห้องปฏิบัติการ 1-2558 5. สร้างเส้นโค้งเทียบ โดยการพล็อตกราฟระหว่างความเข้มข้นของกรดแอสคอร์บิค (x แกน) และ absorbance (แกน y) 6. ความเข้มข้นของกรด gallic คำนวณโดยการเทียบเส้นโค้ง และแสดงผลลัพธ์ของตัวอย่าง mg/g รายงานผลอธิบายการเปลี่ยนแปลงลักษณะที่ปรากฏ และถ่ายภาพ สนทนาคล้ายอธิบายกลไกของตัวแทนแต่ละ browning ป้องกันยับยั้ง PPO สั้น ๆ คล้าย Explain ผลของ antibrowning เนื้อหาฟีนอในพืช อ้างอิง Balage A. และ Benjakul S. ใช้ไม้ kiam แยกเป็นเจ enhacer สำหรับปลาทู (ปลาทู Kanagurta) Int J อาหารวิทยาศาสตร์วิศวกรรม Techno.2009 44.1664-1669. บุชค์ราคา J.M. 1999 Browning enzymic ในมันฝรั่ง: ทดสอบง่าย ๆ สำหรับเป็น polyphenol oxidase catalysed ปฏิกิริยา การศึกษาเชิงชีวเคมี 27:171-173 ช่างทอผ้า Connie เมตร James R. Daniel 2005. อาหารเคมีปฏิบัติ A คู่มือ การทดลองอาหาร โภชนาการ นักวิทยาศาสตร์การอาหาร กด CRC LLC สหราชอาณาจักร

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัตถุประสงค์เพื่อประเมินผลกระทบของสารเคมีในการเกิดสีน้ำตาลของเอนไซม์ในโรงงาน การตรวจสอบเนื้อหาของฟีนอลในโรงงาน.
วิธี
สารเคมีและสารเคมี
1 บัฟเฟอร์การควบคุม: 0.1 M Tris-HCl / 0.02% w / v SDS ค่า pH 9 2. การแก้ปัญหาพื้นผิว: 0.01 M ซายน์ disodium / 0.1M 0.1 M Tris-HCl / 0.02% w / v SDS ค่า pH 9 3. 2% ซิตริก 4. กรด 2% วิตามินซี 5. cysteine ​​2% 6. 2% pyrophosphate กรดโซเดียม 7. 2% โซเดียม bisulfite 8. ตัวอย่างพืชเช่นมันฝรั่งและแอปเปิ้
ขั้นตอน: การทดลองที่ 1: การประเมินผลของการเกิดปฏิกิริยาการเกิดสีน้ำตาลเอนไซม์ตัวอย่างควบคุม 1. Slice พืช กลุ่มตัวอย่างที่มีความหนา 5 มมกว้าง 5 ซม. และระยะเวลา 5 ซม. 2. วางตัวอย่างพืชในจานเลี้ยงเชื้อของแต่ละบุคคล 3. กระจาย 200 lของ buffer ควบคุมพื้นผิวทั้งหมดของกลุ่มตัวอย่าง 4. การแพร่กระจาย 200 lของการแก้ปัญหามากกว่าพื้นผิวพื้นผิวทั้งหมดของกลุ่มตัวอย่าง.
20
FSN 361 ห้องปฏิบัติการเคมีอาหาร 1-2558
5 ฝาจานเลี้ยงเชื้อและฟักไข่ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 0.5 ชั่วโมง 6. ตรวจสอบพื้นที่ของ melanins สีดำ 7. มืดของจำนวนตัวแทนของ 1 cm2 สี่เหลี่ยมของชิ้นสามารถคำนวณโดยใช้ 1 cm2 ซ้อนทับแม่แบบ แต่ละตารางที่มีสีดำสนิทจะถูกนับและบันทึกเป็นร้อยละของจำนวนเสียงทั้งหมดของช่องสี่เหลี่ยมที่สมบูรณ์ปกคลุมด้วยแม่แบบ.
ตัวอย่างการรักษา 1. Slice ตัวอย่างพืชที่มีความหนา 5 มมกว้าง 5 ซม. และความยาว 5 ซม. 2. วางตัวอย่างพืชในจานเลี้ยงเชื้อของแต่ละบุคคล 3. กระจาย 200 lของ buffer ควบคุมพื้นผิวทั้งหมดของกลุ่มตัวอย่าง 5. การแพร่กระจาย 200 lของแต่ละสารต้านการเกิดสีน้ำตาลมากกว่าพื้นผิวทั้งหมดของกลุ่มตัวอย่าง การรักษา 1 เป็น 2% การรักษากรดซิตริกที่ 2 คือ 2% การรักษาวิตามินซี 3 เป็นรักษา cysteine ​​2% 4 เป็น 2% pyrophosphate กรดโซเดียมรักษา 5 เป็น 2% โซเดียม bisulfite 4. การแพร่กระจาย 200 lของการแก้ปัญหามากกว่าพื้นผิวพื้นผิวทั้งหมดของกลุ่มตัวอย่าง . 5. ฝาจานเลี้ยงเชื้อและฟักไข่ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 0.5 ชั่วโมง 6. ตรวจสอบพื้นที่ของ melanins สีดำ 7. มืดของจำนวนตัวแทนของ 1 cm2 สี่เหลี่ยมของชิ้นสามารถคำนวณโดยใช้ 1 cm2 ซ้อนทับแม่แบบ แต่ละตารางที่มีสีดำสนิทจะถูกนับและบันทึกเป็นร้อยละของจำนวนเสียงทั้งหมดของช่องสี่เหลี่ยมที่สมบูรณ์ปกคลุมด้วยแม่แบบ.
2 การทดลองหาปริมาณฟีนอลสารสกัดจากน้ำผลไม้ 1 จากอาหารพืชจากการรักษาในแต่ละการทดลอง 1. 2. ชี้แจงน้ำผลไม้ โดยเหวี่ยงที่ 4500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10 นาที 3. ผสม 0.5 มล. ชี้แจงน้ำผลไม้ 0.5 สาร Folin-Ciocalteu และ 0.5 มล. น้ำกลั่น 4. เพิ่ม 2.5 มิลลิลิตรโซเดียมคาร์บอเนต 2% 5. ฟักไข่ 20 นาทีที่อุณหภูมิห้องภายใต้เงื่อนไขที่มืด 6. จัดทำว่างเปล่าโดยทำตามขั้นตอนครั้งที่ 3-4 และใช้น้ำกลั่นแทนน้ำผลไม้ 7. เปิด spectrophotometer อย่างน้อย 20 นาทีก่อนการใช้งาน 8. การวัดการดูดกลืนแสงที่ 725 นาโนเมตรโดยใช้ spectrophotometer.
การวิเคราะห์เชิงปริมาณโดยใช้เส้นโค้งการสอบเทียบ 1. เตรียมฝรั่งเศสกรดที่มีความเข้มข้น 200 ppm โดยใช้น้ำกลั่นเป็นตัวทำละลาย 2. เจือจางสารละลายกรดแกลลิความเข้มข้นต่าง ๆ รวมทั้ง 25, 50, 75, 100 และ 150 ppm โดยใช้น้ำกลั่นเป็นตัวทำละลาย 3. ผสมความเข้มข้นของแต่ละมาตรฐานฝรั่งเศสกรด (0.5 ml) 0.5 สาร Folin-Ciocalteu, 0.5 มล. น้ำกลั่นและ 2.5 มิลลิลิตร 2% โซเดียมคาร์บอเนต 4. บ 20 นาทีที่อุณหภูมิห้องภายใต้เงื่อนไขที่มืด 4. การวัดการดูดกลืนแสงของส่วนผสมที่ 725 นาโนเมตรที่เกิดจาก spectrophotometer
21
FSN 361 ห้องปฏิบัติการเคมีอาหาร 1-2558
5 สร้างกราฟมาตรฐานโดยพล็อตกราฟระหว่างความเข้มข้นของวิตามินซี (แกน x) และการดูดกลืนแสง (แกน Y) 6. การคำนวณความเข้มข้นของกรดแกลลิโดยใช้เส้นโค้งการสอบเทียบและแสดงผลในรูปของมิลลิกรัม / กรัมตัวอย่าง.
รายงานผลการอธิบายการเปลี่ยนแปลงในลักษณะที่มองเห็นและถ่ายภาพ.
อภิปรายอธิบายสั้น ๆ กลไกของแต่ละสารต้านการเกิดสีน้ำตาลที่จะ ยับยั้ง PPO อธิบายผลกระทบของ antibrowning ตัวแทนในเนื้อหาของฟีนอลในพืช.
อ้างอิง Balage เอและเอสเบญจกุล, การใช้สารสกัดจาก Kiam ไม้เป็นเจลสำหรับ enhacer ปลาทู (Rastrelliger Kanagurta) Int J อาหารวิทย์ Techno.2009; 44.1664-1669 Busch, JM ปี 1999 สีน้ำตาลทางเอนไซม์ในมันฝรั่ง: การทดสอบที่ง่ายสำหรับตัวเร่งปฏิกิริยาเอนไซม์ polyphenol ปฏิกิริยา การศึกษาทางชีวเคมี 27: 171-173 Connie เมตรประกอบ เจมส์อาร์แดเนียล 2005 คู่มือการปฏิบัติการเคมีอาหารอาหารทดลองควบคุมอาหารเพื่อสุขภาพและอาหารนักวิทยาศาสตร์ ซีอาร์ซีกด LLC สหราชอาณาจักร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัตถุประสงค์ เพื่อศึกษาผลของสารเคมีต่อสีน้ำตาลในพืช เพื่อศึกษาเนื้อหาสารในพืช


วิธีเคมีและสารเคมี 1 บัฟเฟอร์ความเข้มข้น 0.1 M HCl / โดยควบคุม : 0.02 % W / V SDS , พีเอช 9 2 หลากหลายโซลูชั่น : 0.01 M หรือซีน / 0.1m 0.1 M HCl / กำไร 0.02 % W / V SDS , พีเอช 9 3 2 % กรดซิตริก 4 กรดแอสคอร์บิก ร้อยละ 2 5 2 % ซิสเตอีน 6 2% โซเดียมแอซิดไพโร 72% โซเดียมไบซัลไฟต์ 8 พืชตัวอย่างเช่นมันฝรั่งและขั้นตอนแอปเปิ้ล
: การทดลองที่ 1 : การประเมินการควบคุมปฏิกิริยาสีน้ำตาลจำนวน 1 ชิ้นตัวอย่างพืชที่มีความหนา 5 มิลลิเมตร กว้าง 5 ซม. ยาว 5 ซม. 2 . สถานที่โรงงานตัวอย่างในจาน Petri แต่ละ 3 . กระจาย 200  L ของบัฟเฟอร์ควบคุมพื้นผิวทั้งหมดของกลุ่มตัวอย่าง 4 .200 ลิตร ( โซลูชั่นกระจายทั่วพื้นผิวทั้งหมดของกลุ่มตัวอย่าง
20
FSN 361 อาหารเคมีห้องปฏิบัติการ 1-2558
5 ฝาจานเพาะเลี้ยง และบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 0.5 ชม. 6 . ตรวจสอบพื้นที่ melanins สีดำ 7 . darkening ของจำนวนผู้แทน 1 ตร. ซม. สี่เหลี่ยมชิ้นสามารถคำนวณโดยใช้ 1 ตร. ซม. แม่แบบซ้อน .แต่ละตารางที่สมบูรณ์สีดำนับและบันทึกเป็นร้อยละของจำนวนทั้งหมดของสมบูรณ์สี่เหลี่ยมครอบคลุมแม่แบบ
รักษาจำนวน 1 ชิ้นตัวอย่างพืชที่มีความหนา 5 มิลลิเมตร กว้าง 5 ซม. ยาว 5 ซม. 2 . สถานที่โรงงานตัวอย่างในจาน Petri แต่ละ 3 . กระจาย 200  L ของบัฟเฟอร์ควบคุมพื้นผิวทั้งหมดของกลุ่มตัวอย่าง 5 .กระจาย 200  L แต่ละตัวแทนป้องกันสีน้ำตาลทั่วพื้นผิวทั้งหมดของกลุ่มตัวอย่าง ทรีทเมนต์ที่ 1 เป็น 2 % การรักษากรดซิตริก 2 เป็น 2% กรดแอสคอร์บิครักษา 3 เป็น 2% 8-12 กลุ่มที่ 4 เป็น 2% โซเดียมแอซิดไพโรรักษา 5 เป็น 2% โซเดียมไบซัลไฟต์ 4 200 ลิตร ( โซลูชั่นกระจายทั่วพื้นผิวทั้งหมดของกลุ่มตัวอย่าง 5 . ฝาจานเพาะเลี้ยง และบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 0.5 ชม. 6 .ตรวจสอบพื้นที่ melanins สีดำ 7 . darkening ของจำนวนผู้แทน 1 ตร. ซม. สี่เหลี่ยมชิ้นสามารถคำนวณโดยใช้ 1 ตร. ซม. แม่แบบซ้อน . แต่ละตารางที่สมบูรณ์สีดำนับและบันทึกเป็นร้อยละของจำนวนทั้งหมดของสมบูรณ์สี่เหลี่ยมครอบคลุมแม่แบบ
ทดลองที่ 2 การวิเคราะห์ปริมาณฟีนอล 1การสกัดจากพืชอาหารจากการรักษาในแต่ละการทดลองที่ 1 . 2 . ชี้แจงด้วยสารน้ำที่ 4500 รอบต่อนาที เป็นเวลา 10 นาที 3 . ผสม 0.5 ml ชี้แจงน้ํา , 0.5 folin – ciocalteu รีเอเจนต์และ 0.5 มล. น้ำกลั่น 4 . เพิ่ม 2.5 ml ของโซเดียม คาร์บอเนต 2% 5 พัก 20 นาที ในอุณหภูมิปกติ ในสภาพมืด 6 . เตรียมที่ว่างโดยปฏิบัติตามขั้นตอนไม่3-4 และใช้น้ำกลั่นแทนน้ำผลไม้ 7 . เปิดเครื่อง อย่างน้อย 20 นาทีก่อนใช้ 8 . วัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 725 nm โดยใช้วัสดุ
การวิเคราะห์เชิงปริมาณโดยใช้รูปโค้ง 1 เตรียมกรดแกลลิคความเข้มข้น 200 ppm โดยใช้น้ำเป็นตัวทำละลาย 2 . เจือจางความเข้มข้นต่าง ๆ รวมทั้งโซลูชั่นเพิ่มขึ้น 25 , 50 ,75 , 100 และ 150 ppm โดยใช้น้ำเป็นตัวทำละลาย 3 . ผสมแต่ละความเข้มข้นของกรดแกลลิคมาตรฐาน ( 0.5 มิลลิลิตร ) 0.5 folin – ciocalteu รีเอเจนต์ , 0.5 มล. น้ำกลั่นและ 2.5 ml 2 % โซเดียมคาร์บอเนต 4 . พัก 20 นาที ในอุณหภูมิปกติ ในสภาพมืด 4 . วัดค่าการดูดกลืนแสงของผลส่วนผสมที่ 725 nm โดย Spectrophotometer
21