2.5.2. In vitro digestion and absorption
In vitro digestion and absorption were performed according to
Gawlik-Dziki et al.(2009). The bread samples (1 g) were homogenized
in a stomacher laboratory blender for 1 min to simulate
mastication with the presence of 15 mL of simulated salivary fluid
(prepared by dissolving 2.38 g Na2HPO4, 0.19 g KH2PO4, and 8 g
NaCl, 100 mg of mucin in 1 L of distilled water. The solution was
adjusted to pH ¼ 6.75 and a-amylase (E.C. 3.2.1.1.) was added to
obtain 200 U per mL of enzyme activity. For the gastric digestion
300 U/mL of pepsin (from porcine stomach mucosa, pepsin A, EC
3.4.23.1) in 0.03 mol/L NaCl, pH ¼ 1.2 was prepared. Further,
simulated intestinal juice was prepared by dissolving 0.05 g of
pancreatin (activity equivalent 4 USP) and 0.3 g of bile extract in
35 mL 0.1 mol/L NaHCO3), and subsequently, the samples were
shaken for 10 min at 37
C. The samples were adjusted to pH ¼ 1.2
using 5 mol/L HCl, and subsequently, 15 mL of simulated gastric
fluid was added. The samples were shaken for 120 min at 37
C.
After digestion with the gastric fluid, the samples were adjusted to
pH ¼ 6 with 0.1 mol/L of NaHCO3 and then 15 mL of a mixture of
bile extract and pancreatin was added. The extracts were adjusted
to pH ¼ 7 with 1 mol/L NaOH and finally 5 mL of 120 mmol/L NaCl
and 5 mL of mmol/LKCl were added to each sample. The prepared
samples were submitted for in vitro digestion for 60 min, at 37
C in
the darkness. After that samples were centrifuged and supernatants
(extracts after simulated digestion, GE) were used for further
analysis.
งานวาง . ในหลอดทดลองการย่อยและการดูดซึมในลำไส้ การดูดซึมสาร
มีการปฏิบัติตาม gawlik dziki et al . ( 2009 ) อาหารตัวอย่าง ( 1 กรัม ) เป็นโฮโม
ในแผงประดับหน้าอกปฏิบัติการปั่น 1 นาทีเพื่อจำลอง
เคี้ยวกับการปรากฏตัวของ 15 มิลลิลิตร ) น้ำลายของเหลว
( เตรียมโดยละลาย 2.38 g na2hpo4 , 0.19 กรัม kh2po4 ขนาด 8 G ,
,100 มิลลิกรัมของเยื่อเมือกใน 1 ลิตรของน้ำ . สารละลาย
ค่า pH และ¼ 6.75 a-amylase ( อีซี 3.2.1.1 ) เพิ่ม
ขอรับ 200 U ต่อมิลลิลิตรของกิจกรรมของเอนไซม์ สำหรับกระเพาะอาหารการย่อยอาหาร
300 U / ml เอนไซม์เปปซิน ( จากกระเพาะอาหาร mucosa ของสุกร เพพซิน , EC
3.4.23.1 ) 0.03 mol / l โซเดียมคลอไรด์พีเอช¼ 1.2 ที่เตรียมไว้ ต่อไป ,
) น้ำย่อยในลำไส้ถูกเตรียมโดยละลาย 0.05 กรัม
( กิจกรรมที่ 4 Pancreatin เทียบเท่า USP ) และ 0.3 กรัมสกัดในน้ำดี
35 ml 0.1 mol / L โซเดียมไบคาร์บอเนต ) และต่อมาจำนวน
เขย่าสำหรับ 10 นาทีที่ 37
C . จำนวนค่า pH ¼ 1.2
ใช้ HCl 5 โมล / ลิตร และต่อมา 15 มิลลิลิตร ) ในกระเพาะอาหาร
ของเหลวเพิ่ม จำนวน 120 นาทีที่ 37 เขย่า
C
หลังจากการย่อยด้วยของเหลวในกระเพาะอาหารจำนวนปรับ
,¼ 0.1 โมลพีเอช 6 ลิตรโซเดียมไบคาร์บอเนตและ 15 ml ส่วนผสมของ
สกัดน้ำดี และ Pancreatin ถูกเพิ่มเข้ามา สารสกัดทำการปรับ pH ¼
7 กับ 1 โมล / ลิตร NaOH และสุดท้าย 5 ml 120 mmol / L NaCl
และ 5 มิลลิลิตร mmol / lkcl ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละตัวอย่าง เตรียม
จำนวนและในการย่อยอาหารร่างกาย 60 นาทีที่ 37
C
ความมืด หลังจากนั้น จำนวนและระดับ supernatants
( สารสกัดจากการย่อยอาหาร , GE ) ใช้สำหรับการวิเคราะห์ต่อไป
การแปล กรุณารอสักครู่..
