2.2.1. Amylase extractionThe sweet

2.2.1. Amylase extraction
The sweet potatoes used were obtained at the local market. The fresh tuberous
roots were washed, peeled and diced. Fresh sweet potato tuber just after collection
were used, to avoid high alpha amylase contamination, considering that alpha amylase
tended to increase during storage [8,25]. For the beta-amylase extraction, 50 g
of the potato pieces were added to 100 mL of cold distilled water and pulverized.
After centrifugation (7000
×
g/20 min/4 ◦C) the supernatant (amylase extract) was
used for all assays. The enzyme extract presented about 4.7 mg protein mL−1 and a
specific activity of 17.05 U mg−1 protein. No further purification methods were used.
2.2.2. Protein determination
Protein concentration was determined by Bradford method [26], using bovine
serum albumin (BSA) as standard.
2.2.3. Enzymatic activity
Enzyme activity was determined using starch as substrate (1% w/v in 100 mM
citrate-phosphate buffer at pH 6.0). Starch hydrolysis (50 ◦C) was monitored by
determination of reducing sugar using dinitrosalicylic acid method at 540 nm [27].
A standard curve was prepared with maltose. One beta-amylase activity unit (U)
was defined as the amount of enzyme capable of producing 1 Mol of maltose per
minute under assay conditions.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2.1. amylase แยก
เทศใช้ได้รับในตลาดท้องถิ่น สด tuberous
รากล้าง ปอกเปลือก และน้ำ หัวมันเทศสดหลังเก็บ
ใช้ หลีกเลี่ยงการปนเปื้อนสูง alpha amylase พิจารณา amylase ที่อัลฟา
มีแนวโน้มที่เพิ่มขึ้นระหว่างการเก็บรักษา [8,25] การสกัดเบต้า-amylase, 50 g
ของมันฝรั่ง ชิ้นเพิ่ม 100 mL ของน้ำกลั่น และคลุก
หลัง centrifugation (7000
การ
g/20 นาที/4 ◦C) supernatant (amylase แยก) ถูก
ใช้ assays ทั้งหมด สารสกัดจากเอนไซม์แสดงประมาณ 4.7 มิลลิกรัมโปรตีน mL−1 และ
กิจกรรม 17.05 U mg−1 โปรตีน ใช้วิธีทำให้บริสุทธิ์ต่อไปไม่
2.2.2 กำหนดโปรตีน
กำหนดความเข้มข้นของโปรตีน โดยวิธีแบรดฟอร์ด [26], ใช้วัว
serum albumin (บีเอสเอ) เป็นมาตรฐาน
2.2.3 กิจกรรมของเอนไซม์ในระบบ
เอนไซม์ถูกกำหนดโดยใช้แป้งเป็นพื้นผิว (1% w/v ใน 100 มม.
ฟอสเฟตซิเตรตบัฟเฟอร์ที่ pH 6.0) แป้งไฮโตรไลซ์ (50 ◦C) ถูกตรวจสอบโดย
กำหนดการลดน้ำตาลโดยใช้วิธี dinitrosalicylic กรดที่ 540 nm [27]
เส้นโค้งมาตรฐานที่เตรียม มี maltose เบต้า-amylase กิจกรรมหน่วย (U)
ถูกกำหนดเป็นจำนวนเอนไซม์สามารถผลิต 1 โมลของ maltose ต่อ
นาทีภายใต้เงื่อนไขที่ทดสอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2.1 อะไมเลสสกัด
มันฝรั่งหวานที่ได้รับมาใช้ในตลาดในประเทศ หัวสด
รากถูกล้างปอกเปลือกและหั่นสี่เหลี่ยมลูกเต๋า สดหัวมันเทศเพียงหลังการจัดเก็บ
ถูกนำมาใช้เพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนสูงอัลฟาอะไมเลส, อัลฟาอะไมเลสพิจารณาว่า
มีแนวโน้มที่จะเพิ่มขึ้นระหว่างการเก็บรักษา [8,25] สำหรับการสกัดเบต้าอะไมเลส 50 กรัม
ชิ้นมันฝรั่งถูกเพิ่มเข้าไปใน 100 มิลลิลิตรของน้ำกลั่นเย็นและแหลกลาญ
หลังจากการหมุนเหวี่ยง (7000
×
g / 20 นาที / 4 ◦C) ใส (สารสกัดจากอะไมเลส) ถูก
ใช้สำหรับการตรวจทั้งหมด . สารสกัดเอนไซม์ที่นำเสนอเกี่ยวกับ 4.7 มิลลิกรัมโปรตีน mL-1 และ
กิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงของ 17.05 mg U-1 โปรตีน ไม่มีวิธีการทำให้บริสุทธิ์ถูกนำมาใช้
2.2.2 โปรตีนกำหนด
ความเข้มข้นของโปรตีนถูกกำหนดโดยวิธี Bradford [26] โดยใช้วัว
ซีรั่มอัลบูมิ (BSA) เป็นมาตรฐาน
2.2.3 เอนไซม์
กิจกรรมของเอนไซม์ถูกกำหนดโดยใช้แป้งเป็นสารตั้งต้น (1% w / v ใน 100 มิลลิ
บัฟเฟอร์ซิเตรตฟอสเฟตที่ pH 6.0) ไฮโดรไลซิสตาร์ช (50 ◦C) ได้รับการตรวจสอบโดย
ความมุ่งมั่นในการลดน้ำตาลโดยวิธีกรด dinitrosalicylic ที่ 540 นาโนเมตร [27]
กราฟมาตรฐานที่เตรียมกับมอลโตส หน่วยกิจกรรมหนึ่งเบต้าอะไมเลส (U)
ถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ที่มีความสามารถในการผลิต 1? Mol ของมอลโตสต่อ
นาทีภายใต้เงื่อนไขการทดสอบ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2.1 . การสกัดเอนไซม์อะไมเลส
มันฝรั่งหวานที่ใช้ได้ในตลาดท้องถิ่น นำรากสด
ถูกล้าง , ปอกเปลือกและหั่นสี่เหลี่ยมลูกเต๋า . สดมันเทศหัวหลังจากคอลเลกชัน
ถูกใช้เพื่อหลีกเลี่ยงการปนเปื้อนอัลฟาอะไมเลสสูงพิจารณาว่าอัลฟาอะไมเลส
มีแนวโน้มเพิ่มขึ้นในช่วงกระเป๋า [ 8,25 ] สำหรับการสกัดเบต้าเลส 50 g
ของชิ้นมันฝรั่งถูกเพิ่มไปยัง 100 มิลลิลิตรของน้ำหนาวและแหลกลาญ .
หลังการปั่นเหวี่ยง ( 7000
×
g / 20 นาที / 4 ◦ C ) น่าน ( เลสแยก ) คือ
ใช้ทุกวิธี . เอนไซม์โปรตีนสกัดที่นำเสนอประมาณ 4.7 ml − 1 และกิจกรรมเฉพาะของยูคือ
− 1 มิลลิกรัมโปรตีน ไม่มีวิธีบำบัดเพิ่มเติมมาใช้
2.2.2 . โปรตีนปริมาณ
ความเข้มข้นของโปรตีนถูกกำหนดโดย Bradford วิธี [ 26 ] , การใช้วัว
ซีรัมอัลบูมิน ( BSA ) เป็นมาตรฐาน .
2.2.3 . เอนไซม์เอนไซม์
ใช้วิเคราะห์แป้งเป็นสับสเตรท ( 1% w / v ใน 100 mm
ซิเตรทฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 6.0 ) การย่อยแป้ง ( 50 ◦ C ) คือการตรวจสอบโดยการใช้วิธีลด
น้ำตาลกรด dinitrosalicylic 540 nm [ 27 ] .
เส้นโค้งมาตรฐานเตรียมเขียง . หนึ่งหน่วย Beta กิจกรรมเอนไซม์อะไมเลส ( U )
ถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์สามารถผลิต 1  โมลของน้ำตาลต่อ
นาทีภายใต้เงื่อนไขการทดสอบ