Quantitative competitive polymerase

Quantitative competitive polymerase chain reaction (QC–PCR) using internal DNA standard provides means for determining relative amounts of target DNA Gilliland et al., 1990, Piatak et al., 1993, Siebert and Larrick, 1993, Riedy et al., 1995, Khan et al., 1996 and Brichacek and Stevenson, 1997. The principle of QC–PCR is the co-amplification of standard DNA together with target DNA as illustrated in Fig. 1. We have developed QC–PCR systems for the detection and quantitation of Roundup Ready™ soybean (RRS) and Maximizer maize (MM) (Studer, Rhyner, Lüthy & Hübner, 1998). The internal DNA standards consisted of cloned PCR fragments of RRS-and MM–DNA carrying internal insertions of 21 and 22 bp, respectively. The standard procedure for QC–PCR comprised four steps: (1) DNA extraction, (2) determination of DNA concentration, (3) QC–PCR with defined internal DNA standard concentrations and (4) separation of PCR products by gel electrophoresis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ปริมาณการแข่งขันปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์ (QC-PCR) โดยใช้มาตรฐาน dna ภายในให้หมายถึงการกำหนดจำนวนเงินที่ญาติของเป้าหมาย dna กิลลิแลนด์และคณะ. 1990 piatak et al,. 1993 เบิร์ทและ LARRICK 1993 riedy ตอัล. ปี 1995 ข่านและคณะ. 1996 และ brichacek และสตีเวนสัน, 1997หลักการของการ QC-pcr เป็นผู้ร่วมการขยายของดีเอ็นเอมาตรฐานร่วมกับดีเอ็นเอเป้าหมายตามที่แสดงในภาพ 1 เราได้พัฒนาระบบ QC-PCR ในการตรวจหาและปริมาณของการชุมนุมพร้อม™ถั่วเหลือง (RRS) และข้าวโพดเต็มพิกัด (มม. ) (studer, Rhyner, luthy &hübner, 1998)มาตรฐาน dna ภายในประกอบไปด้วยเศษโคลน pcr ของ RRS และ มม. dna การดำเนินการแทรกภายในของ 21 และ 22 bp ตามลำดับ ขั้นตอนมาตรฐานสำหรับ QC-pcr ประกอบด้วยสี่ขั้นตอนคือ (1) การสกัดดีเอ็นเอ (2) การกำหนดความเข้มข้นของดีเอ็นเอ (3) QC-PCR ที่มีการกำหนดมาตรฐานความเข้มข้นของดีเอ็นเอภายในและ (4) การแยกของผลิตภัณฑ์ pcr โดยข่าวคราว

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

พอลิเมอเรสแข่งขันเชิงปริมาณปฏิกิริยาลูกโซ่ (QC–PCR) โดยใช้ดีเอ็นเอมาตรฐานภายในให้หมายถึงการกำหนดจำนวนเป้าหมาย DNA Gilliland และ al., 1990, Piatak สัมพันธ์ร้อยเอ็ด al., 1993, Siebert และ Larrick, 1993, Riedy และ al., 1995, Khan et al., 1996 และ Brichacek และสตีเวน สัน 1997 หลักการของ QC–PCR ถูกขยายร่วมของดีเอ็นเอมาตรฐานพร้อมเป้าหมายดีเอ็นเอดังที่แสดงใน Fig. 1 เราได้พัฒนาระบบตรวจสอบและวิเคราะห์หาปริมาณของถั่วเหลือง™พร้อม Roundup (RRS) และข้าวโพด Maximizer (MM) QC–PCR (Studer, Rhyner, Lüthy & Hübner, 1998) มาตรฐานดีเอ็นเอภายในประกอบด้วยชิ้นส่วน PCR โคลนของ RRS- และ MM–DNA โดยแทรกภายในของ bp ที่ 21 และ 22 ตามลำดับ สี่ขั้นตอนประกอบด้วยขั้นตอนมาตรฐาน QC–PCR: สกัด DNA (1) (2) กำหนดความเข้มข้นของดีเอ็นเอ ความเข้มกำหนดภายในดีเอ็นเอมาตรฐานข้นและ (4) แยกผลิตภัณฑ์ PCR โดย electrophoresis เจล (3) QC–PCR

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การแข่งขันเชิงปริมาณ polymerase ห่วงโซ่การตอบสนอง( QC - pcr )โดยใช้มาตรฐานดีเอ็นเอ ภายใน มีวิธีการในการพิจารณาจำนวนญาติของดีเอ็นเอเป้าหมาย gilliland et al . 1990 piatak et al . 1993 siebert และ larrick 1993 riedy et al . 1995 ขัน et al . 1996 และ brichacek สตีเวนสันและปี 1997 .หลักการของ QC - pcr คือความร่วมมือการขยายสัญญาณเสียงมาตรฐานของดีเอ็นเอร่วมกันด้วยดีเอ็นเอเป้าหมายตามที่ได้แสดงไว้ในรูปที่ 1 . เราได้พัฒนาระบบ QC - pcr เพื่อ quantitation และการตรวจจับของยาฆ่าหญ้าราวอัพ ready™ ถั่วเหลือง( rrs )และ maximizer ข้าวโพดเลี้ยงสัตว์(มม.)( studer rhyner lüthy & hübner 1998 )มาตรฐานดีเอ็นเอ ภายใน ประกอบด้วยของเศษ pcr จำลองไว้ของ rrs - และมม. - ดีเอ็นเอและกระเป๋าสำหรับพกพาถอดอุปกรณ์ขณะจ่ายไฟ ภายใน ของ 21 และ 22 BP ตามลำดับ ตามขั้นตอนมาตรฐานสำหรับ QC - pcr ประกอบด้วย 4 ขั้นตอนคือ( 1 )การขุดเจาะดีเอ็นเอ( 2 )การกำหนดความเข้มข้นของดีเอ็นเอ( 3 )ความเข้มข้น QC - pcr พร้อมด้วยมาตรฐานดีเอ็นเอ ภายใน กำหนดและ( 4 )การแบ่งแยกสินค้า pcr โดย electrophoresis เจล.