2.3. Culture conditions and isolation
The fermentation broths were serially diluted in phosphate
buffered saline (PBS) and were spread onto the appropriate agar
plates, as described below. The GYP medium (pH 6.8) contained
(l−1): glucose, 30.0g; yeast extract (Becton Dickinson
and Co., Sparks, MD, USA), 5.0 g; tryptone peptone (Beckton
Dickinson and Co.), 3.0g; CaCO3, 10.0g; and agar, 15.0g. The
MRS medium (pH 6.2), which is favorable for the growth of
lactic acid bacteria, contained (l−1): MRS agar (Oxoid, Basingstoke,
UK), 62.0g; CaCO3, 5.0 g; and NaN3, 0.01mg. After
spreading the samples onto MRS medium, the same medium
was poured onto the agar plate. Cultivation was performed at
25 °C for 3–7 days under aerobic conditions. Acid-producing
colonies showing clear zones of CaCO3 were purified at least
three times. In addition, TSB medium (pH 6.8) was also used as
a non-selective medium, and consisted of tryptic soy broth
(Becton Dickinson and Co.), 30.0g/l and agar, 15.0g/l.
2.3. วัฒนธรรมเงื่อนไขและแยกBroths หมักถูกเจือจางในฟอสเฟต seriallyบัฟเฟอร์น้ำเกลือ (PBS) และได้แพร่ลงบนอาหารเลี้ยงเชื้อที่เหมาะสมแผ่น ตามที่อธิบายไว้ด้านล่าง GYP ปานกลาง (pH 6.8) อยู่(l−1): น้ำตาลกลูโคส 30.0 g สารสกัดจากยีสต์ (Becton สันและ บริษัท ประกายไฟ MD สหรัฐอเมริกา), 5.0 g peptone tryptone (Becktonดิกคินสันและบริษัท), 3.0 g CaCO3, 10.0 g และ วุ้น 15.0 กรัม การนางปานกลาง (pH 6.2), ซึ่งเป็นอย่างดีสำหรับการเติบโตของแบคทีเรียกรดแลคติก อยู่ (l−1): อาหารเลี้ยงเชื้อ MRS (Oxoid, Basingstokeสหราชอาณาจักร), 62.0 กรัม CaCO3, 5.0 g และ NaN3, 0.01 มิลลิกรัม หลังจากกระจายตัวอย่างลงบน MRS ปานกลาง กลางเดียวกันถูกเทลงในจานอาหารเลี้ยงเชื้อ ทำการเพาะปลูกที่25 ° C 3 – 7 วันภายใต้สภาพแอโรบิก ผลิตกรดอาณานิคมแสดงโซนที่ชัดเจนของ CaCO3 ที่บริสุทธิ์น้อยสามครั้ง นอกจากนี้ TSB ปานกลาง (pH 6.8) ถูกใช้เป็นเลือกสื่อ และซุปถั่วเหลือง tryptic ที่ประกอบด้วย(Becton สัน และ จำกัด), 30.0 g/l และวุ้น 15.0 g/l
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.3 เงื่อนไขวัฒนธรรมและการแยก
ซุปมิโสะหมักถูกปรับลดลำดับในฟอสเฟต
บัฟเฟอร์น้ำเกลือ (พีบีเอส) และได้รับการแพร่กระจายลงบนอาหารเลี้ยงเชื้อที่เหมาะสม
แผ่นตามที่อธิบายไว้ด้านล่าง GYP กลาง (pH 6.8) ที่มี
(L-1): กลูโคส 30.0g; สารสกัดจากยีสต์ (Becton ดิกคินสัน
และ Co. , ประกายไฟ, MD, USA) 5.0 กรัม Tryptone เปปโตน (Beckton
ดิกคินสันและร่วม) 3.0G; CaCO3, 10.0g; และวุ้น 15.0g
MRS กลาง (pH 6.2) ซึ่งเป็นอย่างดีสำหรับการเจริญเติบโตของ
เชื้อแบคทีเรียกรดแลคติกที่มีอยู่ (L-1): MRS agar (Oxoid เบซิง,
สหราชอาณาจักร), 62.0g; CaCO3 5.0 กรัม และ NaN3, 0.01mg หลังจาก
การแพร่กระจายไปยังกลุ่มตัวอย่างขนาดกลาง MRS ที่สื่อเดียวกัน
ถูกเทลงบนจานเลี้ยงเชื้อ การเพาะปลูกได้รับการดำเนินการที่
25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3-7 วันภายใต้เงื่อนไขแอโรบิก กรดผลิต
อาณานิคมแสดงโซนที่ชัดเจนของ CaCO3 บริสุทธิ์อย่างน้อย
สามครั้ง นอกจากนี้สื่อ TSB (pH 6.8) นอกจากนี้ยังถูกใช้เป็น
สื่อที่ไม่ได้รับเลือกและประกอบไปด้วยทริปซิซุปถั่วเหลือง
(Becton ดิกคินสันและร่วม) 30.0g / L และวุ้น 15.0g / L
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.3 เงื่อนไขทางวัฒนธรรม และแยกาถูกเจือจางในการหมักเป็นฟอสเฟตในน้ำเกลือ ( PBS ) และถูกกระจายลงบนอาหารเลี้ยงเชื้อที่เหมาะสมแผ่น ตามที่อธิบายไว้ด้านล่าง พวกต้มตุ๋นกลาง ( pH 6.8 ) ประกอบด้วย( L − 1 ) : กลูโคส , 30.0g ; สารสกัดจากยีสต์ ( เบ็กเติ้นดิคและ บริษัท สปาร์ค , MD , USA ) , 5.0 กรัม ; ทริพโทนเปปโตน ( เบ็คตันดิกคินสันและ บริษัท ) , 3.0g ; CaCO3 , 10.0g และวุ้น 15.0g .นางกลาง ( pH 6.2 ) ซึ่งเป็นอย่างดีสำหรับการเจริญเติบโตของแบคทีเรียกรดแลคติกที่มี ( L − 1 ) : MRS agar ( oxoid Basingstoke , ,สหราชอาณาจักร ) , 62.0g ; CaCO3 , 5.0 กรัม และ nan3 0.01mg , . หลังจากแพร่กระจายตัวอย่างลงบนนางกลาง กลางเดียวกันถูกเทลงบนวุ้นแผ่น การกระทำที่25 ° C เป็นเวลา 3 - 7 วัน ภายใต้สภาวะแอโรบิก . การผลิตกรดอาณานิคมแสดงโซนที่ชัดเจนของ CaCO3 เป็นบริสุทธิ์อย่างน้อยสามครั้ง นอกจากนี้ TSB ปานกลาง ( pH 6.8 ) ก็ใช้เป็นไม่เลือกขนาดกลาง มีน้ำซุปถั่วเหลืองอาหาร( เบคตอนดิกคินสันและ บริษัท ) , 30.0g/l และวุ้น 15.0g/l .
การแปล กรุณารอสักครู่..
