Isolation, identi cation, and molec

Isolation, identi cation, and molecular characterization of E. coli isolates
The samples collected were analyzed by standard mem- brane ltration technique according to (APHA/AWWA/ WEF 1998). Three hundred presumptive E. coli isolates were recovered on E. coli-Coliforms Chromogenic medium (Laboratorios CONDA, South Africa) incubated at 37°C for 24 h. About 5–7 randomly selected distinct blue colonies were isolated per plate and subjected to pre- liminary identi cation by Gram staining and oxidase testing. Further identi cation of the selected colonies was done by polymerase chain reaction (PCR). Bacterial DNA was extracted by boiling method as described by Queipo- Ortuno et al. (2008) with modi cations. The isolates were con rmed using housekeeping uidA [β-D glucuronidase] gene as described by Janezic et al. (2013). Polymerase chain reaction (PCR)-con rmed E. coli isolates were then stored in 20% glycerol and frozen at −80°C until further analysis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แยกไอออนบวกระบุและลักษณะโมเลกุลของเชื้อ E. coli แยก
ตัวอย่างที่เก็บรวบรวมได้มาวิเคราะห์โดยใช้เทคนิคหน่วยความ brane ltration มาตรฐานตาม (APHA / AWWA / WEF 1998) สามร้อยสันนิษฐาน E. coli ที่แยกได้ถูกกู้คืนใน E. coli-Coliforms ให้สีกลาง (Laboratorios CONDA, แอฟริกาใต้) บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ประมาณ 5-7 สุ่มเลือกอาณานิคมสีฟ้าที่แตกต่างกันที่แยกได้ต่อจานและยัดเยียดให้ล่วงหน้าไอออนบวกระบุ liminary โดยการย้อมสีแกรมและการทดสอบออกซิเดส นอกจากนี้ไอออนบวกระบุอาณานิคมที่เลือกทำโดยวิธี Polymerase chain reaction (PCR) ดีเอ็นเอของแบคทีเรียถูกสกัดโดยวิธีการต้มตามที่อธิบาย Queipo- Ortuno et al, (2008) ที่มีประจุบวก Modi พบแบคทีเรียที่ Con rmed ใช้การดูแลห้องพัก uidA [β-D glucuronidase] ยีนตามที่อธิบาย Janezic et al, (2013) วิธี Polymerase chain reaction (PCR) -con rmed E. coli ที่แยกได้ถูกเก็บไว้แล้วใน 20% กลีเซอรอลและแช่แข็งที่ -80 ° C จนการวิเคราะห์ต่อไป

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แยก , identi ไอออนบวก และลักษณะโมเลกุลของเชื้อ E . coliตัวอย่างวิเคราะห์โดยมาตรฐานเมม - เบรน ltration เทคนิคตาม ( apha / AWWA / WEF ปี 2541 ) สามร้อยน้ำยาชนิด E . coli สายพันธุ์ที่พบในเชื้อ E . coli ที่เข้มข้นปานกลาง การสนทนาผ่านข้อความโต้ตอบแบบทันที ( บริการ conda แอฟริกาใต้ ) บ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ประมาณ 5 – 7 วิธีที่แตกต่างกันฟ้าอาณานิคมแยกต่อจาน และต้อง pre - liminary identi ไอออนบวกโดยกรัม staining และการทดสอบ oxidase . เพิ่มเติม identi ไอออนบวกของอาณานิคมที่ถูกทำโดยวิธีพีซีอาร์ ( PCR ) ดีเอ็นเอแบคทีเรียโดยวิธีการต้มตามที่อธิบายไว้โดย queipo - ortuno et al . ( 2008 ) กับโมดิไอออน . การใช้ไอโซเลทคอน rmed แม่บ้าน uida [ D ] ยีนบีตา - ที่มีอวัยวะตามที่อธิบายไว้โดย janezic et al . ( 2013 ) ปฏิกิริยาลูกโซ่ ( PCR ) - คอน rmed E . coli สายพันธุ์เป็นแล้วเก็บไว้ใน 20 % กลีเซอรอลและแช่แข็งที่อุณหภูมิ 80 องศา C −จนถึงการวิเคราะห์ต่อไป