SigmaeAldrich. Activity was tested

SigmaeAldrich. Activity was tested by using a fluorescence-based
assay. Different substrates were used, to determine endochitinase-
and exochitinase activity. 4-Methylumbelliferyl N,N-diacetylb-
D-chitobioside and 4-Methylumbelliferyl N-acetyl-b-D-glucosaminide
were utilized, to determine exochitinase activity. Both
substrates were applied to distinguish between chitobiosidase activity
and b-N-acetylglucosamidase activity. To detect endochitinase
activity 4-Methylumbelliferyl b-D-N,N0,N00-triacetylchitotriose
was used. Chitinase activity causes the hydrolysis of substrates, and
releases 4-Methylumbelliferone, and can be detected fluorimetrically
(Wortman et al., 1986; Robbins et al., 1988; Ueno et al., 1991;
O'Brien and Colwell, 1987). Those substrates were utilized in a
concentration of 0.2 mg mL1 respectively. Samples were centrifuged
at 18.000 g, 4 C for 60 min initially. To 10 ml of supernatant
100 ml of substrate were added, and incubated for 30 min at 37 C.
Reaction was stopped by adding 100 ml of 50 mmol sodium carbonate.
Fluorescence was measured at an excitation wavelength of
360 nm and at an emission wavelength of 450 nm (Tecan infinite
200). Experiments were carried out in two independent series and
measured in triplicates.
To enable a comparison between different species, chitinase
activity and total protein amount have to be in correlation, therefore
the specific chitinase activity was generated for the substrate
in detail.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

SigmaeAldrich กิจกรรมทดสอบโดย fluorescence ขึ้นอยู่วิเคราะห์ พื้นผิวต่าง ๆ ได้ใช้ endochitinase-และกิจกรรม exochitinase 4 Methylumbelliferyl N, N-diacetylb -D chitobioside และ 4-Methylumbelliferyl N-acetyl-b-D-glucosaminideได้ใช้ การกำหนดกิจกรรม exochitinase ทั้งสองอย่างพื้นผิวที่ใช้แยกแยะกิจกรรม chitobiosidaseและกิจกรรม b-N-acetylglucosamidase สืบ endochitinaseกิจกรรม 4 Methylumbelliferyl b-D-N, N0, N00 triacetylchitotrioseใช้ ไฮโตรไลซ์ของพื้นผิว การทำให้กิจกรรม Chitinase และรุ่น 4-Methylumbelliferone และสามารถตรวจพบ fluorimetrically(Wortman et al., 1986 ร็อบบินส์และ al., 1988 อุ et al., 1991โอไบรอันและ Colwell, 1987) พื้นผิวเหล่านั้นถูกนำมาใช้ในการความเข้มข้นของ 0.2 mg mL 1 ตามลำดับ ตัวอย่างที่ centrifugedที่ 18.000 g, C 4 สำหรับ 60 นาทีเริ่ม ไป 10 ml ของ supernatant100 ml ของพื้นผิวเพิ่ม และ incubated ใน 30 นาทีที่ 37 เซลเซียสหยุดปฏิกิริยา โดยเพิ่ม 100 ml ของ 50 mmol โซเดียมคาร์บอเนตFluorescence เป็นวัดที่มีความยาวคลื่นในการกระตุ้นของ360 nm และความยาวคลื่นการเล็ดรอดของ 450 nm (Tecan อนันต์200) การทดลองได้ดำเนินการ 2 ชุดอิสระ และวัดใน triplicatesการเปิดใช้งานการเปรียบเทียบระหว่างสายพันธุ์ต่าง ๆ chitinaseกิจกรรมและจำนวนโปรตีนรวมต้องอยู่ในความสัมพันธ์ ดังนั้นสร้างกิจกรรม chitinase เฉพาะสำหรับพื้นผิวในรายละเอียด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

SigmaeAldrich
กิจกรรมได้รับการทดสอบโดยใช้การเรืองแสงที่ใช้ทดสอบ พื้นผิวที่แตกต่างกันถูกนำมาใช้เพื่อตรวจสอบ endochitinase-
กิจกรรมและ exochitinase 4 Methylumbelliferyl N,? N-diacetylb-
D-chitobioside และ 4 Methylumbelliferyl N-acetyl-BD-glucosaminide
ถูกนำมาใช้เพื่อตรวจสอบกิจกรรม exochitinase ทั้งพื้นผิวที่ถูกนำไปใช้ในการแยกแยะระหว่างกิจกรรม chitobiosidase และกิจกรรม BN-acetylglucosamidase ในการตรวจสอบ endochitinase กิจกรรม 4 Methylumbelliferyl BDN, N0, 00-triacetylchitotriose ถูกนำมาใช้ กิจกรรมไคติเนสที่ทำให้เกิดการย่อยสลายของพื้นผิวและรุ่น 4 Methylumbelliferone และสามารถตรวจพบ fluorimetrically (Wortman et al, 1986;.. ร็อบบินส์ et al, 1988; อุเอโนะ et al, 1991. โอไบรอันและ Colwell, 1987) พื้นผิวเหล่านั้นถูกนำมาใช้ในความเข้มข้น 0.2 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร 1 ตามลำดับ ตัวอย่างหมุนเหวี่ยงที่ 18.000 กรัม 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 นาทีในตอนแรก 10 มิลลิลิตรใส100 มล. ของพื้นผิวมีการเพิ่มและบ่มเป็นเวลา 30 นาทีที่ 37 องศาเซลเซียส. ปฏิกิริยาก็หยุดโดยการเพิ่ม 100 มล. 50 มิลลิโมลโซเดียมคาร์บอเนต. เรืองแสงวัดที่ความยาวคลื่นกระตุ้นของ360 นาโนเมตรและที่ความยาวคลื่นการปล่อย 450 นาโนเมตร (อนันต์ Tecan 200) การทดลองดำเนินการในสองซีรีส์ที่เป็นอิสระและวัดใน triplicates. ต้องการเปิดใช้งานเปรียบเทียบระหว่างสายพันธุ์ที่แตกต่างกันไคติเนสกิจกรรมและปริมาณโปรตีนรวมต้องอยู่ในความสัมพันธ์ดังนั้นกิจกรรมไคติเนสถูกสร้างขึ้นเฉพาะสำหรับสารตั้งต้นในรายละเอียด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

sigmaealdrich . กิจกรรมทดสอบโดยใช้ fluorescence
) ตาม พื้นผิวที่แตกต่างกันถูกใช้เพื่อตรวจสอบพบ -
และกิจกรรม exochitinase . 4-methylumbelliferyl N ,  n-diacetylb -
d-chitobioside 4-methylumbelliferyl และ n-acetyl-b-d-glucosaminide
ถูกใช้เพื่อกำหนดกิจกรรม exochitinase . ทั้ง
พื้นผิวเพื่อใช้แยกแยะระหว่างกิจกรรม
โทไบโอซิเดสและกิจกรรม b-n-acetylglucosamidase . ตรวจพบกิจกรรม 4-methylumbelliferyl b-d-n NO
, ,
triacetylchitotriose โมงใช้ กิจกรรมของเอนไซม์เกิดการย่อยสลายของพื้นผิวและ
รุ่น 4-methylumbelliferone และสามารถตรวจพบ fluorimetrically
( วอร์ทแมน et al . , 1986 ; Robbins et al . , 1988 ; ( et al . , 1991 ;
O ' Brien และโคลเวลล์ , 1987 ) พื้นผิวที่ถูกใช้ใน
ความเข้มข้น 0.2 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร  1 ตามลำดับ จำนวนระดับ
ที่ 18.000 g 4  C นาน 60 นาที ในตอนแรก 10 ml ของน่าน
100 ml ( มีเพิ่มและบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาที 
ปฏิกิริยาถูกหยุดโดยการเพิ่ม 100 ml 50 มิลลิโมล โซเดียม คาร์บอเนต .
เรือง วัดที่ความยาวคลื่นกระตุ้น
360 nm และในการปล่อยความยาวคลื่น 450 nm ( TECAN อนันต์
200 )การทดลองในอิสระ 2 ชุด และวัดล้อม
.
เพื่อให้เปรียบเทียบระหว่างสายพันธุ์ที่แตกต่างกัน กิจกรรมของเอนไซม์ไคติเนส
และปริมาณโปรตีนทั้งหมด ต้องอยู่ในระดับปานกลาง ดังนั้นกิจกรรมของเอนไซม์ที่เฉพาะเจาะจงถูกสร้างขึ้น

สำหรับพื้นผิวในรายละเอียด