3. Results and discussion3.1. Selec

3. Results and discussion
3.1. Selection of the immobilization support
Derivatives were prepared using high activated supports with
the objective of achieving an intense multipoint covalent attachment
or an intense adsorption [10,15]. Through titration of
the remaining sodium periodate, an activation degree of 106
micromoles of glyoxyl groups mL−1 packed agarose beads was
determined. Therefore, we can assume that each enzyme molecule
has many reactive groups under its surface after immobilization.
If the enzyme interacts with the supports through many points,
enzyme stability by their three-dimensional structure “rigidification”
may be obtained [10,31].
The beta-amylase immobilization was performed by using
glyoxyl, MANAE and glutaraldehyde-agarose supports under the
conditions described in methods. Different protein:support ratios
were tested for each support (data not shown). The expressed
activity gradually increased whilst 100% immobilization was maintained;
with the highest possible loads being obtained using
MANAE and glutaraldehyde supports (Table 1). Using the glyoxylagarose
support, it was not possible to achieve high percentages
of immobilization, even using the lowest protein loading. This low
loading using glyoxyl supports could be due to the lack of a region
bearing many exposed Lys residues able to react with the enzyme

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3. ผลลัพธ์ และสนทนา
3.1 ตัวเลือกการสนับสนุนตรึงโป
อนุพันธ์ได้เตรียมใช้สนับสนุนเปิดสูงด้วย
วัตถุประสงค์ของการบรรลุสิ่งที่แนบมา covalent multipoint รุนแรง
หรือดูดซับความรุนแรง [10,15] ผ่านการไทเทรตของ
โซเดียมเหลือ periodate องศาการเปิดของ 106
micromoles mL−1 บรรจุลูกปัด agarose มีกลุ่ม glyoxyl
กำหนด ดังนั้น เราสามารถสมมุติว่าแต่ละโมเลกุลของเอนไซม์
มีหลายกลุ่มปฏิกิริยาภายใต้พื้นผิวของหลังตรึงโป
ถ้าเอนไซม์โต้ตอบกับสนับสนุนผ่านหลายจุด,
เสถียรภาพของเอนไซม์ โดยโครงสร้างสามมิติของ "rigidification"
ได้ [10,31] ได้
ตรึงโปเบต้า-amylase ทำโดย
glyoxyl, MANAE และ glutaraldehyde agarose สนับสนุนภายใต้การ
เงื่อนไขที่อธิบายไว้ในวิธี อัตราส่วนแตกต่างกันโปรตีน: สนับสนุน
ทดสอบสำหรับแต่ละการสนับสนุน (ข้อมูลไม่แสดง) การแสดง
กิจกรรมที่ค่อย ๆ เพิ่มขึ้นในขณะที่ถูกตรึงโป 100% รักษา;
มีได้สูงสุดโหลดกำลังรับใช้
MANAE และ glutaraldehyde สนับสนุน (ตารางที่ 1) โดยใช้การ glyoxylagarose
สนับสนุน ไม่สามารถให้เปอร์เซ็นต์สูง
ของตรึงโป แม้ใช้การโหลดโปรตีนต่ำ ต่ำนี้
โหลดที่ใช้สนับสนุนการ glyoxyl อาจจะเนื่องจากมีพื้นที่
แบริ่งหลายสัมผัสตกค้าง Lys จะทำปฏิกิริยากับเอนไซม์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3 ผลและอภิปราย
3.1 ตัวเลือกของการสนับสนุนการตรึง
อนุพันธ์ได้รับการจัดเตรียมโดยใช้สนับสนุนการใช้งานสูงที่มี
วัตถุประสงค์ในการบรรลุสิ่งที่แนบมาที่รุนแรงหลายโควาเลนต์
หรือการดูดซับที่รุนแรง [10,15] ผ่านการไตเตรทของ
โซเดียม periodate เหลือองศายืนยันการใช้งานจาก 106
micromoles กลุ่ม glyoxyl mL-1 บรรจุลูกปัด agarose ได้รับการ
พิจารณา ดังนั้นเราจึงสามารถสรุปได้ว่าแต่ละโมเลกุลเอนไซม์
มีกลุ่มปฏิกิริยาจำนวนมากภายใต้พื้นผิวของมันหลังจากที่ตรึง
ถ้าเอนไซม์มีปฏิสัมพันธ์กับการสนับสนุนผ่านหลายจุดที่
มีเสถียรภาพการทำงานของเอนไซม์โดยสามมิติโครงสร้าง "rigidification" ของพวกเขา
อาจจะได้รับ [10,31]
ตรึงเบต้าอะไมเลสได้รับการดำเนินการโดยใช้
glyoxyl, MANAE และ glutaraldehyde-agarose สนับสนุนภายใต้
เงื่อนไขที่ระบุไว้ในวิธีการ โปรตีนที่แตกต่างกันอัตราส่วนการสนับสนุน
ได้มีการทดสอบสำหรับการสนับสนุนแต่ละ (ไม่ได้แสดงข้อมูล) แสดง
กิจกรรมเพิ่มขึ้นเรื่อย ๆ ในขณะที่การตรึง 100% ได้รับการดูแลรักษา
ที่มีโหลดสูงสุดที่เป็นไปได้ที่จะถูกใช้
MANAE และ glutaraldehyde สนับสนุน (ตารางที่ 1) โดยใช้ glyoxylagarose
สนับสนุนมันเป็นไปไม่ได้ที่จะบรรลุเปอร์เซ็นต์สูง
ของการตรึงแม้จะใช้ในการโหลดโปรตีนต่ำสุด นี้ต่ำ
โหลดใช้ glyoxyl สนับสนุนอาจเป็นเพราะการขาดของภูมิภาค
ที่มีหลายสัมผัสสารตกค้างลิซสามารถที่จะทำปฏิกิริยากับเอนไซม์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 . ผลและการอภิปราย
3.1 . การเลือกของการสนับสนุน
การตรึงเตรียมใช้อนุพันธ์สูงใช้งานรองรับกับ
วัตถุประสงค์ของขบวนการที่รุนแรงแบบโควาเลนต์แนบ
หรือรุนแรงดูดซับ [ 10 15 ] ผ่านที่มี
เหลือโซเดียมมากกว่า การกระตุ้นระดับ 106
ไมโครโมของกลุ่ม glyoxyl ml − 1 บรรจุลูกปัดคือ
, มุ่งมั่น ดังนั้นเราสามารถสรุปได้ว่า แต่ละกลุ่มมีปฏิกิริยาเอนไซม์โมเลกุล
มีหลายภายใต้พื้นผิวหลังจากการตรึงเอนไซม์ .
ถ้าโต้ตอบกับสนับสนุนผ่านหลายจุด เสถียรภาพของโครงสร้างสามมิติของเอนไซม์

" rigidification " อาจจะได้รับ [ 10,31 ] .
เบต้าได้จากการตรึงด้วย
glyoxyl manae glutaraldehyde , และ , สนับสนุนภายใต้
เงื่อนไขที่อธิบายไว้ในวิธีการ โปรตีนต่าง ๆสนับสนุนอัตราส่วน
ทดสอบแต่ละสนับสนุน ( ข้อมูลไม่แสดง ) แสดงกิจกรรมที่เพิ่มขึ้นในขณะที่
100% ตรึงไว้ ;
ที่มีมากที่สุดที่เป็นไปได้ได้รับการโหลดและสนับสนุน
manae กลูตารัลดีไฮด์ ( ตารางที่ 1 ) การใช้ glyoxylagarose
สนับสนุน มันเป็นไปไม่ได้ที่จะบรรลุระดับสูงของการตรึงค่า
,แม้การใช้โหลดโปรตีนที่ถูกที่สุด นี้ต่ำ
โหลดใช้ glyoxyl สนับสนุนอาจเป็นเนื่องจากการขาดของพื้นที่
แบริ่งหลายสัมผัส . ตกค้างสามารถทำปฏิกิริยากับเอนไซม์