The soybean seeds were crushed to fine chips, and a 0.5 g
sample was incubated overnight with 0.5 mL extraction
buffer (0.1 M Tris-HCl [pH 8.0] with 20 mM CaCl2) and
then centrifuged at 3,000 rpm for 1 h at 20°C (Lee et al.
2011). A 200-μL aliquot of the supernatant was transferred to
96-well PCR plates and centrifuged at 3,000 rpm for 1 h at
20°C; 3 μL of the supernatant was then mixed with 7 μL of
protein sample buffer (provided by Caliper Life Sciences,
Hopkinton, MA, USA) and boiled at 100°C for 5 min.
ถั่วเหลืองเมล็ดพันธุ์ได้ถูกกดทับเป็นชั้นดีมันฝรั่งทอด,และ 0.5 G
ตัวอย่างเป็น incubated พักค้างคืนด้วย 0.5 มล.สกัด
Buffer ( 0.1 ม.บริษัททริสเรทติ้ง - HCL [ pH 8.0 ]ด้วย 20 มม. cacl 2 )และ
จากนั้น centrifuged ที่ 3 , 000 รอบต่อนาทีสำหรับ 1 ชั่วโมงที่ 20 ° C ( Lee et al .
2011 ) aliquot 200 - μl ของ supernatant ได้ถูกโอนไปยัง
96 - รวมถึงแผ่น pcr และ centrifuged ที่ 3 , 000 รอบต่อนาทีสำหรับ 1 ชั่วโมงที่
20 ° C3 μl ของ supernatant เป็นแล้วจะนำมาผสมกับ 7 μl ของ
โปรตีนตัวอย่างบัฟเฟอร์(มีให้จากคาลิเปอร์หรืออุปกรณ์ในชีวิตวิทยาศาสตร์,
hopkinton , MA ,สหรัฐอเมริกา)และต้มสุกที่ 100 ° C สำหรับ 5 นาที
การแปล กรุณารอสักครู่..
