Fecal analysis. Groups of six BALB/

Fecal analysis. Groups of six BALB/c female mice that were 6 weeks old were
inoculated by using a plastic gavage with approximately 109 spores suspended in
200 l of sterile H2O. The mice were housed individually in cages with grid floors
to prevent coprophagia. Fresh fecal pellets were collected at appropriate times,
weighed, and homogenized in PBS before serial dilutions were inoculated onto
DSM agar (28) plates and incubated at 37°C for 2 days. Identification of probiotic
strains from the normal flora was based on colony morphology and microscopic
examination of spore size and shape as described previously (5). A control
group of uninoculated mice was also included.
Simulated GIT conditions. Spores were suspended in simulated gastric juice (1
mg of pepsin [porcine stomach mucosa; Sigma] per ml; pH 2.0) or small intestine
fluid (1 mg of pancreatin [porcine pancreas; Sigma] per ml and 0.2% bile salts
[50% sodium cholate–50% sodium deoxycholate; Sigma]; pH 7.4) and incubated
at 37°C. Samples were removed, serially diluted, and plated to determine the
number of CFU per milliliter on DSM agar plates.
Enterotoxin genes. Chromosomal DNA was isolated from strains and tested
for the presence of B. cereus enterotoxin genes by using PCR as described
previously to profile food-poisoning Bacillus strains (14, 30).
Enterotoxin detection. Enterotoxins were detected by using two commercial
immunoassay kits. A BCET-RPLA kit (Oxoid) was used to detect the HblC
subunit of the Hbl enterotoxin in enrichment cultures, while a Tecra BDE kit
(Tecra Diagnostics) was used to detect the NheA subunit of the Nhe enterotoxin.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิเคราะห์ fecal กลุ่ม 6 BALB/c หญิงหนูที่อายุ 6 สัปดาห์ได้inoculated โดยใช้ gavage พลาสติกเพาะเฟิร์นประมาณ 109 ถูกระงับในH2O กระบอก 200 ลิตร หนูจะได้แห่งละกรงกับเส้นชั้นเพื่อป้องกันไม่ให้ coprophagia ขี้สด fecal ถูกเก็บรวบรวมในช่วงเวลาที่เหมาะสมชั่งน้ำหนัก และ homogenized เป็นกลุ่มใน PBS ก่อน dilutions ประจำถูก inoculated ไปAgar DSM (28) แผ่น และ incubated 2 วันที่ 37° C รหัสของโปรไบโอติกส์สายพันธุ์จากพืชปกติได้ตามสัณฐานวิทยาของโคโลนี และกล้องจุลทรรศน์สอบของสปอร์ขนาดและรูปร่างที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (5) ตัวควบคุมกลุ่มของหนู uninoculated ยังไม่รวมจำลองสภาพ GIT เพาะเฟิร์นถูกหยุดชั่วคราวในน้ำ gastric จำลอง (1เพพซิน [mucosa ของกระเพาะอาหารช่วง มก. ซิก] ต่อ ml pH 2.0) หรือลำไส้เล็กน้ำมัน (1 มก. pancreatin [ช่วงตับอ่อน เกลือน้ำดีซิก] ต่อมล. และ 0.2%[50% โซเดียม cholate – 50% โซเดียม deoxycholate ซิกมา]; pH ที่ 7.4) และ incubatedที่ 37 องศาเซลเซียส ตัวอย่างถูกเอาออก serially diluted และชุบเพื่อตรวจสอบการหมายเลขของ CFU ต่อ milliliter บนแผ่น agar DSMEnterotoxin ยีน แยกต่างหากจากสายพันธุ์ และทดสอบดีเอ็นเอของโครโมโซมสำหรับสถานะของยีน enterotoxin cereus เกิดโดยใช้ PCR ดังที่ก่อนหน้านี้กับโพรไฟล์พิษอาหารคัดสายพันธุ์ (14, 30)ตรวจหา enterotoxin ตรวจพบโดยการค้าสอง enterotoxinsชนิดติดตั้งอิสระ immunoassay ชุด BCET-RPLA (Oxoid) ใช้ตรวจการ HblCย่อยของ enterotoxin Hbl ในวัฒนธรรมโดดเด่น ในขณะที่ชุด Tecra มี BDE(Tecra วินิจฉัย) ถูกใช้เพื่อตรวจสอบย่อย NheA ของ Nhe enterotoxin

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การวิเคราะห์อุจจาระ กลุ่มของหกหนู Balb / c หญิงที่อายุ 6
สัปดาห์ได้รับเชื้อโดยใช้ติดชื้อนานพลาสติกที่มีประมาณ109 สปอร์แขวนลอยใน
200 ลิตร H2O ผ่านการฆ่าเชื้อ หนูถูกเก็บเป็นรายบุคคลอยู่ในกรงที่มีพื้นตารางเพื่อป้องกันไม่ให้ coprophagia
เม็ดอุจจาระสดที่ถูกเก็บรวบรวมในเวลาที่เหมาะสม,
การชั่งน้ำหนักและปั่นในพีบีเอสก่อนที่จะเจือจางอนุกรมถูกเชื้อลงบนอาหารเลี้ยงเชื้อ DSM (28) จานและบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 2 วัน
บัตรประจำตัวของโปรไบโอติกสายพันธุ์จากพืชปกติก็ขึ้นอยู่กับลักษณะทางสัณฐานวิทยาและจุลอาณานิคมการตรวจสอบของสปอร์ขนาดและรูปร่างตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้(5) การควบคุมกลุ่มของหนู uninoculated ก็รวม. เงื่อนไข GIT จำลอง สปอร์ถูกระงับในน้ำผลไม้จำลองในกระเพาะอาหาร (1 mg ของน้ำย่อย [เยื่อบุกระเพาะอาหารสุกร; ซิก] ต่อมิลลิลิตร; pH 2.0) หรือลำไส้เล็กของเหลว(1 มิลลิกรัม Pancreatin [ตับอ่อนหมู; ซิก] ต่อมล. และ 0.2% เกลือน้ำดี[50% โซเดียม cholate-50% โซเดียม Deoxycholate; ซิก]; pH 7.4) และบ่มที่อุณหภูมิ37 องศาเซลเซียส ตัวอย่างที่ถูกถอดออกเจือจางลำดับและชุบในการกำหนดจำนวนโคโลนีต่อมิลลิลิตรบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อ DSM. ยีน Enterotoxin โครโมโซมดีเอ็นเอสายพันธุ์ที่แยกได้จากการทดสอบและการปรากฏตัวของยีนบี enterotoxin cereus โดยใช้วิธี PCR ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ที่รายละเอียดสายพันธุ์Bacillus อาหารเป็นพิษ (14, 30). Enterotoxin การตรวจสอบ enterotoxins ถูกตรวจพบโดยใช้สองเชิงพาณิชย์ชุดimmunoassay ชุด bceT-RPLA (Oxoid) ถูกนำมาใช้ในการตรวจสอบ HblC subunit ของ enterotoxin Hbl ในวัฒนธรรมที่เพิ่มคุณค่าในขณะที่ชุด BDE Tecra (Tecra วินิจฉัย) ถูกนำมาใช้ในการตรวจสอบ subunit nheA ของ Nhe enterotoxin

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวิเคราะห์อุจจาระ . จำนวน 6 balb / C หญิง หนูที่อายุ 6 สัปดาห์เก่า
เชื้อโดยใช้ gavage พลาสติกประมาณ 109 สปอร์แขวนลอยใน 
200 ลิตร H2O เป็นหมัน หนูถูกขังในกรงกับตารางแบบพื้น
เพื่อป้องกัน coprophagia . อุจจาระขี้สดจำนวนที่เหมาะสมครั้ง
หนักและบดใน PBS ก่อนปลูกเชื้อลงบน
วิธีการอนุกรมDSM ( 28 ) แผ่นและบ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 2 วัน การจำแนกสายพันธุ์ โปรไบโอติก
จากพืชปกติขึ้นอยู่กับลักษณะโคโลนีและตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์
ขนาดสปอร์และรูปร่างตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( 5 ) การควบคุมกลุ่มของหนูใส่ด้วย

) เงื่อนไขรวม พวก สปอร์ถูกระงับในกระเพาะอาหาร ( 1 ) น้ำผลไม้
มิลลิกรัมเอนไซม์เปปซิน [ จากกระเพาะอาหารเยื่อเมือก ;Sigma ] ต่อมิลลิลิตร ; pH 2.0 ) หรือของเหลวลำไส้
ขนาดเล็ก ( 1 มิลลิกรัม Pancreatin [ จากตับอ่อน ; Sigma ] ต่อมิลลิลิตรและ 0.2% น้ำดีเกลือ
[ 50% และ 50% โซเดียมโซเดียม มิติดี กซีโชเลต ; Sigma ] ; pH 7.4 ) บ่มที่อุณหภูมิ 37 องศา C .
จำนวนอนุกรมเจือจาง และเอา ชุบเพื่อตรวจสอบจำนวนโคโลนีต่อมิลลิลิตรต่อ

ส่วนวุ้นแผ่น ปนยีน โครโมโซมดีเอ็นเอที่แยกได้จากสายพันธุ์และทดสอบ
สำหรับการปรากฏตัวของ B . cereus ปนยีนโดยใช้ PCR ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ในโปรไฟล์ของอาหารเป็นพิษ
Bacillus สายพันธุ์ ( 14 : 30 ) .
ตรวจจับปน . การควบม้าถูกตรวจพบโดยการใช้สองชุดทางค้า

เป็น bcet-rpla Kit ( oxoid ) ถูกใช้ในการตรวจสอบ hblc
subunit ของ hbl ปนในเสริมวัฒนธรรม ในขณะที่เทคร่า BDE Kit
( เทคร่า Diagnostics ) คือใช้ในการตรวจสอบ nhea subunit ของเขาปน .