Individuals were genotyped at eight polymorphic microsatellite loci (Table 2): OM01, OM02, OM03, OM05, OM07, OM08, OM11 and OM12 (Zuo et al., 2011). The polymerase chain reactions (PCRs) were performed in 10-ml volumes containing 0.25 U Taq DNA polymerase (Takara, Japan), 1 x PCR buffer, 0.2 mM dNTP mix, 1.5 mM MgCl2,1 mm of each primer set, and 100 ng of genomic DNA. PCR was performed on a thermal cycler (GeneAmp System 9700) as follows: 3 min at 94 oC, 35 cycles of 45 s at 94 oC, 45 s at the optimal annealing temperature (Ni et al., 2010), and 45 s at 72 oC, followed by a final extension of 5 min at 72 oC. Amplification products were resolved via 6% denaturing polyacrylamide gel, and visualized by silver staining. For allele size determination, a 10-bp DNA ladder (Invitrogen USA) was used as a reference.
บุคคลที่ถูก genotyped ในแปดชนิด polymorphic microsatellite loci (ตารางที่ 2): OM01, OM02, OM03, OM05, OM07, OM08, OM11 และ OM12 (ซูยู et al. 2011) ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCRs) ดำเนินการในปริมาณ 10 มิลลิลิตรประกอบด้วย 0.25 U Taq DNA พอลิเมอเรส (Takara ญี่ปุ่น), 1 x PCR บัฟเฟอร์ ผสม dNTP 0.2 mM, 1.5 มม. MgCl2, 1 มม.ของรองพื้นแต่ละชุด และ 100 ฉบับของดีเอ็นเอการ PCR ทำใน cycler ความร้อน (GeneAmp ระบบ 9700) เป็นดังนี้: 3 นาทีที่ 94 oC รอบ 35 45 s ที่ 94 oC, 45 s หลอมอุณหภูมิสูงสุด (นิ et al. 2010), และ 45 s ที่ 72 oC ตาม ด้วยนามสกุลพิจารณาเป็น 5 นาทีที่ 72 องศาเซลเซียส Amplification ผลิตภัณฑ์ถูกแก้ไข โดย 6% denaturing polyacrylamide เจล และโดยการย้อมสีเงิน สำหรับการกำหนดขนาดอัลลีล บันได DNA 10 bp (Invitrogen สหรัฐอเมริกา) ถูกใช้เป็นการอ้างอิง
การแปล กรุณารอสักครู่..

บุคคลที่ถูก genotyped ที่แปดตำแหน่งไมโคร polymorphic (ตารางที่ 2): OM01, OM02, OM03, OM05, OM07, OM08, OM11 และ om12 (. Zuo et al, 2011) ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์ (PCRs) ได้ดำเนินการในปริมาณ 10 มล. มี 0.25 U Taq DNA Polymerase (Takara ประเทศญี่ปุ่น) 1 x PCR บัฟเฟอร์ผสม dNTP 0.2 มิลลิ 1.5 มิลลิ MgCl2,1 มิลลิเมตรแต่ละชุดไพรเมอร์, และ 100 นาโนกรัม ของดีเอ็นเอ PCR ที่ได้ดำเนินการใน Cycler ความร้อน (GeneAmp ระบบ 9700) เป็นดังนี้: 3 นาทีที่ 94 องศา 35 รอบของ 45 s ที่ 94 องศา 45 s ที่อุณหภูมิการหลอมที่ดีที่สุดและ 45 s ที่ (Ni et al, 2010). 72 องศาเซลเซียสตามด้วยการขยาย Fi NAL 5 นาทีที่ 72 องศาเซลเซียส Ampli Fi ผลิตภัณฑ์ไอออนบวกได้รับการแก้ไขผ่าน 6% denaturing เจลอะคริเลตและมองเห็นโดยการย้อมสีเงิน สำหรับการกำหนดขนาดของอัลลีล, ดีเอ็นเอบันได 10 BP (Invitrogen สหรัฐอเมริกา) ถูกนำมาใช้เป็นข้อมูลอ้างอิง
การแปล กรุณารอสักครู่..

บุคคลที่มีตำแหน่ง genotyped ที่ชนิดจำนวนแปด ( ตารางที่ 2 ) : om01 om02 om03 om05 , , , , om08 om07 , และ , om11 om12 ( จั่ว et al . , 2011 ) โดยวิธีปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส ( pcrs ) จำนวน 10 มิลลิลิตร ปริมาณ 0.25 U ที่มีแท็ก DNA polymerase ( Takara , ญี่ปุ่น ) , 1 x PCR buffer , ผสม dntp 0.2 มม. 1.5 มม. mgcl2,1 มม. สีรองพื้นแต่ละชุดและ 100 กรัมของ genomic DNA ซึ่งถูกแสดงบนวงจรความร้อน ( ระบบ geneamp 9700 ) ดังนี้ : 3 นาทีที่ 94 องศาเซลเซียส 35 รอบ 45 S ที่ 94 องศาเซลเซียส 45 S ที่เหมาะสมอุณหภูมิการอบอ่อน ( ฉัน et al . , 2010 ) และ 45 เป็น 72 องศาเซลเซียส ตามด้วยการถ่ายทอดนาล 5 นาทีที่ 72 องศาเซลเซียส ampli จึงแลกเปลี่ยนผลิตภัณฑ์ถูกแก้ไขผ่าน 6 % ี่ polyacrylamide gel และมองเห็น โดยเงิน staining สำหรับในการคำนวณขนาด 10 คู่เบสดีเอ็นเอบันได ( Invitrogen USA ) ถูกใช้เป็นข้อมูลอ้างอิง
การแปล กรุณารอสักครู่..
