The portion of the roots from an average sample
was rinsed in sterile tap water in a shaker (120 rpm)
to remove extraneous matter (the ratio comprised
1 g of the roots to 100 ml of water). Then the roots
were aseptically sliced into 2–5 mm-length segments,
which were ground into a sterile mortar
with a small amount of water into a suspension that
was then successively ten-fold diluted. Each dilution
was plated in a volume of 0.05 ml onto two
selective media: (1) modified Czapek agar, containing
per liter: glucose, 20 g; K2HPO4, 1.0 g; NaNO3,
2.0 g; MgSO4 7H2O, 0.5 g; KCl, 0.5 g; FeSO4 7H2O,
0.1 g; yeast extract, 0.5 g; and (2) starch–ammonium
nutrient agar, containing per liter: starch,
10.0 g; (NH4)2SO4, 2.0 g; K2HPO4, 1.0 g; yeast
extract, 0.5 g; MgSO4 7H2O, 1.0 g; NaCl, 1.0 g;
CaCO3, 3.0 g. All the media were supplemented
with nystatin (50 mg ml1
) to prevent the fungal
growth. Incubation was performed at 30 1C until
single colonies could be detected. The sample of
each different colony was isolated, purified through
inoculation onto twice-diluted nutrient agar (Difco)
and kept on nutrient and starch agar. All bacterial
isolates were stored on agar slants at 4–5 1C
and under the sterile mineral oil at the room
temperature.
A set of plant roots from each average sample
was surface-sterilized. After washing in shaker the
roots were immersed in 20% bleach for 1.5 min, and
rinsed three times in sterile distilled water (Wilkinson
et al., 1989). The surface sterility of the roots
was verified by their placing on nutrient media.
Root’s treatment and isolation of endophytic
bacteria were carried out as described above.
Qu
ส่วนของรากจากตัวอย่างมีค่าเฉลี่ยมี rinsed ในน้ำประปาใส่ในเชคเกอร์ (120 รอบต่อนาที)เอาเรื่องที่ไม่เกี่ยวข้อง (อัตราส่วนประกอบด้วย1 กรัมของรากไป 100 ml ของน้ำ) แล้วรากaseptically ถูกหั่นลงใน 2-5 มม.-ความยาวส่วนซึ่งมีพื้นดินใส่ครกมีจำนวนน้ำเข้าระงับที่ถูกแล้วติด ๆ กัน ten-fold ผสม แต่ละการเจือจางถูกชุบในปริมาตรของ 0.05 ml ลงบนสองสื่อที่เลือก: (1) ปรับเปลี่ยน Czapek agar ประกอบด้วยต่อลิตร: กลูโคส 20 g K2HPO4, 1.0 g NaNO32.0 g MgSO4 7H2O, 0.5 g KCl, 0.5 g FeSO4 7H2O0.1 g สารสกัดจากยีสต์ 0.5 g และ (2) แป้ง – แอมโมเนียธาตุอาหาร agar ประกอบด้วยต่อลิตร: แป้ง10.0 g (NH4) 2SO4, 2.0 g K2HPO4, 1.0 g เชื้อยีสต์แยก 0.5 g MgSO4 7H2O, 1.0 g NaCl, 1.0 gCaCO3, 3.0 g สื่อถูกเสริมมี nystatin (ml1 50 มิลลิกรัม) เพื่อป้องกันเชื้อราเจริญเติบโต ทำการบ่มที่ 1C 30 จนถึงพบอาณานิคมเดียว ตัวอย่างของแต่ละแตกต่างกันคือแยก บริสุทธิ์ผ่านinoculation ลงผสมสองธาตุอาหาร agar (Difco)และเก็บไว้ในระบบแล้วแป้ง agar แบคทีเรียทั้งหมดแยกถูกเก็บไว้ใน slants agar ที่ 1 4 – 5 Cและน้ำมันแร่กอซที่ห้องอุณหภูมิชุดของรากพืชจากตัวอย่างแต่ละค่าเฉลี่ยมีพื้นผิว sterilized หลังจากซักผ้าในเชคเกอร์รากแช่อยู่ในเทพมรณะ 20% สำหรับ 1.5 นาที และrinsed สามครั้งในน้ำกลั่นฆ่าเชื้อ (Wilkinsonร้อยเอ็ด al., 1989) Sterility ผิวของรากถูกตรวจสอบ โดยการใส่ธาตุอาหารสื่อหลักของการรักษาและแยก endophyticแบคทีเรียได้ดำเนินตามที่อธิบายไว้ข้างต้นโต๊ะ
การแปล กรุณารอสักครู่..

ส่วนของรากจากตัวอย่างเฉลี่ยถูกล้างในน้ำประปาผ่านการฆ่าเชื้อในเครื่องปั่น (120 รอบต่อนาที) ที่จะลบเรื่องภายนอก (อัตราส่วนประกอบด้วย1 กรัมของรากถึง 100 มล. ของน้ำ) แล้วรากถูกหั่นปลอดเชื้อลงใน 2-5 มิลลิเมตรส่วนความยาวที่ถูกบดเป็นครกผ่านการฆ่าเชื้อที่มีจำนวนเล็กๆ ของน้ำเข้าไประงับที่มีอยู่แล้วอย่างต่อเนื่องสิบเท่าเจือจาง เจือจางแต่ละคนได้รับการชุบในปริมาณ 0.05 มล. ลงบนทั้งสองสื่อเลือก(1) การปรับเปลี่ยนวุ้น Czapek ที่มีต่อลิตร: กลูโคส 20 กรัม; K2HPO4 1.0 กรัม NaNO3, 2.0 กรัม; MgSO4 7H2O, 0.5 กรัม KCl, 0.5 กรัม FeSO4 7H2O, 0.1 กรัม; สารสกัดจากยีสต์, 0.5 กรัม และ (2) แป้งแอมโมเนียมวุ้นสารอาหารที่มีต่อลิตร: แป้ง10.0 กรัม (NH4) 2SO4 2.0 กรัม K2HPO4 1.0 กรัม ยีสต์สารสกัดจาก 0.5 กรัม; MgSO4 7H2O 1.0 กรัม โซเดียมคลอไรด์ 1.0 กรัมCaCO3 3.0 กรัม สื่อทั้งหมดถูกเสริมด้วย nystatin (50 มก. ML1) เพื่อป้องกันไม่ให้เชื้อราเจริญเติบโต บ่มเพาะได้ดำเนินการวันที่ 30 1C จนกว่าอาณานิคมเดียวสามารถตรวจพบ ตัวอย่างของแต่ละคนที่แตกต่างกันอาณานิคมที่แยกบริสุทธิ์ผ่านการฉีดวัคซีนครั้งที่สองบนสารอาหารที่ปรับลดวุ้น(Difco) และเก็บไว้ในสารอาหารและอาหารเลี้ยงเชื้อแป้ง ทั้งหมดแบคทีเรียสายพันธุ์ที่ถูกจัดเก็บไว้ใน slants วุ้นที่ 4-5 1C และภายใต้น้ำมันแร่ที่ผ่านการฆ่าเชื้อในห้องอุณหภูมิ. ชุดของรากพืชจากแต่ละตัวอย่างเฉลี่ยเป็นพื้นผิวที่ผ่านการฆ่าเชื้อ หลังจากล้างในเครื่องปั่นรากถูกแช่ในน้ำยาฟอกขาว 20% เป็นเวลา 1.5 นาทีและล้างสามครั้งในน้ำกลั่นปลอดเชื้อ(วิลกินสันet al., 1989) หมันพื้นผิวของรากได้รับการตรวจสอบโดยการวางพวกเขาในการสื่อสารอาหาร. การรักษารากและแยกเอนโดไฟท์แบคทีเรียได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ข้างต้น. Qu
การแปล กรุณารอสักครู่..

ส่วนของรากจาก
ตัวอย่างเฉลี่ยล้างในน้ำหมันในเครื่องปั่น ( 120 รอบต่อนาที )
เอาเรื่องภายนอก ( อัตราส่วน )
1 กรัมของราก 100 มิลลิลิตรของน้ำ ) แล้วราก
ถูก aseptically หั่นเป็น 2 –ความยาว 5 มม. ส่วนที่พื้นดินเป็น
ปูนปลอดเชื้อที่มีขนาดเล็กปริมาณของน้ำในช่วงล่างที่
ก็กระชั้นชิดสิบพับเจือจางแต่ละ dilution
ถูกชุบในปริมาณ 0.05 ml ลงบนสอง
เลือกสื่อ ( 1 ) ปรับเปลี่ยนอาหาร Czapek วุ้นที่มี
: กลูโคส 20 กรัมต่อลิตร ; k2hpo4 1.0 g ; NaNO3
2.0 , G ; MgSO4 ใ 7h2o 0.5 กรัม ; ปริมาณ 0.5 g ; feso4 7h2o
0.1 g ; ยีสต์ , สารสกัด , 0.5 กรัม และ ( 2 ) แป้ง ( แอมโมเนียม
อาหารเลี้ยงเชื้อสารอาหารที่มีต่อลิตร : แป้ง ,
4 g ; ( NH4 ) 2so4 2.0 G ; k2hpo4 1.0 g ; สารสกัดจากยีสต์
0.5 กรัม ; MgSO4 ใ 7h2o 1.0 g ; NaCl 10 g ;
CaCO3 , 3.0 กรัม ทุกสื่อที่ถูกเสริมด้วยนัยสะแตติน ( 50 มิลลิกรัม ml1
) เพื่อป้องกันการเจริญเติบโตของเชื้อรา
ระยะเวลาดำเนินการโดย 30 1C จนกว่า
อาณานิคมเดียว สามารถตรวจพบ ตัวอย่างของ
ที่แตกต่างกันในแต่ละอาณานิคมถูกแยกบริสุทธิ์ผ่านการเจือจางลงบนอาหารเลี้ยงเชื้อสารอาหาร
2
( difco ) เก็บไว้ในสารอาหารและแป้งวุ้น แบคทีเรีย
ทั้งหมดสายพันธุ์ที่ถูกเก็บไว้บนอาหารวุ้น slants ที่ 4 – 5 c
ภายใต้น้ำมันฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิห้อง
.
ชุดของรากพืชจากแต่ละตัวอย่างเฉลี่ย
ฟอกฆ่าเชื้อ . หลังจากล้างเครื่องปั่น
รากถูกแช่ในน้ำยาฟอกขาว 20% 1.5 นาทีและ
ล้างสามครั้งในน้ำกลั่นปลอดเชื้อ ( Wilkinson
et al . , 1989 ) พื้นผิวการเป็นหมันของราก
ถูกตรวจสอบ โดยการวางพวกเขาบนสื่อ nutrient
รักษารากฟันและการแยกราเอนโดไฟต์
แบคทีเรีย ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ข้างต้น .
คู
การแปล กรุณารอสักครู่..
