2.4. Ethanol fermentation
Active, dry S. cerevisiae (Thermosacc Dry, Lallemand, WI, USA) was used in accordance with manufactures instructions for fermentation studies. To evaluate fermentation of CGT sugar hydrolysates three approaches were selected. In approach sugar hydrolysates were prepared from water washed recovered fibre pretreated under optimised conditions (0.8% H2SO4 at 180 ํC for 12 min), followed by enzymatic hydrolysis (80 FPU/g DM, pH 5.0, 48 h) and recovered sugars were subject to fermentation. Approach , sugar hydrolysates were produced by pretreating CGT under the same optimised conditions (0.8% H2SO4 at 180 ํC for 12 min) with subsequent cellulase hydrolysis (80 FPU/g DM, pH 5.0, 48 h)
of pH adjusted whole pretreated slurries and recovered sugars were subject to fermentation. For approaches 1 and 2, the liquid hydrolysates following enzymatic hydrolysis were separated from residual solids by vacuum filtration
using a Büchner funnel and Whatman glass microfiber GF/A filters and referred to as WF and WS hydrolysates. The yeast fer fermentation media consisted of filter sterilised hydrolysate (0.22 lm, nylon filter, Millipore, MA, USA) containing 2 g/L
KH2PO4, 5 g/L yeast extract, 10 g/L peptone and 1 g/L MgSO4 and were inoculation directly with dried yeast at 5 g/L to initiate fermentation. Approach 3 was a simultaneous saccharification/ hydrolysis fermentation (SSF) where CGT was pretreated under the same described conditions (0.8% H2SO4 at 180 ํC for 12 min) and whole slurries were pH adjusted to 5.0 using NaOH. Whole slurries were supplemented with 2 g/L KH2PO4, 5 g/L yeast extract, 10 g/L peptone and 1 g/L MgSO4 and re-sterilised by autoclaving at 121 ํC for 15 min. When the temperature had reached approximately 30 ํC, 80 FPU/g DM and 5 g/L dry yeast were directly added to initiate SSF.
2.4 หมักเอทานอลงาน แห้ง S. cerevisiae (แห้ง Thermosacc, Lallemand, WI สหรัฐอเมริกา) ถูกใช้ตามคำแนะนำของผู้ผลิตสำหรับศึกษาการหมัก หมัก CGT น้ำตาล hydrolysates 3 วิธีการประเมินที่เลือก ในน้ำตาลวิธี hydrolysates ที่เตรียมจากน้ำล้างใยกู้ pretreated ภายใต้เงื่อนไขที่บวม (0.8% กำมะถัน ํC 180 สำหรับนาที 12), ตาม ด้วยไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบ (80 FPU/g DM ค่า pH 5.0, 48 h) และกู้คืนน้ำตาลถูกหมักด้วย วิธี น้ำตาล hydrolysates ผลิต โดย pretreating CGT ภายใต้เงื่อนไขบวมเหมือนกัน (0.8% กำมะถัน ํC 180 สำหรับ 12 นาที) ด้วยไฮโตรไลซ์ cellulase ภายหลัง (FPU 80 g DM ค่า pH 5.0, 48 h)ของ slurries ปรับปรุงทั้ง pretreated และกู้คืนน้ำตาลถูกหมัก สำหรับวิธี 1 และ 2, hydrolysates ของเหลวต่อไฮโตรไลซ์เอนไซม์ในระบบถูกแยกออกจากของแข็งที่เหลือ ด้วยเครื่องกรองสูญญากาศใช้ Büchner เป็นกรวยและ Whatman แก้ว microfiber กรอง GF/A และเรียกว่า hydrolysates ดับเบิลยูเอฟและ WS สื่อหมัก fer ยีสต์ประกอบด้วยตัวกรอง sterilised ด้วย (0.22 lm กรองไนลอน มาก MA สหรัฐอเมริกา) ประกอบด้วย 2 g/LKH2PO4 ยีสต์ 5 กรัม/L สารสกัดจาก peptone 10 g/L และ 1 g/L MgSO4 และ inoculation กับยีสต์แห้งที่ 5 g/L เพื่อเริ่มการหมัก วิธี 3 ถูก saccharification พร้อม/ หมักไฮโตรไลซ์ (SSF) ที่ถูก pretreated CGT ภายใต้เดียวกันอธิบายเงื่อนไข (0.8% กำมะถัน ํC 180 สำหรับ 12 นาที) และ slurries ทั้งหมดถูกปรับปรุงโดยใช้ NaOH 5.0 ค่า pH Slurries ทั้งถูกเสริม ด้วย 2 g/L KH2PO4, 5 g/L ยีสต์สกัด peptone 10 g/L และ 1 g/L MgSO4 และ sterilised ใหม่ โดย autoclaving ที่ 121 ํC สำหรับ 15 นาที เมื่ออุณหภูมิได้ถึงประมาณ 30 ํC มีเพิ่ม 80 FPU/g DM และ 5 g/L แห้งยีสต์โดยตรงเริ่ม SSF
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.4 การหมักเอทานอล
ที่ใช้งานแห้ง S. cerevisiae (Thermosacc แห้ง Lallemand, WI, USA) ที่ใช้ในการผลิตให้สอดคล้องกับคำแนะนำสำหรับการศึกษาการหมัก เพื่อประเมินการหมัก CGT ไฮโดรไลเซน้ำตาลสามวิธีที่ถูกเลือก ในวิธีการไฮโดรไลเซน้ำตาลที่เตรียมจากน้ำล้างหายใยปรับสภาพภายใต้เงื่อนไขที่ดีที่สุด (0.8% H2SO4 ที่ 180 ํ C เป็นเวลา 12 นาที) ตามด้วยการย่อยโปรตีน (80 FPU / กรัม DM, พีเอช 5.0, 48 ชั่วโมง) และการกู้คืนน้ำตาลเป็นเรื่อง การหมัก วิธีการไฮโดรไลเซน้ำตาลที่ผลิตโดยบำบัดของ CGT ภายใต้เงื่อนไขเดียวกันที่ดีที่สุด (0.8% H2SO4 ที่ 180 ํ C เป็นเวลา 12 นาที) ที่มีการย่อยสลายเซลลูเลสที่ตามมา (80 FPU / กรัม DM, พีเอช 5.0, 48 ชั่วโมง)
การปรับ pH slurries ปรับสภาพทั้งหมดและ น้ำตาลหายเป็นเรื่องที่หมัก สำหรับแนวทางที่ 1 และ 2, ไฮโดรไลเซเหลวต่อไปนี้ย่อยโปรตีนถูกแยกออกจากของแข็งที่เหลือโดยการกรองสูญญากาศ
โดยใช้ช่องทางBüchnerและกระจก Whatman ไมโคร GF / กรองและเรียกว่า WF และไฮโดรไลเซ WS ยีสต์เธอมีสื่อการหมักประกอบด้วยกรองไฮโดรไลฆ่าเชื้อ (0.22 LM กรองไนลอน, ค, MA, USA) ที่มี 2 กรัม / ลิตร
KH2PO4, 5 กรัม / ลิตรสารสกัดจากยีสต์, 10 กรัม / ลิตรเปปโตนและ 1 กรัม / ลิตร MgSO4 และมี การฉีดวัคซีนโดยตรงกับยีสต์แห้งที่ 5 กรัม / ลิตรที่จะเริ่มต้นการหมัก วิธีที่ 3 พร้อมกัน saccharification / การหมักย่อยสลาย (SSF) ที่ได้รับการปรับสภาพ CGT ภายใต้เงื่อนไขเดียวกันอธิบาย (0.8% H2SO4 ที่ 180 ํ C เป็นเวลา 12 นาที) และ slurries ทั้งถูกปรับ pH 5.0 ที่จะใช้ NaOH slurries ทั้งได้รับการเสริมด้วย 2 กรัม / ลิตร KH2PO4, 5 กรัม / ลิตรสารสกัดจากยีสต์, 10 กรัม / ลิตรเปปโตนและ 1 กรัม / ลิตร MgSO4 และ re-ฆ่าเชื้อโดยการนึ่งฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ 121 ํ C เป็นเวลา 15 นาที เมื่ออุณหภูมิได้ถึงประมาณ 30 ํ C 80 FPU / กรัม DM และ 5 กรัม / ลิตรยีสต์แห้งที่ถูกเพิ่มโดยตรงที่จะเริ่มต้น SSF
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.4 . หมักเอธานอล
งานบริการ S . cerevisiae ( thermosacc แห้ง lallemand , WI , USA ) ถูกใช้ตามผู้ผลิตคำแนะนำสำหรับการศึกษาการหมัก เพื่อประเมินกระบวนการของ CGT น้ำตาล 3 แนวทางที่ถูกคัดเลือก ในแนวทางของน้ำตาลที่เตรียมจากน้ำล้างหายใยที่ได้รับภายใต้เงื่อนไขที่ดีที่สุด ( 08 % กรดซัลฟิวริกที่อุณหภูมิ 180 องศาเซลเซียส นาน 12 นาที ) ตามด้วยเอนไซม์ ( 80 FPU / g DM , pH 5.0 , 48 ชั่วโมง ) และกู้คืนน้ำตาลเป็นเรื่องการหมัก วิธีการผลิตน้ำตาลของ pretreating CGT ภายใต้เงื่อนไขการออกแบบเดียวกัน ( 0.8% กรดซัลฟิวริกที่อุณหภูมิ 180 องศาเซลเซียส นาน 12 นาที ) ด้วยเอนไซม์ไฮโดรไลซ์ตามมา ( 80 FPU / g DM , pH 5.0 , 48 H )
ของทั้งหมดที่ได้รับ slurries ปรับ pH และกู้คืนน้ำตาลเป็นเรื่องการหมัก สำหรับวิธีที่ 1 และ 2 ของของเหลวต่อเอนไซม์แยกจากของแข็งที่เหลือจากการกรองสูญญากาศโดยใช้ B ü
chner ช่องทางและ whatman แก้วไมโคร GF / ตัวกรองและเรียกว่าเป็น WF และ WS ของ .ยีสต์เพื่อหมักกรองสื่อประกอบด้วย sterilised ไฮโดรไลเสท ( 0.22 มิลลิ , LM , กรอง , MA , USA ไนล่อน ) ที่มี 2 กรัม / ลิตร
kh2po4 5 กรัมต่อลิตรและสารสกัดจากยีสต์ 10 กรัมต่อลิตร ตามลำดับ และ 1 กรัม / ลิตรและใช้ MgSO4 ใโดยยีสต์แห้ง 5 กรัม / ลิตร เริ่มหมัก .แนวทางที่ 3 เส้น / การหมักย่อยพร้อมกัน ( SSF ) ซึ่งเป็นสาขาที่ได้รับภายใต้เงื่อนไขเดียวกันอธิบาย ( 0.8% กรดซัลฟิวริกที่อุณหภูมิ 180 องศาเซลเซียส นาน 12 นาที ) และมีทั้ง slurries ปรับ pH 5.0 ใช้ NaOH ทั้ง slurries ถูกเสริมด้วย 2 กรัม / ลิตร kh2po4 5 กรัมต่อลิตรและสารสกัดจากยีสต์ 10 กรัมต่อลิตร ตามลำดับ และ 1 กรัมต่อลิตรและ sterilised MgSO4 ใโดยอัตราส่วนโฟกัสที่ 121 องศาเซลเซียส นาน 15 นาทีเมื่ออุณหภูมิถึงประมาณ 30 องศาเซลเซียส , 80 FPU / g DM และ 5 กรัม / ลิตร เติมยีสต์แห้งโดยตรงเพื่อเริ่มต้น SSF .
การแปล กรุณารอสักครู่..