High-throughput 96-well solid phase

High-throughput 96-well solid phase extraction (SPE) plate with C-18 reversed phase sorbent followed by UV-visible (UV-Vis) microplate reader was applied to the analysis of hydrophobic drugs in surfactant-containing dissolution media, which are often used to evaluate the in-vitro drug release of drug eluting stents (DES). Everolimus and dissolution medium containing Triton X-405 were selected as representatives, and the appropriate SPE conditions (adsorption, washing and elution) were investigated to obtain a practical and reliable sample clean-up. It was shown that the developed SPE procedure was capable of removing interfering components (Triton X-405 and its impurities), allowing for an accurate automated spectrophotometric analysis to be performed. The proposed UV-Vis spectrophotometric method yielded equivalent results compared to a classical LC analysis method. Linear regression analysis indicated that both methods have the ability to obtain test results that are directly proportional to the concentration of analyte in the sample within the selected range of 1.0–10 μg/ml for everolimus, with a coefficient of correlation (r2) value of >0.998 and standard deviation of the residuals (Syx) of

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

High-throughput 96-well solid phase extraction (SPE) plate with C-18 reversed phase sorbent followed by UV-visible (UV-Vis) microplate reader was applied to the analysis of hydrophobic drugs in surfactant-containing dissolution media, which are often used to evaluate the in-vitro drug release of drug eluting stents (DES). Everolimus and dissolution medium containing Triton X-405 were selected as representatives, and the appropriate SPE conditions (adsorption, washing and elution) were investigated to obtain a practical and reliable sample clean-up. It was shown that the developed SPE procedure was capable of removing interfering components (Triton X-405 and its impurities), allowing for an accurate automated spectrophotometric analysis to be performed. The proposed UV-Vis spectrophotometric method yielded equivalent results compared to a classical LC analysis method. Linear regression analysis indicated that both methods have the ability to obtain test results that are directly proportional to the concentration of analyte in the sample within the selected range of 1.0–10 μg/ml for everolimus, with a coefficient of correlation (r2) value of >0.998 and standard deviation of the residuals (Syx) of <2%. The individual recoveries of everolimus ranged from 97 to 104% for the UV-Vis spectrophotometric method and from 98 to 102 for the HPLC method, respectively. The 95% CI of the mean recovery for the UV-Vis spectrophotometric method was 99–102% and for the HPLC method was 99–101%. No statistical difference was found between the mean recoveries of the methods (p = 0.42). Hence the methods are free from interference due to Triton and other chemicals present in the dissolution medium. The variation in the amount of everolimus estimated by UV-Vis spectrophotometric and HPLC methods was ≤3.5%, and the drug release profiles obtained by both methods were found to be equivalent by evaluation with two-one-sided t-test (two-tailed, p = 0.62; mean of differences, 0.17; 95% CI, 0.62–0.96) and similarity factor f2 (f2 value, 87). The excellent conformity of the results makes UV-Vis spectrophotometer an ideal tool for analyzing the drugs in the media containing surfactants, after SPE. The 96-well SPE plates in combination with UV-Vis microplate reader provide a high throughput method for the determination of in-vitro drug release profile of DES. Switching from HPLC to UV-Vis spectrophotometer microplate reader assay reduces the solvent consumption and labor required for the sample analyses. This directly impacts the profitability of the laboratory.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สูงผ่าน 96 หลุมสกัดสารในเฟสของแข็ง (SPE) แผ่นด้วย C-18 ย้อนกลับไปขั้นตอนการดูดซับตามด้วยยูวีที่มองเห็นได้ (UV-Vis) อ่าน microplate ถูกนำไปใช้กับการวิเคราะห์ของยาเสพติดที่ไม่ชอบน้ำในลดแรงตึงผิวที่มีสื่อการสลายตัวซึ่งมักจะ ใช้ในการประเมินการปลดปล่อยตัวยาในหลอดทดลองของขดลวดเคลือบยาเสพติด (DES) everolimus และการละลายกลางมี Triton X-405 ได้รับการคัดเลือกเป็นตัวแทนและเงื่อนไขที่เหมาะสม SPE (การดูดซับการซักผ้าและชะ) ได้รับการตรวจสอบเพื่อให้ได้ตัวอย่างการปฏิบัติและเชื่อถือได้สะอาดขึ้น มันก็แสดงให้เห็นว่ามีการพัฒนาขั้นตอน SPE เป็นความสามารถในการลบองค์ประกอบรบกวน (Triton X-405 และสิ่งสกปรกของมัน) เพื่อให้ถูกต้องวิเคราะห์สเปกอัตโนมัติที่จะดำเนินการ เสนอ UV-Vis วิธีสเปกให้ผลเทียบเท่าเมื่อเทียบกับวิธีการวิเคราะห์ LC คลาสสิก การวิเคราะห์การถดถอยเชิงเส้นชี้ให้เห็นว่าทั้งสองวิธีมีความสามารถที่จะได้รับผลการทดสอบที่เป็นสัดส่วนโดยตรงกับความเข้มข้นของสารในกลุ่มตัวอย่างอยู่ในช่วงที่เลือกของ 1.0-10 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรสำหรับ everolimus ที่มีค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ (r2) มูลค่าของ > 0.998 และส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานของความคลาดเคลื่อน (SYX) ของ <2% กลับคืนบุคคลของ everolimus อยู่ในช่วง 97-104% สำหรับวิธี UV-Vis สเปกและ 98-102 สำหรับวิธี HPLC ตามลำดับ 95% ของการฟื้นตัวของค่าเฉลี่ยสำหรับ UV-Vis วิธีสเปกเป็น 99-102% และสำหรับวิธี HPLC เป็น 99-101% ไม่มีความแตกต่างทางสถิติก็พบว่าระหว่างกลับคืนเฉลี่ยของวิธีการ (p = 0.42) ดังนั้นวิธีการที่เป็นอิสระจากการแทรกแซงเนื่องจากไทรทันและสารเคมีอื่น ๆ ที่มีอยู่ในสื่อการสลายตัว การเปลี่ยนแปลงในปริมาณของ everolimus ประเมินโดยสเปก UV-Vis และวิธี HPLC เป็น≤3.5% และรูปแบบการปลดปล่อยตัวยาที่ได้รับจากทั้งสองวิธีพบว่ามีการประเมินผลโดยเทียบเท่ากับ 2-1 ด้าน t-test (สองเทลด์ p = 0.62; ค่าเฉลี่ยของความแตกต่าง, 0.17; 95% CI, 0.62-0.96) และ f2 ปัจจัยที่คล้ายคลึงกัน (ค่า f2, 87) ตามมาตรฐานที่ดีของผลทำให้ Spectrophotometer UV-Vis เครื่องมือที่เหมาะสำหรับการวิเคราะห์ยาเสพติดในสื่อที่มีแรงตึงผิวหลังจาก SPE แผ่น SPE 96 ดีในการรวมกันกับผู้อ่าน microplate UV-Vis ให้วิธีการส่งผ่านสูงสำหรับการกำหนดในหลอดทดลองรายละเอียดการปลดปล่อยตัวยาของ DES เปลี่ยนจาก HPLC เพื่อ Spectrophotometer UV-Vis ทดสอบอ่าน microplate ช่วยลดการใช้ตัวทำละลายและแรงงานที่จำเป็นสำหรับการวิเคราะห์ตัวอย่าง นี้ผลกระทบโดยตรงต่อการทำกำไรของห้องปฏิบัติการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อัตราความเร็วสูง 96 ดีของแข็งขั้นตอนการสกัด ( SPE ) แผ่นกลับเฟส - ดูดซับ UV ( UV Vis มองเห็นตาม ) อ่านพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยมีวัตถุประสงค์เพื่อการวิเคราะห์สารลดแรงตึงผิวที่มีการละลายของยา ) ในสื่อ ซึ่งมักจะใช้เพื่อประเมินการปลดปล่อยตัวยาในหลอดทดลองยา hexane ขดลวด ( DES )วอโรลิมัสและการละลายปานกลางประกอบด้วย ไทรทัน x-405 ได้รับเลือกเป็นผู้แทน และสภาวะที่เหมาะสมในการดูดซับสารการใช้ ) ศึกษาได้รับประโยชน์ และ เชื่อถือได้ เพื่อทำความสะอาด พบว่าสารพัฒนาขั้นตอนที่สามารถถอดชิ้นส่วน ( Triton x-405 รบกวนและสิ่งสกปรก )ให้ถูกต้องโดยอัตโนมัติ ) การวิเคราะห์เพื่อที่จะแสดง เสนอวิธียูวีวิสไบ ให้ผลเทียบเท่าผลเปรียบเทียบกับวิธีวิเคราะห์ LC คลาสสิกการวิเคราะห์การถดถอยเชิงเส้น พบว่า ทั้งสองวิธีมีความสามารถ เพื่อให้ได้ผลการทดสอบที่เป็นสัดส่วนโดยตรงกับความเข้มข้นของครูในการเลือกตัวอย่างในช่วง 1.0 – 10 μ g / ml วอโรลิมัส ด้วยค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ ( R ) ค่า > 0.998 และส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานของความคลาดเคลื่อน ( SYX ) < 2 %กลับคืนแต่ละวอโรลิมัสอยู่ระหว่าง 97 ถึง 104% สำหรับ UV VIS ) และวิธีการจาก 98 102 สำหรับ HPLC วิธีตามลำดับ 95% CI ของหมายถึงการกู้คืนสำหรับ UV VIS ) วิธีการคือ 99 – 102 ล้านบาท และสำหรับวิธี HPLC 99 – 101 % ไม่มีความแตกต่างกันทางสถิติพบว่า ค่าเฉลี่ยต่ำสุดของวิธีการ ( P = 0.42 )ดังนั้นวิธีที่ปลอดจากการแทรกแซงจาก Triton และสารเคมีอื่น ๆที่มีอยู่ในการละลายปานกลาง การเปลี่ยนแปลงในปริมาณของวอโรลิมัส ( UV VIS ) และเทคนิควิธีการ≤ 3.5% และการปลดปล่อยตัวยาโพรไฟล์ได้โดยทั้งสองวิธี พบว่ามีการประเมินผลเทียบเท่ากับสองข้างเดียว ( สองหาง ) , P = 0.62 ; หมายถึงความแตกต่าง , 0.17 ;95% CI , 0.62 – 0.96 ) และปัจจัย ( F2 F2 กันค่า : ) ความสอดคล้องที่ดีของผลทำให้ UV VIS Spectrophotometer เป็นเครื่องมือที่เหมาะสำหรับการวิเคราะห์ยาในสื่อที่ประกอบด้วยสารลดแรงตึงผิว หลังจากเอสพีอี . 96 ก็ใช้จานร่วมกับ UV VIS พื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยอ่านให้วิธีการส่งผ่านสูงสำหรับการหาปริมาณการปลดปล่อยตัวยาในหลอดทดลองโปรไฟล์ของเดสเปลี่ยนจาก HPLC UV Vis เครื่องอ่านในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย ลดการใช้ตัวทำละลาย และแรงงานที่ใช้วิเคราะห์ข้อมูล นี้โดยตรงต่อความสามารถของห้องปฏิบัติการ