2.10. Membrane potential measuremen

2.10. Membrane potential measurements
All the electrophysiological measurements were performed on
intact primary roots in cells 1e2 cm from the tip. The UC82 and RO
tomato seedlings (7 days old) were placed in a Plexiglass chamber
and perfused with a basic buffer solution containing 5 mM MES,
0.5 mM CaCl2 and 0.05 mM KCl, adjusted to pH 6.0 with NaOH (Fan
et al., 2007), before performing the electrode impalement of primary
roots as described previously (Miller et al., 2001). The seedlings
were grown in a hydroponic nutrient solution with no added
N (see above). Membrane electrical potentials were measured with
glass single-barreled microelectrodes back-filled with 200 mM KCl
using a 70 mm long Microfil needle (WorldPrecision Instruments
Inc., Stevenage, UK). The reference salt bridge was filled with
200 mM KCl in 2% (w/v) agar and was placed in the perfusion
chamber close to the root. The cell impalements were made into
mature epidermal cells, 1e2 cm from the root tip. The potential
difference (mV) between the inside of the cell and external bathing
solution was then recorded on a pc as described previously (Fan
et al., 2007). During each cell measurement the perfusion solution
was changed to solution containing the same MES, Kþ and Caþ
concentrations and 0.1 mM NO3

as Ca(NO3)2 to assay for NO3


transport activity (Miller et al., 2001). The pH was maintained to 6.0
and in order to keep the same Ca2þ concentration as the basic buffer solution, CaCl2 was added in the treatment buffer solution to
reach 0.4 mM.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.10. การวัดศักยภาพเมมเบรนการวัด electrophysiological ได้ดำเนินการในรากหลักเหมือนเดิมในเซลล์ 1e2 ซม.จากปลาย UC82 และ ROต้นกล้ามะเขือเทศ (อายุ 7 วัน) ถูกวางไว้ในห้องลูกแก้วและเนื้อสารละลายบัฟเฟอร์พื้นฐานประกอบด้วย 5 มม. MES0.5 mM CaCl2 และ 0.05 mM KCl ปรับค่า pH 6.0 กับ NaOH (พัดลมet al. 2007), ก่อนทำการ impalement ไฟฟ้าของหลักรากตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (มิลเลอร์ et al. 2001) ต้นกล้าที่ปลูกในสารละลาย hydroponic มีกับไม่มีN (ดูข้างต้น) เมมเบรนไฟฟ้าศักยภาพถูกวัดด้วยแก้วเดียวปากกระบอก microelectrodes เติมเต็มกับ 200 mM KClใช้ 70 มม.ยาว Microfil เข็ม (เครื่องมือ WorldPrecisionอิงค์ สตีเวนเนจ สหราชอาณาจักร) การอ้างอิงที่เต็มไปด้วยสะพานเกลือ200 mM KCl ในวุ้น 2% (w/v) และได้วางในการกำซาบหอการค้าใกล้ราก Impalements เซลล์ถูกทำให้เป็นผู้ใหญ่ผิวหนังเซลล์ 1e2 ซม.จากปลายราก ศักยภาพความแตกต่างระหว่างภายในเซลล์และภายนอกอาบ (mV)แก้ปัญหาแล้วบันทึกบนพีซีตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (พัดลมet al. 2007) ในระหว่างการวัดแต่ละเซลล์โซลูชันกำซาบเปลี่ยนเป็นโซลูชันที่ประกอบด้วยเดียวกัน MES, Kþ และ Caþความเข้มข้นและ 0.1 mM NO3เป็น Ca (NO3) 2 กับ assay สำหรับ NO3
กิจกรรม (มิลเลอร์ et al. 2001) การขนส่ง คือรักษาค่า pH 6.0และเพื่อให้ความเข้มข้น Ca2þ เดียวกันเป็นการแก้ปัญหาพื้นฐานบัฟเฟอร์ CaCl2 ถูกเพิ่มลงในโซลูชันบัฟเฟอร์การรักษาไปถึง 0.4 มม.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.10 เมมเบรนวัดศักยภาพ
ทั้งหมดวัด electrophysiological ได้ดำเนินการใน
รากหลักเหมือนเดิมในเซลล์ 1e2 ซม. จากปลาย UC82 และ RO
ต้นกล้ามะเขือเทศ (7 วัน) ถูกวางไว้ในห้อง Plexiglass
และหลอดเลือดด้วยสารละลายบัฟเฟอร์ขั้นพื้นฐานที่มี 5 มิลลิ MES,
0.5 มิลลิ CaCl2 และ 0.05 มิลลิ KCl ปรับค่าพีเอช 6.0 ด้วย NaOH (Fan
et al., 2007 ) ก่อนที่จะดำเนินการ impalement อิเล็กโทรดของหลัก
รากตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (มิลเลอร์ et al., 2001) ต้นกล้า
ที่ปลูกในสารละลายธาตุอาหารพืชไฮโดรโปนิกับไม่มีการเพิ่ม
N (ดูด้านบน) ศักยภาพไฟฟ้าเมมเบรนถูกวัดด้วย
แก้ว microelectrodes เดียวลำกล้องกลับเต็มไปด้วย 200 มิลลิ KCl
ใช้ 70 มม Microfil ยาวเข็ม (WorldPrecision เครื่องดนตรี
อิงค์สตีสหราชอาณาจักร) สะพานเกลืออ้างอิงก็เต็มไปด้วย
200 มิลลิ KCl 2% (w / v) วุ้นและถูกวางไว้ในปะ
ห้องใกล้กับราก impalements มือถือที่ได้ทำลงไปใน
เซลล์ผิวหนังผู้ใหญ่ 1e2 ซม. จากปลายราก ที่มีศักยภาพ
ที่แตกต่างกัน (mV) ระหว่างภายในเซลล์และภายนอกการอาบน้ำที่
แก้ปัญหาที่ถูกบันทึกไว้แล้วในเครื่องคอมพิวเตอร์ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Fan
et al., 2007) ในช่วงการวัดแต่ละเซลล์แก้ปัญหาปะ
ได้เปลี่ยนไปเป็นวิธีการแก้ปัญหาที่มี MES เดียวกัน KTH และ Cath
ความเข้มข้นและ 0.1 มิลลิ NO3
? เป็น Ca (NO3) 2 เพื่อตรวจหา NO3
?
กิจกรรมการขนส่ง (มิลเลอร์ et al., 2001) ค่า pH ที่ถูกเก็บรักษาไว้ถึง 6.0
และเพื่อให้ความเข้มข้นCa2þเช่นเดียวกับสารละลายบัฟเฟอร์พื้นฐาน CaCl2 ถูกเพิ่มเข้ามาในสารละลายบัฟเฟอร์การรักษาที่จะ
ถึง 0.4 มิลลิ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.10 . เมมเบรนศักยภาพวัดการศึกษาการวัดจำนวนทั้งหมดยังคงหลักรากในเซลล์ 1e2 ซม. จากปลาย และที่ uc82 โรต้นกล้ามะเขือเทศ ( 7 วัน ) อยู่ในหอลูกแก้วหนูมีพื้นฐาน สารละลายบัฟเฟอร์ที่ประกอบด้วย 5 เดือนค่ะ0.5 มม. ผลิตโพแทสเซียม 0.05 มม. ปรับ pH ด้วย NaOH ( พัดลมet al . , 2007 ) ก่อนการ impalement หลักของขั้วไฟฟ้ารากตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( มิลเลอร์ et al . , 2001 ) ต้นกล้าที่ปลูกในสารละลายธาตุอาหารไฮโดรโพนิกส์กับไม่เติม( ดูด้านบน ) เป็นวัดที่มีศักย์ไฟฟ้าเมมเบรนแก้วเดียว Barreled microelectrodes กลับเต็มไปด้วย 200 mm .ใช้ 70 มม. ยาวด้าน worldprecision เข็ม ( เครื่องมืออิงค์ , Stevenage , สหราชอาณาจักร ) การอ้างอิงสะพานเกลือ เปี่ยม ด้วย200 mm . 2 % ( w / v ) วุ้นและถูกวางในแคนาดาห้องใกล้ราก เซลล์ impalements ขึ้นลงเป็นเนื้อเยื่อชั้นผิว 1e2 ซม. จากปลายรากฟัน . ศักยภาพความแตกต่าง ( MV ) ระหว่างภายในและภายนอกเซลล์ อาบน้ำโซลูชั่นที่ถูกบันทึกไว้ในเครื่องคอมพิวเตอร์ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( พัดลมet al . , 2007 ) ในการวัดแต่ละเซลล์ผ่านโซลูชั่นเปลี่ยนเป็นโซลูชั่นที่มีเดือนเดียวกัน และþ K þประเทศสหรัฐอเมริกาความเข้มข้น 0.1 มม. 3เป็น CA ( 3 ) 2 ใน 3 สำหรับกิจกรรมการขนส่ง ( มิลเลอร์ et al . , 2001 ) พีเอช 6.0 เป็นรักษาและเพื่อที่จะให้เหมือนกันþความเข้มข้นของแคลเซียมเป็นโซลูชั่นที่บัฟเฟอร์ขั้นพื้นฐาน ผลิตเพิ่มในสารละลายบัฟเฟอร์เพื่อรักษาถึง 0.4 มม.