The solution was applied to a Hipre

The solution was applied to a Hiprep DEAE FF column
(1 ml) pre-equilibrated with 20 mM Tris–HCl buffer (pH 7.5),
The unbound proteins from the column were removed by washing
with the same buffer at a flow rate of 1 ml/min. Proteins bound
to the column were eluted with 20 ml 20 mM Tris–HCl buffer (pH
7.5) containing 0–1 M NaCl at the same flow rate, and fractions
of 2.0 ml were collected with online monitoring of protein elution
at 280 nm. Each fraction was assayed for -amylase activity and
fractions with enzyme activity were pooled. The pooled solution
was condensed by freeze-drying, then dissolved in 20 mM Tris–HCl
buffer (pH 7.5). A 0.5 ml aliquot of the solution was loaded onto a
superdex 75 10/300 GL (GE Healthcare) gel filtration column equilibrated
with 20 mM Tris–HCl buffer (pH 7.5) and eluted with the
same buffer at a flow rate of 0.5 ml/min.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การแก้ปัญหาถูกประยุกต์ใช้คอลัมน์ Hiprep DEAE FF(1 มล.) ก่อน equilibrated มี 20 มม.ตรี – HCl บัฟเฟอร์ (pH 7.5),โปรตีนที่ผูกจากคอลัมน์ถูกลบ โดยการซักผ้าผูกกับบัฟเฟอร์เดียวที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร/นาทีของ โปรตีนคอลัมน์ถูก eluted กับ 20 ml 20 มม.ตรี – HCl บัฟเฟอร์ (pH7.5) ประกอบด้วย 0 – 1 M NaCl ที่เหมือนไหลอัตรา และเศษส่วนของ 2.0 ml ถูกรวบรวมไว้กับการตรวจสอบโปรตีน elution ออนไลน์ที่ 280 nm ทุกฝ่ายมี assayed สำหรับ - amylase กิจกรรม และส่วนเอนไซม์ถูกทางถูกพู การแก้ปัญหารวมถูกบีบ โดยขั้น แล้ว ละลายใน 20 มม.ตรี – HClบัฟเฟอร์ (pH 7.5) ส่วนลงตัว 0.5 ml ของโซลูชันถูกโหลดไปsuperdex 75 10/300 GL (GE สุขภาพ) เจกรองคอลัมน์ equilibratedมี 20 มม.ตรี – HCl บัฟเฟอร์ (pH 7.5) และ eluted ด้วยการบัฟเฟอร์เดียวที่อัตราการไหล 0.5 ml/นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธีการแก้ปัญหาที่ถูกนำไปใช้กับคอลัมน์ Hiprep DEAE FF
(1 มิลลิลิตร) ก่อน equilibrated กับ 20 มมบัฟเฟอร์ Tris-HCl (pH 7.5),
โปรตีนไม่ได้ผูกไว้จากคอลัมน์ถูกถอดออกโดยการล้าง
ด้วยบัฟเฟอร์แบบเดิมที่อัตราการไหลของ 1 มิลลิลิตร / นาที โปรตีนที่ถูกผูกไว้
กับคอลัมน์ถูกชะ 20 มล 20 มิลลิเมตรบัฟเฟอร์ Tris-HCl (pH
7.5) ที่มี 0-1 M NaCl ที่อัตราการไหลเดียวกันและเศษส่วน
2.0 มลถูกเก็บรวบรวมด้วยการตรวจสอบออนไลน์ชะโปรตีน
ที่ 280 นาโนเมตร ส่วนแต่ละคนได้รับการวิเคราะห์หรือไม่? กิจกรรม -amylase และ
เศษส่วนที่มีกิจกรรมของเอนไซม์ที่ได้รวบรวม วิธีการแก้ปัญหา pooled
ถูกควบแน่นโดยแช่แข็งแห้งละลายแล้วในวันที่ 20 มิลลิ Tris-HCl
บัฟเฟอร์ (pH 7.5) 0.5 มลลงตัวของการแก้ปัญหาที่ถูกโหลดลง
Superdex 75 10/300 GL (GE Healthcare) คอลัมน์กรอง equilibrated เจล
ที่มี 20 มิลลิบัฟเฟอร์ Tris-HCl (pH 7.5) และชะกับ
บัฟเฟอร์แบบเดิมที่อัตราการไหล 0.5 มิลลิลิตร / นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สารละลายที่ใช้กับ FF hiprep ทำคอลัมน์
( 1 มิลลิลิตร ) ก่อน equilibrated 20 มม. โดย– HCl บัฟเฟอร์ pH 7.5 ) ,
จับกับโปรตีนจากคอลัมน์ถูกถอดออกซัก
กับบัฟเฟอร์เดียวกันที่อัตราการไหล 1 มิลลิลิตร / นาที โปรตีนผูกพัน
ไปยังคอลัมน์ตัวอย่าง 20 คือ มม. โดย– HCl บัฟเฟอร์ 20 ml ( M
7.5 ) ความเข้มข้น 0 – 1 M NaCl ที่อัตราการไหลเท่ากัน เศษส่วน
20 มล วัตถุประสงค์การตรวจสอบออนไลน์ของโปรตีน (
ที่ 280 nm . แต่ละส่วนซีรั่มสำหรับ  - อะไมเลสและกิจกรรม
เศษส่วนที่มีเอนไซม์ถูกรวม . รวมโซลูชั่น
ถูกย่อโดยการทำแห้งเยือกแข็งแล้วละลายใน 20 มม. โดย– HCl
บัฟเฟอร์ pH 7.5 ) 0.5 ml ส่วนลงตัวของสารละลายที่โหลดลง
superdex 75 10 / 300 GL ( GE Healthcare ) คอลัมน์เจลฟิลเตร equilibrated
กับ 20 มม. โดย– HCl บัฟเฟอร์ pH 7.5 ) และตัวอย่างกับ
บัฟเฟอร์เดียวกันในอัตรา 0.5 มิลลิลิตร / นาที