2. Materials and methods2.1. Materi

2. Materials and methods
2.1. Materials
2.1.1. Plant materials
Dried plant materials of chamomile (flower), dandelion (leaves),
marigold (flower) and yarrow (flower + leaves) were purchased
from a specialized herbal store (Suban d.o.o., Zagreb, Croatia). All
plant materials were collected in the north-western part of Croatia
during the flowering seasons of 2015 for each plant, dried and
properly stored until used. Dry matter content of plant materials
wasdeterminedby oven-drying at 105 ◦C, according to the standard
AOAC method (AOAC 1990).
2.1.2. Chemicals and reagents
Folin-Ciocalteu’s reagent and sodium carbonate were purchased
from Kemika (Zagreb, Croatia). Trolox (6-hydroxy-2,5,7,8-tetra
methylchromane-2-carboxylic acid) and potassium peroxodisulphate
were obtained from Fluka (Buchs, Switzer land).ABTS•+ (2,2
-
azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid)diammonium
salt), gallic acid (3,4,5-trihydroxybenzoic acid) were obtained from
Aldrich (Sigma–Aldrich Chemie, Steinheim, Germany), and ethanol
(96%) was obtained from Carlo Erba Reagents (Cornaredo, Italy).
2.2. Methods
2.2.1. Extraction procedure
An amount of 30 g of dry plant material was placed in a 2000 mL
glass with 1500 mL of deionised water and heated to a specific temperature
(T = 40, 60, 80 ◦C ± 0.5 ◦C) using Ika HBR4 digital oil-bath
(IKA-Werk GmbH & Co.KG, Staufen, Germany). Selected temperatures
and extraction conditions were chosen based on a preliminary
experiment (data not shown) designed to test the influence of 4
major parameters on the extraction yield: temperature (40, 60
and 80 ◦C), particle size of the plant material (less than 100 m,
280–450 m and 3000–4000 m), duration of the extraction process
(30, 60 and 90 min) and magnetic stirrer rotational speed
(250, 500 and 750 rpm). The preliminary experiment was conducted
based on Taguchi orthogonal array design which included
9 runs (4 factors at three tested levels). From that set of preliminary
experiments, parameters resulting in the highest extraction
yield were chosen for the further kinetic experiment: plant material
particle size in 3000–4000 m range, 500 rpm and 90 min as
the extraction duration time (as stated in the manuscript). These
parameters were then kept constant in the kinetic trials. Since the
data from preliminary experiment showed the highest influence of
the extractiontemperature onthe yield,it wasdecidedtousedifferent
temperatures for the kinetic study to determine in which part
of the extraction process the highest amount of antioxidants can be
extracted from plant material. In this way, it was also possible to
see whether the extraction process can be shortened to conserve
time and energy. In the kinetic experiment, sampling was carried
out at regular time intervals (0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20,
25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90 min). Samples were immediately
cooled in the water-ice mixture, then filtered through a 100%
cellulose paper filter (LLG Labware, Meckenheim, Germany) with
5–13 mpore size and stored at 4 ◦Cuntil analysed.All experiments
were carried out in triplicate and the average values are reported
(at 95% confidence interval results have no statistical difference).
2.2

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. วัสดุ2.1.1. พืชวัสดุโรงงานอบแห้งวัสดุคาโมไมล์ (ดอกไม้), แบบดอกแดนดิไล (ใบ),ซื้อดาวเรือง (ดอกไม้) และ yarrow (ดอกไม้ + ใบไม้)จากสมุนไพรเฉพาะเก็บ (สุบรรณร้อง ซาเกร็บ โครเอเชีย) ทั้งหมดวัสดุโรงงานที่ถูกเก็บรวบรวมในส่วนภาคตะวันตกของประเทศโครเอเชียในช่วงฤดูดอกไม้บานปี 2558 สำหรับพืชแต่ละชนิด แห้ง และถูกเก็บไว้จนกว่าจะใช้ เนื้อหาแห้งวัสดุโรงงานwasdeterminedby เตาอบแห้งที่ 105 ◦C ตามมาตรฐานวิธี AOAC (AOAC 1990)2.1.2. สารเคมีและตัวทำปฏิกิริยาซื้อโซเดียมคาร์บอเนตและเอเจนต์ท่อง-Ciocalteuจาก Kemika (ซาเกร็บ โครเอเชีย) Trolox (6-ไฮดร็อกซี่-2,5,7,8-tetraกรด methylchromane 2 carboxylic) และโพแทสเซียม peroxodisulphateได้รับจาก Fluka (Buchs สวิทเซอร์แลนด์) ABTS• + (2.2-diammonium azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid)เกลือ), กรด gallic (กรด 3,4,5-trihydroxybenzoic) ได้รับจากAldrich (Chemie Sigma-Aldrich, Steinheim เยอรมนี), และเอทานอล(96%) มาจาก Carlo Erba Reagents (Cornaredo อิตาลี)2.2. วิธี2.2.1. ขั้นตอนการสกัดจำนวน 30 กรัมของวัสดุจากพืชแห้งอยู่ในเครื่อง 2000 mLแก้วกับ 1500 มล. deionised น้ำ และอุ่นอุณหภูมิเฉพาะ(T = 40, 60, 80 ◦C ± 0.5 ◦C) ใช้ Ika HBR4 ดิจิตอลอ่างน้ำมัน(IKA-Werk GmbH & Co.KG, Staufen เยอรมนี) เลือกอุณหภูมิและสกัดเงื่อนไขถูกเลือกตามตัวการทดลอง (ไม่แสดงข้อมูล) ออกแบบมาเพื่อทดสอบอิทธิพลของ 4พารามิเตอร์ในผลสกัดที่สำคัญ: อุณหภูมิ (40, 60และ 80 ◦C), ขนาดอนุภาคของวัสดุโรงงาน (น้อยกว่า 100 m280-450 เมตรและ 3000 – 4000 เมตร), ระยะเวลาของกระบวนการแยก(30, 60 และ 90 นาที) และความเร็วหมุนช้อนคนแม่เหล็ก(250, 500 และ 750 รอบต่อนาที) ดำเนินการทดลองเบื้องต้นออกแบบเรย์ Taguchi ซึ่งรวม9 ทำงาน (ปัจจัย 4 ที่ผ่านการทดสอบ 3 ระดับ) จากที่เบื้องต้นการทดลอง พารามิเตอร์ในการสกัดสูงผลตอบแทนที่ถูกเลือกสำหรับการทดลองเคลื่อนไหวเพิ่มเติม: พืชวัสดุขนาดอนุภาคในช่วง 3000-4000 เมตร 500 รอบต่อนาที และ 90 นาทีเป็นแยกระยะเวลา (ตามที่ระบุไว้ในต้นฉบับ) เหล่านี้พารามิเตอร์ถูกเก็บคงที่ในการทดลองเคลื่อนไหว เนื่องจากการข้อมูลจากการทดลองเบื้องต้นพบว่าอิทธิพลสูงสุดของextractiontemperature บนผลผลิต มัน wasdecidedtousedifferentอุณหภูมิสำหรับการศึกษาการเคลื่อนไหวเพื่อตรวจสอบในส่วนใดกระบวนการสกัด สามารถเป็นยอดเงินสูงสุดของสารต้านอนุมูลอิสระสกัดจากพืชวัสดุ ในวิธีนี้ ก็ยังได้เห็นว่า กระบวนการสกัดสามารถให้สั้นลงเพื่อประหยัดเวลาและพลังงาน ดำเนินการสุ่มตัวอย่างในการทดลองเคลื่อนไหวออกในช่วงเวลาปกติ (0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 2025, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90 นาที) ตัวอย่างได้ทันทีระบายความร้อนด้วยส่วนผสมน้ำแข็ง กรองแล้ว ผ่าน 100%เซลลูโลสกระดาษกรอง (LLG Labware, Meckenheim เยอรมนี)5 – 13 mpore ขนาด และเก็บไว้ที่ 4 ◦Cuntil วิเคราะห์ การทดลองทั้งหมดดำเนินการในลข้อและโดยเฉลี่ยมีรายงานค่า(ที่ช่วงความเชื่อมั่น 95% ผลลัพธ์ที่ได้ไม่แตกต่างกันทางสถิติ)2.2

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 วัสดุ
2.1.1 วัสดุพืช
แห้งวัสดุพืชดอกคาโมไมล์ (ดอกไม้) ดอกแดนดิไล (ใบ),
ดอกดาวเรือง (ดอกไม้) และยาร์โรว์ (ดอกไม้ + ใบ) ที่ซื้อมา
จากร้านค้าสมุนไพรพิเศษ (สุบรรณ DOO ซาเกร็บ, โครเอเชีย) ทั้งหมด
วัสดุพืชถูกเก็บไว้ในส่วนตะวันตกเฉียงเหนือของประเทศโครเอเชีย
ในช่วงฤดูออกดอกปี 2015 สำหรับพืชแต่ละชนิดแห้งและ
เก็บไว้จนกว่าจะใช้อย่างถูกต้อง เนื้อหาแห้งของวัสดุพืช
wasdeterminedby เตาอบแห้งที่ 105 ◦Cตามมาตรฐาน
AOAC วิธี (AOAC 1990).
2.1.2 สารเคมีและสารเคมี
Folin-Ciocalteu ของน้ำยาและโซเดียมคาร์บอเนตกำลังซื้อ
จาก Kemika (ซาเกร็บ, โครเอเชีย) Trolox (6 ไฮดรอกซี-2,5,7,8-Tetra
methylchromane-2-คาร์บอกซิ Acid) และโพแทสเซียม peroxodisulphate
ที่ได้รับจาก Fluka (Buchs, สวิตเซอร์ที่ดิน) .ABTS • + (2,2?
-
azino-Bis (3 กรด -ethylbenzothiazoline-6-sulphonic) diammonium
เกลือ), ฝรั่งเศสกรด (กรด 3,4,5-trihydroxybenzoic) ที่ได้รับจาก
ดิช (Sigma-Aldrich ย์ Steinheim เยอรมนี) และเอทานอล
(96%) ที่ได้รับจาก Carlo Erba รีเอเจนต์ (Cornaredo, อิตาลี).
2.2 วิธีการ
2.2.1 ขั้นตอนการสกัด
ในปริมาณ 30 กรัมของวัสดุจากพืชแห้งวางอยู่ในมล 2,000
แก้วที่มี 1,500 มิลลิลิตรของน้ำ deionised และให้ความร้อนที่อุณหภูมิที่เฉพาะเจาะจง
(T = 40, 60, 80 ◦C± 0.5 ◦C) โดยใช้น้ำมันดิจิตอล Ika HBR4 -bath
(IKA-Werk GmbH & Co.KG, Staufen, เยอรมนี) อุณหภูมิที่เลือก
และเงื่อนไขที่สกัดได้รับการแต่งตั้งขึ้นอยู่กับการศึกษาเบื้องต้น
การทดลอง (ไม่ได้แสดงข้อมูล) ออกแบบมาเพื่อทดสอบอิทธิพลของ 4
พารามิเตอร์ที่สำคัญต่อผลผลิตสกัดอุณหภูมิ (40, 60
และ 80 ◦C) ขนาดอนุภาคของวัสดุปลูก (น้อย กว่า 100 เมตร
280-450 เมตรและ 3,000-4,000 เมตร) ระยะเวลาของกระบวนการสกัด
(30, 60 และ 90 นาที) และ stirrer แม่เหล็กความเร็วในการหมุน
(250, 500 และ 750 รอบต่อนาที) การทดลองเบื้องต้นได้ดำเนินการ
บนพื้นฐานของการออกแบบ Taguchi อาร์เรย์มุมฉากซึ่งรวมถึง
9 วิ่ง (4 ปัจจัยที่สามระดับการทดสอบ) จากชุดของเบื้องต้นว่า
การทดลองพารามิเตอร์ที่มีผลในการสกัดสูงสุด
อัตราผลตอบแทนที่ได้รับเลือกสำหรับการเคลื่อนไหวต่อไปทดสอบ: โรงงานวัสดุ
ขนาดอนุภาคอยู่ในช่วง 3000-4000 ม., 500 รอบต่อนาทีและ 90 นาทีเป็น
เวลาระยะเวลาการสกัด (ตามที่ระบุไว้ในต้นฉบับ) . เหล่านี้
พารามิเตอร์ที่ถูกเก็บไว้แล้วอย่างต่อเนื่องในการทดลองเกี่ยวกับการเคลื่อนไหว เนื่องจาก
ข้อมูลที่ได้จากการทดลองเบื้องต้นแสดงให้เห็นอิทธิพลสูงสุดของ
extractiontemperature onthe ผลผลิตมัน wasdecidedtousedifferent
อุณหภูมิสำหรับการศึกษาเกี่ยวกับการเคลื่อนไหวเพื่อตรวจสอบในซึ่งเป็นส่วนหนึ่ง
ของกระบวนการสกัดในปริมาณสูงสุดของสารต้านอนุมูลอิสระที่สามารถ
สกัดได้จากพืช ด้วยวิธีนี้มันก็เป็นไปได้ที่จะ
ดูว่ากระบวนการสกัดจะสั้นลงเพื่อประหยัด
เวลาและพลังงาน ในการทดลองเกี่ยวกับการเคลื่อนไหวการสุ่มตัวอย่างได้ดำเนินการ
ออกมาในช่วงเวลาปกติ (0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20,
25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90 นาที) ตัวอย่างทันที
ระบายความร้อนในน้ำผสมน้ำแข็งที่กรองแล้วผ่าน 100%
กระดาษกรองเซลลูโลส (LLG Labware, Meckenheim, เยอรมนี) ที่มี
ขนาด 5-13 mpore และเก็บไว้ที่ 4 การทดลอง◦Cuntil analysed.All
ได้ดำเนินการในการเพิ่มขึ้นสามเท่าและ ค่าเฉลี่ยจะมีการรายงาน
(ที่ 95% เชื่อมั่นผลการช่วงเวลาที่มีไม่แตกต่างกันทางสถิติ).
2.2

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ2.1 . วัสดุ2.1.1 . วัสดุพืชวัสดุพืชแห้งดอกไม้ดอกคาโมไมล์ , ดอกแดนดิไลอัน ( ใบ )ดาวเรือง ( ดอกไม้ ) และโรว์ ( ใบดอก + ) ซื้อจากผู้เชี่ยวชาญสมุนไพรร้าน ( สุบรรณถือ Zagreb , โครเอเชีย ) ทั้งหมดการเก็บรวบรวมพืชในส่วนตะวันตกเฉียงเหนือของโครเอเชียในช่วงออกดอกฤดูกาล 2015 สำหรับพืชแต่ละชนิด แห้ง และถูกเก็บไว้จนกว่าจะใช้ ปริมาณน้ำหนักแห้งของวัสดุพืชwasdeterminedby เตาอบแห้งที่ 105 ◦ C ตามมาตรฐานวิธีโปรตีน ( โปรตีน 1990 )2.1.2 . เคมีและสารเคมีเป็น folin ciocalteu รีเอเจนต์และโซเดียมคาร์บอเนตถูกซื้อจาก kemika ( ซาเกร็บ , โครเอเชีย ) ( 6-hydroxy-2,5,7,8-tetra สารmethylchromane-2-carboxylic acid ) และโพแทสเซียม peroxodisulphateได้จาก fluka ( buchs สวิตเซอร์แลนด์ , Abbr - + ( 2 , 2 )-azino ทวิ ( 3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid ) diammoniumเกลือ ) , ฝรั่งเศส ( 3,4,5-trihydroxybenzoic กรดกรด ) ที่ได้รับจากอัลดริช ( Sigma ) steinheim chemie ดิช , เยอรมัน ) , และ เอทานอล( 96 ) คาร์โล มาได้จากสารเคมี ( กอร์นาเรโด , อิตาลี )2.2 . วิธีการ2.2.1 . ขั้นตอนการสกัดปริมาณ 30 กรัมของวัสดุพืชแห้งอยู่ใน 2000 มล.แก้วกับ 1500 มิลลิลิตรของน้ำและ deionised อุ่นให้อุณหภูมิที่เฉพาะเจาะจง( t = 40 , 60 , 80 ◦ C ± 0.5 ◦ C ) ใช้น้ำมัน hbr4 Ika ดิจิตอล( GmbH Ika เวิร์ก & co.kg Staufen , เยอรมนี ) เลือกอุณหภูมิและเงื่อนไขการสกัดถูกเลือกบนพื้นฐานเบื้องต้นการทดลอง ( ข้อมูลไม่แสดง ) ที่ออกแบบมาเพื่อทดสอบอิทธิพลของ 4พารามิเตอร์ที่สำคัญในการสกัดอุณหภูมิ ( 40 , 60และ 80 ◦ C ) ขนาดอนุภาคของวัสดุพืช ( น้อยกว่า 100 เมตร280 - 450 เมตร และ 3000 – 4000 เมตร ) , ระยะเวลาของกระบวนการสกัด( 30 , 60 และ 90 นาที ) และความเร็วในการหมุนแม่เหล็ก stirrer( 250 , 500 และ 750 รอบต่อนาที ) การทดลองเบื้องต้นได้แก่ขึ้นอยู่กับการออกแบบซึ่งรวมอาร์เรย์เชิงตั้งฉาก ทากุจิ9 วิ่ง ( 4 องค์ประกอบที่ 3 ทดสอบระดับ ) จากชุดของเบื้องต้นการทดลอง , พารามิเตอร์เป็นผลในการสกัดสูงสุดผลผลิตที่ถูกเลือกสำหรับการทดลองจลนศาสตร์เพิ่มเติม : วัสดุพืชขนาดอนุภาคอยู่ในช่วง 3000 – 4000 เมตร , 500 รอบต่อนาทีและ 90 นาทีเป็นการสกัดเวลา ( ตามที่ระบุในต้นฉบับ ) เหล่านี้พารามิเตอร์แล้วคงที่ในการทดลองทางจลนศาสตร์ ตั้งแต่ข้อมูลที่ได้จากการทดลองเบื้องต้นพบว่าสูงสุด อิทธิพล ของการ extractiontemperature มัน wasdecidedtousedifferent ต่อผลผลิตอุณหภูมิสำหรับศึกษาจลนศาสตร์เพื่อตรวจสอบในส่วนไหนของกระบวนการสกัดปริมาณสูงสุดของสารต้านอนุมูลอิสระ สามารถวัสดุที่สกัดจากพืช ในวิธีนี้ , มันก็ยังเป็นไปได้ที่จะดูว่าขั้นตอนการสกัดสามารถย่อลงเพื่อการอนุรักษ์เวลาและพลังงาน ในการทดลองที่ 2 ทำการจลน์ออกในช่วงเวลาปกติ ( 0.5 , 1 , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 15 , 20 ,25 , 30 , 35 , 40 , 45 , 50 , 55 , 60 , 70 , 80 , 90 นาที ) จำนวนทันทีลงในส่วนผสมน้ำ น้ำแข็ง แล้วกรองผ่าน 100 %กระดาษกรองเซลลูโลส ( LLG Labware Meckenheim , เยอรมนี ) กับ5 – 13 mpore ขนาดและเก็บไว้ที่ 4 ◦ cuntil การทดลองมาวิเคราะห์ทดลองทั้งสามใบและค่าเฉลี่ยที่รายงาน( ช่วงความเชื่อมั่น 95% ผลที่ได้ไม่มีความแตกต่างกันทางสถิติ )2.2