Mitogen-activated protein kinase phosphorylation
assay. Cells were lysed in RIPA lysis buffer (1% Triton
X-100, 1% sodium deoxycholate, 0.1% SDS, 158 mM
NaCl, 10 mM Tris–HCl pH 7.2, 1 mM EGTA, 1 mM
phenylmethylsulfonyl fluoride, 500 μg/mL leupeptin,
1 mM sodium orthovanadate, and 50 mM NaF). The
kinase assays were performed using the MAPK assay
kit (RayBiotech, GA, USA) according to the manufacturer’s
instructions.
เรียกใช้ mitogen โปรตีนไคเนสรี phosphorylationทดสอบ เซลล์ได้นาทีที่ 37uc ในป้า lysis บัฟเฟอร์ (1% ไตรตั้นX-100, 1% โซเดียม deoxycholate, 0.1% SDS, 158 มม.NaCl, 10 มม.ทริสเรทติ้ง – HCl pH 7.2, EGTA, 1 มม.มม.phenylmethylsulfonyl ฟลูออไรด์ 500 μ/mL leupeptin1 orthovanadate โซเดียมมม. และ 50 มม. NaF) การไคเนสรี assays ดำเนินการใช้ทดสอบ MAPKชุด (RayBiotech, GA, USA) ตามผู้ผลิตคำแนะนำ
การแปล กรุณารอสักครู่..

ปรากฎโปรตีนไคเนสใช้ฟอสโฟริเลชันการทดสอบ เซลล์มี lysed ใน RIPA การสลายบัฟเฟอร์ ( 1% ไทรทันX-100 1% โซเดียมดี กซีโชเลต , 0.1 % SDS , 158 มิลลิเมตรเกลือ , และ 10 มม. นอกจากนี้–กรดไฮโดรคลอริก pH 7.2 หน่วย 1 มม. , 1 มม.phenylmethylsulfonyl ฟลูออไรด์ , 500 ลูเพปตินμ g / ml ,orthovanadate โซเดียม 1 มม. และ 50 มม. นาฟ ) ที่ไคเนส พบการใช้ mapk การทดสอบชุด ( raybiotech , GA , สหรัฐอเมริกา ) ตามที่ผู้ผลิตคําแนะนํา
การแปล กรุณารอสักครู่..
