Viral nucleic acid was extracted by

Viral nucleic acid was extracted by the
following method. Conjunctival swabs were
cut into pieces, put into 1.5 ml micro tubes,
followed by the addition of 200 µl of RNA
Viral nucleic acid from the test sample
(100 µl) was extracted using QIAamp Viral RNA
Mini Kit (QIAGEN, Valencia, USA) with a modification;
Pellet Paint NF Co-Precipitant
(Novagen, Wisconsin, USA) was used instead
of the original precipitation procedure (isopropanol
precipitation) as to improve the viral
nucleic acid yield from the samples. After the
precipitation with QIAamp Viral RNA Mini Kit,
2 µl of Pellet Paint NF Co-Precipitant and 10
µl of 3M sodium acetate, pH5.2, were added
following gentle mixing after each addition.
Finally, 100 µl of isopropanol was added, incubated
at room temperature for three minutes,
vortexed, and centrifuged at 12,000g for
five minutes in cold. The supernatant was removed
and the dark blue pellet was washed,
first with 70%, and then with absolute ethanol.
The pellet containing both the RNA and
DNA extracted from the conjunctival swab was
then dried in a vacuum centrifuge and was resuspended
in 25 µl of TE buffer

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กรดนิวคลีอิกไวรัสถูกสกัดโดยการวิธีต่อไปนี้ มี conjunctival swabsตัดเป็นชิ้น ใส่ลงในหลอดขนาดเล็ก 1.5 mlตาม ด้วยการเพิ่ม 200 µl ของอาร์เอ็นเอกรดนิวคลีอิกไวรัสจากตัวอย่างทดสอบ(100 µl) ถูกสกัดโดยใช้อาร์เอ็นเอไวรัส QIAampมินิชุด (QIAGEN, Valencia สหรัฐอเมริกา) มีการแก้ไขเม็ดสี NF ร่วม Precipitant(Novagen วิสคอนซิน สหรัฐอเมริกา) ถูกใช้แทนของขั้นตอนฝนเดิม (isopropanolฝน) เป็นไวรัสปรับปรุงผลผลิตกรดนิวคลีอิกจากตัวอย่าง หลังจากฝนกับ QIAamp ไวรัสอาร์เอ็นเอขนาดเล็กชุดµl 2 เม็ดสี NF ร่วม Precipitant และ 10µl โซเดียม 3M acetate, pH5.2 เพิ่มต่อไปนี้อ่อนโยนผสมหลังจากแต่ละครั้งในที่สุด 100 µl ของ isopropanol เพิ่ม incubatedที่อุณหภูมิห้อง 3 นาทีvortexed และ centrifuged ที่ g 12000 สำหรับ5 นาทีในน้ำเย็น Supernatant ถูกเอาออกและเม็ดสีน้ำเงินเข้มมีเครื่องซัก ผ้าครั้งแรก 70% แล้ว ด้วยเอทานอลแน่นอนเม็ดที่ประกอบด้วยอาร์เอ็นเอทั้งใน และมีดีเอ็นเอที่สกัดจาก conjunctival swabแห้งในเครื่องหมุนเหวี่ยงสูญญากาศ แล้วถูก resuspendedใน 25 µl บัฟเฟอร์ TE

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กรดนิวคลีไวรัสถูกสกัดโดยวิธีการดังต่อไปนี้ swabs conjunctival
ถูกหั่นเป็นชิ้นใส่ลงไปใน1.5 มล.
หลอดไมโครตามด้วยนอกเหนือจาก200
ไมโครลิตรของอาร์เอ็นเอไวรัสกรดนิวคลีอิกจากตัวอย่างทดสอบ
(100 ไมโครลิตร) ถูกสกัดโดยใช้ QIAamp ไวรัส RNA
Mini Kit (QIAGEN, วาเลนเซีย, สหรัฐอเมริกา) ด้วย การปรับเปลี่ยน;
เม็ดสี NF ร่วมตกตะกอน
(Novagen วิสคอนซินสหรัฐอเมริกา)
ถูกนำมาใช้แทนของเดิมขั้นตอนการตกตะกอน(isopropanol
เร่งรัด)
ในขณะที่การปรับปรุงไวรัสผลผลิตกรดนิวคลีจากกลุ่มตัวอย่าง หลังจากที่เกิดฝนกับ QIAamp ไวรัส RNA มินิชุด 2 ไมโครลิตรของเม็ด Paint NF ร่วมตกตะกอนและ 10 ไมโครลิตรของโซเดียมอะซิเตท 3M, pH5.2 ถูกเพิ่มต่อไปนี้การผสมอ่อนโยนหลังจากแต่ละนอกจาก. สุดท้าย 100 ไมโครลิตรของ isopropanol เสริมบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลาสามนาทีการ vortex และหมุนเหวี่ยงที่ 12,000g สำหรับห้านาทีในที่เย็น ใสจะถูกลบออกและเม็ดสีฟ้าที่มืดได้รับการล้างครั้งแรกกับ70% แล้วกับเอทานอลที่แน่นอน. เม็ดมีทั้งอาร์เอ็นเอและดีเอ็นเอที่สกัดจากไม้กวาด conjunctival ได้แห้งแล้วแปะสูญญากาศและถูกresuspended ใน 25 ไมโครลิตรของ บัฟเฟอร์ TE

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ไวรัสกรดนิวคลีอิคถูกสกัดโดย
ต่อไปนี้วิธีการ จากการเป็น
ตัดเป็นชิ้นใส่ลงไป 1.5 มิลลิลิตรไมโครหลอด
ตามด้วยเพิ่ม 200 µ l .
ไวรัสกรดนิวคลีอิกจากตัวอย่างทดสอบ
( 100 µ L ) ถูกสกัดโดยใช้ qiaamp ไวรัส RNA
Mini Kit ( QIAGEN , Valencia , USA ) กับการปรับเปลี่ยน ;
เม็ดสี NF Co หุนหันพลันแล่น
( novagen , Wisconsin , USA ) ใช้แทน
ของขั้นตอนการตกตะกอน ( precipitation ต้นฉบับไอโซโพรพานอล
) เพื่อปรับปรุงไวรัส
กรดนิวคลีอิก ผลผลิตที่ได้จากตัวอย่าง หลังจาก
ฝนกับ qiaamp ไวรัส RNA ขนาดเล็กชุด ,
2 l µหุนหันพลันแล่น Co เม็ดสีและ NF 10
µลิตร 3M โซเดียมอะซิเตท , ph5.2 , เพิ่ม
ต่อไปนี้อ่อนโยนผสมหลังจากแต่ละนอกจาก
สุดท้าย 100 µ L ของไอโซโพรพานอลถูกบ่ม
เพิ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 3 นาที
vortexed และระดับที่ 12000g สำหรับ
5 นาที ในเย็น ที่นำออก
และเม็ดสีน้ำเงินเข้มถูกล้าง
ครั้งแรกกับ 70% แล้วแน่นอนกับเอทานอล
เม็ดที่มีทั้ง RNA และ DNA ที่สกัดจากการเช็ด

แล้วมันแห้งในเครื่องสูญญากาศและ resuspended
25 µ l
te บัฟเฟอร์