3.3. COLUMNSThe principle of ion ex

3.3. COLUMNS
The principle of ion exchange chromatography is that, charged molecules bind electrostatically to oppositely charged groups that have been bound covalently on the matrix. Ion exchange chromatography is a type of adsorption chromatography so that, charged molecules adsorb to ion exchangers reversibly so, the molecules can be bounded or eluted by changing the ionic environment. Ion exchangers can be used in column chromatography to separate molecules according to charge; actually other features of the molecule are usually important so that the chromatographic behavior is sensitive to the charge density, charge distribution, and the size of the molecule. An ion exchanger is usually a three-dimensional network or matrix that contains covalently liked charged groups. If a group is negatively charged, it will exchange positive ions and is a cation exchanger. An example of a group used in cation exchanger is the carboxy-methyl group. However, if a group is positively charged, it will exchange negative ions and is an anion exchanger. An example of a group used in anion exchanger is the di-ethyl-amino-ethyl group (DEAE). The matrix (stationary phase) can be made of various materials, commonly used materials are dextran, cellulose, and agarose.

The separation on an ion exchanger is usually accomplished in two stages: first, the substances to be separated are bound to the exchanger using conditions that give stable and tight binding; then the column is eluted with buffers of different pH, ionic strength or composition and the components of the buffer compete with the bound material for the binding sites. To choice whether the ion exchanger is to be anionic or cationic depend on the material to be separated. If the materials to be bound to the column have a single charge (i.e., either plus or minus), the choice is clear. However, many substances (e.g., proteins), carry both negative and positive charges and the net charge depends on the pH. In such cases, the primary factor is the stability of the substance at various pH values. Most proteins have a pH range of stability (i.e., in which they don’t denature) in which they are either positively or negatively charged. So, if a protein is stable at pH value above the isoelectric point, an anion exchanger should be used; but if stable at values below the isoelectric point, a cation exchanger is required. Ion exchange columns vary widely in size, packing material and material of construction. Depending on its ultimate use and area of application, the column material may be stainless steel, titanium, glass or an inert plastic such as PEEK. The column can vary in diameter from about 2mm to 5 cm and in length from 3 cm to 50 cm depending on whether it is to be used for normal analytical purposes, microanalysis, high speed analyses or preparative work. The life of a column will depend largely on the type of samples it is used to separate but the conditions under which the separations are carried out will also place limits on it useful lifetime.

Most of the autosamplers have a piston metering syringe type pump to suck the preestablished sample volume into a line and then transfer it to the relatively large loop (~100 ml) in a standard six-port valve. The simplest autosamplers utilize the special vials with pressuarization caps. A special plunger with a needle, push the cap down to the vial and displace the sample through the needle into the valve loop. Most of the autosamplers are microprocessor controlled and can serve as a master controller for the whole instrument

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.3. คอลัมน์หลักการของการแลกเปลี่ยนไอออน chromatography ว่า โมเลกุลชำระผูก electrostatically กับ oppositely คิดกลุ่มที่มีการผูก covalently ในเมตริกซ์ Chromatography แลกเปลี่ยนไอออนเป็นชนิดดูดซับ chromatography นั้น คิดโมเลกุลชื้นการแลกเปลี่ยนไอออน reversibly เพื่อ โมเลกุลสามารถล้อมรอบ หรือ eluted โดยการเปลี่ยนระบบ ionic สามารถใช้แลกเปลี่ยนไอออนในคอลัมน์ chromatography เพื่อแยกโมเลกุลตามค่า จริง คุณลักษณะอื่น ๆ ของโมเลกุลมีความสำคัญจะให้ chromatographic ลักษณะการทำงานมีผลกระทบต่อค่าความหนาแน่น ค่าการกระจาย และขนาดของโมเลกุล การแลกเปลี่ยนไอออนมักจะเป็นเครือข่ายสามมิติ หรือเมตริกซ์ที่ประกอบด้วย covalently ชอบกลุ่มคิดค่าธรรมเนียม ถ้าส่งคิด กลุ่มจะแลกเปลี่ยนกัน และมีการแลกเปลี่ยน cation ตัวอย่างของกลุ่มที่ใช้ในการแลกเปลี่ยน cation เป็นกลุ่ม carboxy methyl อย่างไรก็ตาม ถ้ากลุ่มคิดบวก มันจะแลกเปลี่ยนประจุลบ และมีการแลกเปลี่ยน anion ตัวอย่างของกลุ่มที่ใช้ในการแลกเปลี่ยน anion เป็นกลุ่มดิเอทิลอะมิโนเอทิล (DEAE) เมตริกซ์ (ระยะเครื่องเขียน) สามารถทำจากวัสดุต่าง ๆ วัสดุที่ใช้โดยทั่วไป ใจเดกซ์แทรน เซลลูโลส agaroseThe separation on an ion exchanger is usually accomplished in two stages: first, the substances to be separated are bound to the exchanger using conditions that give stable and tight binding; then the column is eluted with buffers of different pH, ionic strength or composition and the components of the buffer compete with the bound material for the binding sites. To choice whether the ion exchanger is to be anionic or cationic depend on the material to be separated. If the materials to be bound to the column have a single charge (i.e., either plus or minus), the choice is clear. However, many substances (e.g., proteins), carry both negative and positive charges and the net charge depends on the pH. In such cases, the primary factor is the stability of the substance at various pH values. Most proteins have a pH range of stability (i.e., in which they don’t denature) in which they are either positively or negatively charged. So, if a protein is stable at pH value above the isoelectric point, an anion exchanger should be used; but if stable at values below the isoelectric point, a cation exchanger is required. Ion exchange columns vary widely in size, packing material and material of construction. Depending on its ultimate use and area of application, the column material may be stainless steel, titanium, glass or an inert plastic such as PEEK. The column can vary in diameter from about 2mm to 5 cm and in length from 3 cm to 50 cm depending on whether it is to be used for normal analytical purposes, microanalysis, high speed analyses or preparative work. The life of a column will depend largely on the type of samples it is used to separate but the conditions under which the separations are carried out will also place limits on it useful lifetime.ส่วนใหญ่ของ autosamplers มีลูกสูบปั๊มชนิดเข็ม การดูดเสียงตัวอย่าง preestablished เป็นบรรทัดแล้ว โอนย้ายไปวนค่อนข้างมาก (~ 100 ml) ในวาล์ว 6 พอร์ตมาตรฐานการวัดแสง Autosamplers ง่ายใช้ vials พิเศษกับหมวก pressuarization จมูกพิเศษกับเข็ม ผลักดันหมวกลงไปคอนแทค และเลื่อนตัวอย่างผ่านเข็มที่เป็นลูปวาล์ว Autosamplers มีหน่วยประมวลผลควบคุม และสามารถทำหน้าที่เป็นตัวควบคุมหลักสำหรับเครื่องมือทั้งหมด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.3 คอลัมน์
หลักการของโครมาแลกเปลี่ยนไอออนคือโมเลกุลที่มีประจุผูก electrostatically กลุ่มเรียกเก็บตรงข้ามที่ได้รับการผูกพัน covalently ในเมทริกซ์ โครมาแลกเปลี่ยนไอออนเป็นประเภทของการดูดซับสารเพื่อให้โมเลกุลที่มีประจุดูดซับการแลกเปลี่ยนไอออนพลิกกลับเพื่อให้โมเลกุลที่สามารถกระโดดหรือชะโดยการเปลี่ยนสภาพแวดล้อมของอิออน แลกเปลี่ยนไอออนสามารถใช้ในคอลัมน์โมเลกุลแยกตามค่าใช้จ่าย; จริงคุณสมบัติอื่น ๆ ของโมเลกุลมักจะมีสิ่งสำคัญเพื่อให้พฤติกรรมของโครมามีความไวต่อความหนาแน่นของค่าใช้จ่ายค่าใช้จ่ายการจัดจำหน่ายและขนาดของโมเลกุล แลกเปลี่ยนไอออนมักจะเป็นเครือข่ายสามมิติหรือเมทริกซ์ที่ประกอบด้วยชอบ covalently กลุ่มเรียกเก็บ หากกลุ่มที่มีประจุลบก็จะแลกเปลี่ยนไอออนบวกและแลกเปลี่ยนไอออนบวก ตัวอย่างของกลุ่มที่ใช้ในการแลกเปลี่ยนไอออนบวกคือกลุ่ม Carboxy-methyl แต่ถ้าเป็นกลุ่มที่เป็นค่าใช้จ่ายในทางบวกก็จะแลกเปลี่ยนประจุลบและมีการแลกเปลี่ยนไอออน ตัวอย่างของกลุ่มที่ใช้ในการแลกเปลี่ยนไอออนเป็นกลุ่มที่ดิเอทิลอะมิโนเอทิล (ดีอีเออี) เมทริกซ์ (เฟส) สามารถทำจากวัสดุต่าง ๆ วัสดุที่ใช้กันทั่วไปคือ dextran เซลลูโลสและ agarose. แยกในการแลกเปลี่ยนไอออนที่จะประสบความสำเร็จมักจะอยู่ในสองขั้นตอนแรกสารที่จะแยกออกจากกันจะผูกพันที่จะแลกเปลี่ยนโดยใช้ เงื่อนไขที่ให้มีเสถียรภาพและมีผลผูกพันแน่น; แล้วคอลัมน์ถูกชะด้วยบัฟเฟอร์ค่า pH ที่แตกต่างกัน, ความแข็งแรงของอิออนหรือองค์ประกอบและส่วนประกอบของบัฟเฟอร์แข่งขันกับวัสดุที่ถูกผูกไว้สำหรับเว็บไซต์ที่มีผลผูกพัน ไม่ว่าจะเป็นทางเลือกของการแลกเปลี่ยนไอออนจะเป็นประจุลบหรือบวกขึ้นอยู่กับวัสดุที่จะแยกออกจากกัน ถ้าวัสดุที่จะผูกพันกับคอลัมน์มีการชาร์จครั้งเดียว (คือไม่ว่าจะบวกหรือลบ) ทางเลือกที่มีความชัดเจน อย่างไรก็ตามสารหลายอย่าง (เช่นโปรตีน), ค่าใช้จ่ายดำเนินการทั้งบวกและลบและประจุสุทธิขึ้นอยู่กับค่า pH ในกรณีเช่นนี้ปัจจัยหลักคือความมั่นคงของสารที่มีค่าความเป็นกรดด่างต่างๆ โปรตีนส่วนใหญ่จะมีช่วง pH ของความมั่นคง (เช่นในการที่พวกเขาไม่ได้ทำให้ผิดลักษณะเดิม) ในการที่พวกเขามีทั้งบวกและประจุลบ ดังนั้นถ้าเป็นโปรตีนที่มีเสถียรภาพที่ค่าพีเอชสูงกว่าจุด Isoelectric แลกเปลี่ยนไอออนควรใช้; แต่ถ้าค่าคงที่ด้านล่าง isoelectric ชี้แลกเปลี่ยนไอออนบวกจะต้อง ไอออนคอลัมน์แลกเปลี่ยนแตกต่างกันในขนาดบรรจุวัตถุดิบและวัสดุในการก่อสร้าง ทั้งนี้ขึ้นอยู่กับการใช้งานที่ดีที่สุดและพื้นที่ของการประยุกต์ใช้วัสดุคอลัมน์อาจจะเป็นสแตนเลส, ไทเทเนียม, แก้วหรือพลาสติกเฉื่อยเช่น PEEK คอลัมน์สามารถแตกต่างกันมีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางประมาณ 2 มิลลิเมตรถึง 5 ซม. และมีความยาวตั้งแต่ 3 ซม. ถึง 50 ซม. ขึ้นอยู่กับว่าจะเป็นที่จะใช้สำหรับการวิเคราะห์ปกติ microanalysis วิเคราะห์ความเร็วสูงหรือการทำงานการจัดเตรียม ชีวิตของคอลัมน์จะขึ้นอยู่กับชนิดของตัวอย่างที่จะใช้ในการแยก แต่ภายใต้เงื่อนไขที่แยกจะดำเนินการนอกจากนี้ยังจะวางข้อ จำกัด เกี่ยวกับอายุการใช้งานที่มีประโยชน์มัน. ส่วนใหญ่ของ autosamplers มีเครื่องสูบน้ำชนิดเข็มวัดแสงลูกสูบที่จะดูด ปริมาณตัวอย่าง preestablished ลงในบรรทัดและจากนั้นโอนไปยังวงที่ค่อนข้างใหญ่ (~ 100 มล.) ในมาตรฐานวาล์วหกพอร์ต autosamplers ง่ายใช้ขวดพิเศษกับหมวก pressuarization ลูกสูบพิเศษด้วยเข็มดันฝาขวดลงไปและแทนที่ตัวอย่างผ่านเข็มเป็นห่วงวาล์ว ส่วนใหญ่ของ autosamplers มีไมโครโปรเซสเซอร์ควบคุมและสามารถทำหน้าที่เป็นตัวควบคุมหลักสำหรับเครื่องมือทั้งหมด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3.3 . คอลัมน์
หลักการของบทร้องที่ประจุโมเลกุลผูก electrostatically ไปในทางตรงข้ามกันเรียกกลุ่มที่ได้ผูกพัน covalently บนเมทริกซ์ บทร้องเป็นชนิดของการดูดซับสารดังนั้น ประจุโมเลกุลดูดซับการแลกเปลี่ยนไอออนซึ่งพลิกกลับได้ดังนั้น โมเลกุลสามารถจำกัดหรือตัวอย่างโดยการเปลี่ยนแปลงสิ่งแวดล้อมไอออนแลกเปลี่ยนไอออนสามารถใช้ในคอลัมน์โครมาโทกราฟีแยกโมเลกุลตามข้อกล่าวหา คุณลักษณะที่จริงๆของโมเลกุลที่สำคัญที่มักจะมีพฤติกรรมและมีความไวต่อค่าความหนาแน่น ค่าการกระจายและขนาดของโมเลกุล การแลกเปลี่ยนไอออนมักจะเป็นสามมิติเครือข่ายหรือเมทริกซ์ที่ประกอบด้วย covalently ชอบเรียกกลุ่มถ้ากลุ่มนี้ซึ่งมีประจุลบ ก็จะแลกเปลี่ยนอิออนบวกและเป็นแลกเปลี่ยนไอออนบวก . ตัวอย่างของกลุ่มที่ใช้ในการแลกเปลี่ยนไอออนบวกเป็นคาร์บอกซีเมทิลกรุ๊ป อย่างไรก็ตาม ถ้ากลุ่มนั้นมีประจุบวก และประจุลบ ก็จะเปลี่ยนเป็นไอออนแลกเปลี่ยน . ตัวอย่างของกลุ่มที่ใช้ในการแลกเปลี่ยนไอออนเป็นเอทิลอะมิโนเอทิลกลุ่ม ดิ ( ทำ )เมทริกซ์ ( stationary phase ) สามารถทำจากวัสดุต่าง ๆ โดยทั่วไปจะใช้วัสดุเป็นเด็กแทรน เซลลูโลส และโรส

แยกในการแลกเปลี่ยนไอออนเป็นปกติได้ใน 2 ขั้นตอนแรก สารที่ถูกแยกจากกันถูกผูกไว้เพื่อแลกเปลี่ยนการใช้เงื่อนไขที่ให้มีเสถียรภาพ และแน่น ผูก แล้วคอลัมน์คือ ตัวอย่างกับบัฟเฟอร์ที่มีพีเอชความแรงของไอออนหรือองค์ประกอบและส่วนประกอบของบัฟเฟอร์ที่แข่งขันกับผูกวัสดุสำหรับเว็บไซต์ที่เข้าเล่ม เพื่อเลือกว่าแลกเปลี่ยนไอออนเป็นประจุลบ หรือบวก ขึ้นอยู่กับวัสดุที่จะแยก ถ้าวัสดุที่จะผูกพันกับคอลัมน์มีประจุเดียว ( เช่น ให้บวก หรือ ลบ ) , เป็นทางเลือกที่ชัดเจน อย่างไรก็ตาม มี สารโปรตีน ( เช่น )มีทั้งลบและบวกค่าบริการและค่าใช้จ่ายสุทธิขึ้นอยู่กับ pH ในบางกรณี ปัจจัยแรก คือ เสถียรภาพของสารที่ค่า pH ต่างๆ โปรตีนส่วนใหญ่มี pH ในช่วงมั่นคง ( เช่นที่พวกเขาไม่นม ) ซึ่งมีทั้งบวกหรือประจุลบ ดังนั้น ถ้าโปรตีนเสถียรที่ค่า pH สูงกว่าจุดไอโซอิเล็กทริก ,การแลกเปลี่ยนไอออนที่ควรใช้ แต่ถ้าเสถียรที่ค่าด้านล่างจุดไอโซอิเล็กทริก , แลกเปลี่ยนไอออนบวกเป็นสิ่งจำเป็น คอลัมน์แลกเปลี่ยนไอออนที่แตกต่างกันในขนาด , วัสดุบรรจุภัณฑ์และวัสดุก่อสร้าง ทั้งนี้ขึ้นอยู่กับการใช้ Ultimate และพื้นที่ของการประยุกต์ใช้วัสดุคอลัมน์อาจสแตนเลส , ไทเทเนียม , แก้วหรือเป็นพลาสติกเฉื่อย เช่น แอบดูคอลัมน์สามารถแตกต่างกันในขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางประมาณ 2 มม. ถึง 5 ซม. และความยาว 3 ซม. ถึง 50 ซม. ขึ้นอยู่กับว่ามันจะถูกใช้เพื่อวัตถุประสงค์เชิงวิเคราะห์ , จัดเรียงกันอยู่ปกติ การวิเคราะห์ความเร็วสูง หรือเตรียมงานชีวิตของคอลัมน์จะขึ้นอยู่มากในประเภทของตัวอย่างเพื่อใช้ในการแยก แต่ภายใต้เงื่อนไขที่แยกจะดำเนินการก็จะวางข้อ จำกัด ในชีวิต

มันเป็นประโยชน์ที่สุดของ autosamplers มีเข็มวัดแสงชนิดลูกสูบ ปั๊มดูด preestablished ตัวอย่างปริมาณในบรรทัดและจากนั้นโอนไปยังวงค่อนข้างใหญ่ ( ~ 100 มล. ) ในมาตรฐานหกพอร์ตวาล์ว การ autosamplers ง่ายใช้หลอดพิเศษกับ pressuarization หมวก เป็นลูกสูบพิเศษกับเข็มกดฝาครอบลงขวดและแทนที่ตัวอย่างผ่านเข็มเข้าไปในลิ้นวนไปวนมา ที่สุดของ autosamplers เป็นไมโครโปรเซสเซอร์ควบคุมและสามารถใช้เป็นอาจารย์ควบคุมอุปกรณ์ทั้งหมด