2.4. Sample collection and extracti

2.4. Sample collection and extraction
Blood samples for pharmacokinetic analysis were
obtained prior to administration of a single intravenous dose of actinomycin D (0.75 or 1.50 mg/m
2
)
and at 15 min, 30 min and 1, 2, 4, 6 and 24 h
post-administration. Blood samples (2 ml) were collected in heparinised tubes and centrifuged at 1200 g
for 10 min at 4
◦
C. Plasma was separated and frozen
at−20
◦
C prior to analysis. Extraction of actinomycin
D from human plasma (500
l) involved addition
of 100
l of the internal standard working solution
(5.0
g/ml), and 3 ml of acetonitrile, added in three
1 ml aliquots while vortex mixing the tube for approximately 30 s. Following extraction, samples were
centrifuged at 1200×gfor 5 min at room temperature and 3 ml of supernatant transferred to clean glass
tubes and evaporated to dryness under nitrogen at
37
◦
C. Samples were resuspended in 200
lofmobile phase (acetate buffer pH 4.0:methanol; 35:65),
transferred to Eppendorf tubes and microfuged at

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 ตัวอย่างการรวบรวมและสกัดตัวอย่างเลือด pharmacokinetic วิเคราะห์ถูกได้รับก่อนการบริหารยาทางหลอดเลือดดำเดียวของ actinomycin D (0.75 หรือ 1.50 mg/m2)และ เมื่อ 15 นาที 30 นาที และ 1, 2, 4, 6 และ 24 ชั่วโมงบริหารหลัง ตัวอย่างเลือด (2 ml) ได้รวบรวมในท่อ heparinised และเหวี่ยงที่ 1200 กรัมสำหรับ 10 นาทีที่ 4◦พลาสม่า C. ถูกแยก และแช่แข็งat−20◦C ก่อนวิเคราะห์ สกัด actinomycinD จากพลาสมา (500 ลิตร) นอกจากนี้ที่เกี่ยวข้องของการแก้ปัญหาการทำงานมาตรฐานภายใน 100 ลิตร(5.0 g/ml), และ 3 มิลลิลิตร acetonitrile เพิ่ม 31 มิลลิลิตร aliquots ขณะวนผสมหลอดประมาณ 30 วินาที ไปสกัด ตัวอย่างถูกเหวี่ยงที่ 1200 × gfor 5 นาที ที่อุณหภูมิห้อง และ 3 ml ของ supernatant โอนแก้วที่สะอาดหลอด และระเหยให้แห้งภายใต้ไนโตรเจนที่37◦C. ตัวอย่างที่ resuspended ในระยะ 200 lofmobile (อะซิเต 4.0:methanol ค่า pH ของบัฟเฟอร์ 35:65),โอนไป Eppendorf หลอดและ microfuged ที่

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 การเก็บตัวอย่างและการสกัด
เลือดตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ทางเภสัชจลนศาสตร์ถูก
ได้รับก่อนที่จะมีการบริหารงานของยาทางหลอดเลือดดำเดียวของ actinomycin D (0.75 หรือ 1.50 mg / m
2
)
และที่ 15 นาที, 30 นาทีและ 1, 2, 4, 6 และ 24 ชั่วโมงที่
โพสต์ -administration ตัวอย่างเลือด (2 มล.) ถูกเก็บไว้ในหลอดสาร heparinised และหมุนเหวี่ยงที่ 1200 กรัม
เป็นเวลา 10 นาทีที่ 4
◦
ซี พลาสม่าถูกแยกออกและแช่แข็ง
ที่ 20
◦
C ก่อนที่จะมีการวิเคราะห์ การสกัด actinomycin
D จากพลาสม่าของมนุษย์ (500 ลิตร) ที่เกี่ยวข้องนอกจากนี้
ของ 100 ลิตรมาตรฐานภายในการทำงานการแก้ปัญหา
(5.0? g / ml) และ 3 มิลลิลิตร acetonitrile เพิ่มในสาม
1 มิลลิลิตร aliquots ขณะที่กระแสน้ำวนผสมหลอดสำหรับ ประมาณ 30 วินาที ต่อไปนี้การสกัดตัวอย่างที่ถูก
หมุนเหวี่ยงที่ 1200 × gfor 5 นาทีที่อุณหภูมิห้องและ 3 มิลลิลิตรใสโอนไปทำความสะอาดกระจก
หลอดและระเหยแห้งภายใต้ไนโตรเจนที่
37
◦
ซี ? ตัวอย่าง resuspended ใน 200 lofmobile เฟส (อะซิเตตบัฟเฟอร์ค่า pH 4.0: เมทานอล; 35:65)
โอนไปยังหลอด Eppendorf และ microfuged ที่

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . การเก็บตัวอย่างและการสกัดการวิเคราะห์ทางเภสัชจลนศาสตร์และตัวอย่างเลือดได้ก่อนการบริหารยาฉีดเดียวของแกนกลางสันหลัง ( 0.75 หรือ 1 มิลลิกรัม / ม.2)และใน 15 นาที , 30 นาทีและ 1 , 2 , 4 , 6 และ 24 ชั่วโมงโพสต์ในการบริหาร ตัวอย่างเลือด ( 2 มล. ) ถูกเก็บใน heparinised หลอดไฟฟ้า 1200 กรัม10 นาทีที่ 4◦C . พลาสมาถูกแยก และแช่แข็ง20 บริษัท เวสเทิร์น◦C ก่อนการวิเคราะห์ การสกัดแอคติโนไมซินD จากพลาสมาของมนุษย์ ( เพิ่ม 500 ) เกี่ยวข้องกับของ 100L ของภายในมาตรฐานการทำงาน โซลูชั่น( 5.0g / มิลลิลิตร ) และ 3 มล. ของไนเพิ่มสามเฉยๆ 1 ml ในขณะที่ Vortex ผสมหลอดประมาณ 30 วินาทีต่อการสกัดตัวอย่างระดับ 1200 × gfor 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง 3 มิลลิลิตร และนำไปเช็ดกระจกหลอดและระเหยแห้งภายใต้ไนโตรเจน37◦ตัวอย่าง C เป็น resuspended ใน 200lofmobile เฟส ( อะซิเตทบัฟเฟอร์ pH 4.0 : เมทานอล ; 35:65 )ย้ายไปที่ท่อและ microfuged เพนดอร์ฟ