of the Quant-iT PicoGreen dsDNA rea

of the Quant-iT PicoGreen dsDNA reagent, also describe this influence of ssDNA and RNA on the fluorimetric measurement. RNA also competes against the DNA for the binding sites of the magnetic beads. Therefore, we suggest to include an additional RNA digestion step using RNase A to correct the proportionality between DNA yield and Cq value, especially for soya bean samples. Underlined by our results, we can state that using a proteinase K application followed by a centrifugation at high speed ([16,0009g ) is sufficient for a thorough sample preparation prior to automated DNA extraction. However, this could be improved by an RNase A digestion step. The results also demonstrate the applicability of the automated DNA extraction for the detection of low-level presence of gm DNA in seed samples, as even traces of gm DNA (0.033 % gm content) are detected. As a result of our development and optimisation process, a new DNA extraction kit (Maxwell 16 FFS Nucleic Acid Extraction System, Custom, Promega GmbH, Germany) for the Maxwell 16 instrument was introduced. This new kit can be used for high-throughput extraction of DNA from seed samples, is suitable for the detection of low levels of gm contaminations and can be adopted for DNA extraction from food and feed samples.
Acknowledgments The authors would like to thank Ingo Engels for his preliminary work. Promega GmbH is particularly acknowledged for providing Maxwell 16 AS1290 kits.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ของรีเอเจนต์ dsDNA, PicoGreen Quant มันยังอธิบายนี้ influence ssDNA และอาร์เอ็นเอในวัด fluorimetric อาร์เอ็นเอยังแข่งขันกับดีเอ็นเอสำหรับไซต์รวมของเม็ดแม่เหล็ก ดังนั้น เราแนะนำให้รวมอาร์เอ็นเอย่อยอาหารขั้นตอนเพิ่มเติมแก้ไขสัดส่วนระหว่างผลผลิตดีเอ็นเอและซีค่า โดยเฉพาะอย่างยิ่งตัวอย่างถั่วเหลืองใช้ RNase A ขีดเส้นใต้ โดยผลของเรา เราสามารถระบุให้ ใช้โปรแกรมประยุกต์ proteinase K ตาม ด้วย centrifugation ที่ความเร็วสูง ([16, 0009g) เป็น sufficient สำหรับการเตรียมตัวอย่างรอบคอบก่อนการสกัดดีเอ็นเอแบบอัตโนมัติได้ อย่างไรก็ตาม นี้อาจปรับปรุง โดยมีขั้นตอนการย่อยอาหาร RNase A ผลยังแสดงให้เห็นถึงความเกี่ยวข้องของอัตโนมัติ DNA สกัดตรวจสถานะต่ำจีเอ็มดีเอ็นเอในตัวอย่างเมล็ด เป็นร่องรอยแม้แต่ของจีเอ็มดีเอ็นเอ (0.033% กรัมเนื้อหา) จะตรวจพบ จากการพัฒนาและเพิ่มประสิทธิภาพกระบวนการของเรา ใหม่ดีเอ็นเอแยกชุด (ระบบดูดของกรดนิวคลีอิก FFS 16 แมกซ์เวลล์ กำหนดเอง Promega GmbH เยอรมนี) สำหรับเครื่อง 16 แมกซ์เวลล์ถูกนำมาใช้ ชุดใหม่นี้สามารถใช้ในอัตราความเร็วสูงสกัดดีเอ็นเอจากตัวอย่างเมล็ด เหมาะสำหรับการตรวจพบระดับต่ำของปนจีเอ็ม และสามารถนำมาใช้เพื่อสกัดดีเอ็นเอจากอาหาร และอาหารตัวอย่างตอบผู้เขียนต้องขอขอบคุณ Ingo Engels สำหรับงานเบื้องต้นของเขา Promega GmbH โดยเฉพาะอย่างยิ่งได้รับการยอมรับให้ AS1290 แมกซ์เวลล์ 16 ชุด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ของควอนท์-iT PicoGreen น้ำยา dsDNA ยังอธิบายเรื่องนี้ในชั้นของ uence ssDNA และ RNA ในวัด uorimetric ชั้น อาร์เอ็นเอยังแข่งขันกับดีเอ็นเอสำหรับเว็บไซต์ที่มีผลผูกพันของลูกปัดแม่เหล็ก ดังนั้นเราจึงขอแนะนำให้รวมถึงขั้นตอนการย่อยอาหาร RNA เพิ่มเติมโดยใช้ RNase เพื่อแก้ไขสัดส่วนระหว่างผลผลิตดีเอ็นเอและความคุ้มค่า Cq โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับตัวอย่างถั่วเหลือง ขีดเส้นใต้โดยผลของเราเราสามารถระบุว่าใช้โปรแกรมโปร K ตามด้วยการหมุนเหวี่ยงที่ความเร็วสูง ([16,0009g) เป็นไฟเพียงพอพอเพียงสำหรับการเตรียมตัวอย่างละเอียดก่อนที่จะมีการสกัดดีเอ็นเออัตโนมัติ แต่นี้อาจจะดีขึ้นโดย RNase ขั้นตอนการย่อยอาหาร ยังแสดงให้เห็นถึงผลการบังคับใช้ของการสกัดดีเอ็นเอโดยอัตโนมัติสำหรับการตรวจสอบจากการปรากฏตัวในระดับต่ำของดีเอ็นเอกรัมในตัวอย่างเมล็ดพันธุ์ที่เป็นร่องรอยแม้แต่ของดีเอ็นเอกรัม (0.033% เนื้อหากรัม) มีการตรวจพบ อันเป็นผลมาจากการพัฒนาของเราและขั้นตอนการเพิ่มประสิทธิภาพการสกัดดีเอ็นเอชุดใหม่ (แมกซ์เวล 16 FFS นิวคลีอิกกรดระบบสกัดที่กำหนดเอง, Promega GmbH ประเทศเยอรมนี) สำหรับแมกซ์เวล? 16 ได้รับการแนะนำเครื่องมือ ชุดใหม่นี้สามารถนำมาใช้ในการสกัดสูงผ่านดีเอ็นเอจากตัวอย่างเมล็ดพันธุ์มีความเหมาะสมสำหรับการตรวจหาระดับต่ำของการปนเปื้อนกรัมและสามารถนำมาใช้สำหรับการสกัดดีเอ็นเอจากอาหารและตัวอย่างฟีด.
ขอบคุณผู้เขียนอยากจะขอขอบคุณ Engels Ingo สำหรับการทำงานเบื้องต้นของเขา Promega GmbH ได้รับการยอมรับโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการให้บริการแมกซ์เวล? 16 ชุด AS1290

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ของจํานวนมัน picogreen dsdna รีเอเจนต์ ยังอธิบายนี้ใน uence flของ ssdna และ RNA ในfl uorimetric การวัด อาร์เอ็นเอยังแข่งขันกับดีเอ็นเอสำหรับเว็บไซต์ที่ใช้เม็ดแม่เหล็ก ดังนั้นเราจึงขอแนะนำให้มีการเพิ่มเติม RNA การย่อยอาหารขั้นใช้เลสเพื่อแก้ไขสัดส่วนระหว่างผลผลิตดีเอ็นเอและค่าซีคิว , โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับตัวอย่างถั่วเหลือง .ขีดเส้นใต้โดยผลของเรา เราสามารถระบุว่าใช้โปรใช้ K ตามด้วยปั่นที่ความเร็วสูง ( [ 160009g ) ซุฟจึง cient สำหรับอย่างละเอียด การเตรียมตัวก่อนโดยการสกัดดีเอ็นเอ อย่างไรก็ตาม , นี้อาจจะดีขึ้นโดยเลสการย่อยอาหารที่ขั้นตอนผลยังแสดงให้เห็นถึงการประยุกต์ใช้โดยอัตโนมัติสกัดดีเอ็นเอเพื่อตรวจหาดีเอ็นเอของตนในจีเอ็มในตัวอย่างเมล็ด แม้ร่องรอยของ ( gmt ) ดีเอ็นเอ ( เนื้อหา ) 0.033 % ) จะตรวจพบ ผลของการพัฒนาและกระบวนการเพิ่มประสิทธิภาพของเรา ชุดสกัดดีเอ็นเอใหม่ ( แม็กซ์เวลล์  16 โครงการระบบการสกัดกรดนิวคลีอิก , กำหนดเอง , promega GmbH ,เยอรมนี ) สำหรับ Maxwell  16 อุปกรณ์แนะนำ ชุดใหม่นี้สามารถใช้เพื่อช่วยในการสกัดดีเอ็นเอจากตัวอย่างเมล็ด เหมาะสำหรับการตรวจหาระดับของการปนเปื้อน GM และสามารถใช้สำหรับการสกัดดีเอ็นเอจากตัวอย่างอาหารและอาหารสัตว์ .
ขอบคุณผู้เขียนขอขอบคุณ Ingo ภาษาอังกฤษสําหรับการทํางานเบื้องต้นของเขาpromega GmbH โดยยอมรับให้ แม็กซ์เวลล์  as1290
16 ชุด