Chitinase is an important pathogene

Chitinase is an important pathogenesis-related protein in
plants, and it can accumulate when induced by salicylic acid (SA) or other
elicitors. Here, we found that chitinase mRNA levels were 4.5-times greater
when peanut seedlings were sprayed with 1.5 mM SA, as compared to
water. The upstream promoter sequence of the chitinase gene was cloned
by TAIL-PCR and the potential cis-regulatory elements in this promoter were
predicted by the cis-element databases PLACE and plantCARE. Elements
in the promoter related to SA induction and disease resistance response
included AS-1, GT1-motif, GRWAAW, TGTCA, W-box, and WB-box. The
full-length promoter (P) and a series of 5'-deleted promoters (P
) were
cloned and then substituted for the 35S promoter of pCAMBIA1301-xylA,
which carries the xylose isomerase gene as the selectable marker and
GUS as the reporter gene. Six plant expression vectors (pCAMBIA1301xylA-P-pCAMBIA1301-xylA-P
) were obtained. The six expression vectors
were then transferred into onion epidermal cells and peanut plants by
Agrobacterium-mediated transformation. Both the full-length and deleted
promoters resulted in GUS staining of the onion epidermis cells wheninduced by SA. In onion epidermis cells, GUS enzyme activity was greater
after SA induction. In transgenic peanut plants, GUS mRNA levels were
greater after SA induction. Consideration of the cis-regulatory elements
predicted by PLACE and plantCARE suggested that AS-1, GRWAAW, and
W-box are positive regulatory elements in P
2
and P
and that GT1-motif
and TGTCA are negative regulatory elements between P and P
3
2
.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ไคติเนสเป็นโปรตีนที่ทำให้เกิดโรคที่เกี่ยวข้องกับความสำคัญในพืชและมันสามารถสะสมเมื่อเกิดจากกรดซาลิไซลิ (SA) หรืออื่น ๆ ที่ elicitors ที่นี่เราพบว่าไคติเนสในระดับ mRNA เป็น 4.5 ครั้งยิ่งใหญ่เมื่อต้นกล้าถั่วลิสงถูกพ่นด้วย1.5 มิลลิ SA เมื่อเทียบกับน้ำ ลำดับโปรโมเตอร์ต้นน้ำของยีนไคติเนสเป็นโคลนโดยหาง-PCR และศักยภาพองค์ประกอบถูกต้องกำกับดูแลในการก่อการครั้งนี้ได้ตามคำทำนายของฐานข้อมูลที่ถูกต้ององค์ประกอบPLACE และ plantCARE องค์ประกอบในการก่อการที่เกี่ยวข้องกับการเหนี่ยวนำ SA และการตอบสนองความต้านทานโรครวมAS-1-GT1 บรรทัดฐาน, GRWAAW, TGTCA, W-กล่อง WB-กล่อง ก่อการยาวเต็มรูปแบบ (P) และชุดของโปรโมเตอร์ 5'-ลบ(P) เป็นโคลนและแทนแล้วสำหรับโปรโมเตอร์35S ของ pCAMBIA1301-xylA, ซึ่งถือยีน isomerase ไซโลสเป็นเครื่องหมายเลือกและGUS เป็นยีนนักข่าว . หกเวกเตอร์แสดงออกพืช (pCAMBIA1301xylA-P-pCAMBIA1301-xylA-P) ที่ได้รับ หกเวกเตอร์แสดงออกถูกย้ายเข้าไปในเซลล์ผิวหนังหอมถั่วลิสงและพืชโดยเชื้อAgrobacterium ทั้งสองมีความยาวเต็มรูปแบบและลบก่อการผลในการย้อมสี GUS ของเซลล์ผิวหนังชั้นนอกหอม wheninduced โดย SA ในหัวหอมเซลล์ผิวหนังชั้นนอก, เอนไซม์ GUS เป็นมากขึ้นหลังจากการเหนี่ยวนำSA ในพืชถั่วลิสงพันธุ์ระดับ GUS mRNA มีมากขึ้นหลังจากการเหนี่ยวนำSA การพิจารณาขององค์ประกอบที่ถูกต้องกำกับดูแลตามคำทำนายของสถานที่และ plantCARE ชี้ให้เห็นว่า AS-1, GRWAAW และ W-กล่องเป็นองค์ประกอบการกำกับดูแลในเชิงบวกใน P 2 และ P และ GT1-บรรทัดฐานและTGTCA เป็นองค์ประกอบการกำกับดูแลเชิงลบระหว่าง P และ P 3 2 .

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เอนไซม์เป็นโปรตีนซึ่งสำคัญที่เกี่ยวข้องใน
พืช และสามารถสะสมเมื่อกระตุ้นด้วย salicylic acid ( SA ) หรืออื่น ๆ )
. ที่นี่เราพบว่าระดับของเอนไซม์ไคติเนส 4.5-times มากขึ้น
เมื่อ ต้นอ่อนถั่วลิสงพ่นซา 1.5 มม. เมื่อเทียบกับ
น้ำ ต้นน้ำของการลำดับของยีนไคติเนสที่โคลน
โดย tail-pcr และศักยภาพในด้านองค์ประกอบการ CIS นี้
ทำนายโดย CIS องค์ประกอบฐานข้อมูลสถานที่และ plantcare . องค์ประกอบในการเกี่ยวข้องกับซา

การตอบสนองความต้านทานโรคและการรวม as-1 GT1 , แม่ลาย , grwaaw tgtca w-box , , , กล่องและ WB .
โปรโมเตอร์เต็มตัว ( P ) และชุดของ 5 ' - ลบโปรโมเตอร์ ( P (

)โคลนและจากนั้นแทนการ 35s ของสามารถ xyla
, B ซึ่งเป็นยีนที่สามารถเลือกได้จากเครื่องหมายและ
กัสเป็นนักข่าวจีน หกพืชแสดงออกเวกเตอร์ ( pcambia1301xyla-p-pcambia1301-xyla-p
) ที่ได้รับ 6 การแสดงออกเวกเตอร์
แล้วโอนเข้ามาหอมตรงเซลล์และพืชถั่วลิสงโดย
Agrobacterium โดยการแปลงทั้งแบบเต็มตัวและลบ
โปรโมเตอร์ให้กัสการย้อมสีของหัวหอมเซลล์หนังกำพร้า wheninduced โดยสา ในหัวหอมเซลล์หนังกำพร้า กัส กิจกรรมเอนไซม์มากขึ้น
หลังการ SA ในพืชถั่วลิสงพันธุ์ กัสระดับ mRNA
มากขึ้นหลังการ SA การพิจารณาของ CIS บังคับองค์ประกอบ
ทำนายโดยสถานที่และ plantcare แนะนำว่า as-1 grwaaw
, , และw-box บวกกับองค์ประกอบใน p
2
p

tgtca GT1 และ Motif และองค์ประกอบด้านลบระหว่าง P และ P
3
2