In order to establish whether patul

In order to establish whether patulin-degrading activity was
inducible and determine its localization, R. paludigenum (10 7
cells/ml) was incubated in pure NYDB (Sample 1) and NYDB con-
taining 10 l g/l patulin (Sample 2) at 28 ?C with shaking
(150 rpm) for 48 h. The supernatant and the cells were separated
by centrifugation and the supernatant from Sample 1 and Sample
2 were marked as S and S-pat, respectively. A small portion of S-
pat was analyzed by HPLC to confirm that patulin disappeared
completely. The cells were washed with phosphate buffer
(50 mM, pH 7.0) three times. Three grams of wet cells were quickly
ground with quartz sand and liquid nitrogen and suspended in
7 ml phosphate buffer. The samples were centrifuged at 4 ?C at
13,000g for 10 min and the supernatant was collected. The intra-
cellular protein solutions made from Sample 1 and Sample 2 were
marked as I and I-pat, respectively. Fifteen micrograms of patulin
was added to 5 ml S, S-pat, I, and I-pat at 25 ?C and the patulin con-
centrations were determined after 24 h.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เพื่อที่จะสร้างว่า เป็นกิจกรรมที่ลด patulininducible และตรวจสอบการแปล R. paludigenum (10 7เซลล์/มิลลิลิตร) ได้รับการกกในบริสุทธิ์ NYDB (ตัวอย่าง 1) และปรับ NYDB-taining 10 l บัญชี patulin (2 อย่าง) ที่ 28 C มีการสั่น(150 รอบต่อนาที) สำหรับ 48 h ใน supernatant และเซลล์แยกจากกันโดยการหมุนเหวี่ยงและ supernatant จากตัวอย่าง 1 ตัวอย่าง2 ถูกทำเครื่องหมายเป็น S และ S-pat ตามลำดับ ส่วนเล็ก ๆ ของ S-พัฒน์ถูกวิเคราะห์ โดย HPLC เพื่อยืนยัน patulin ที่หายไปอย่างสมบูรณ์ เซลล์ถูกล้าง ด้วยฟอสเฟตบัฟเฟอร์(50 มม. ค่า pH 7.0) สามครั้ง 3 กรัมของเซลล์เปียกได้อย่างรวดเร็วดินทรายควอตซ์และของเหลวไนโตรเจน และถูกระงับใน7 ml ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ตัวอย่างถูกเหวี่ยงที่ 4 C ที่13,000g 10 นาทีและ supernatant รวบรวม Intra-แก้ไขปัญหาเซลลูลาร์โปรตีนจากตัวอย่าง 1 และ 2 อย่างมีทำเครื่องหมายเป็นฉันและฉัน-pat ตามลำดับ Patulin 15 ไมโครกรัมเพิ่ม 5 มล. S, S-แพท ฉัน และฉัน-pat ที่ 25 C และ patulin คอน-centrations ถูกกำหนดหลังจาก 24 ชม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อสร้างว่ากิจกรรม patulin ย่อยสลายเป็น
inducible และตรวจสอบการแปลของอาร์ paludigenum (10 7
cells / ml) ถูกบ่มบริสุทธิ์ NYDB (ตัวอย่าง 1) และ NYDB จะประกอบด้วย
ในประเด็น 10 LG / L patulin (ตัวอย่าง 2) 28? C ที่มีการสั่นสะเทือน
(150 รอบต่อนาที) เป็นเวลา 48 ชั่วโมง ใสและเซลล์ที่ถูกแยกออกจากกัน
โดยการหมุนเหวี่ยงและใสจากตัวอย่างที่ 1 และตัวอย่าง
2 ถูกทำเครื่องหมายเป็น S และ S-pat ตามลำดับ ส่วนเล็ก ๆ ของ S-
pat ถูกวิเคราะห์โดยวิธี HPLC เพื่อยืนยัน patulin ที่หายไป
อย่างสมบูรณ์ เซลล์ที่ถูกล้างด้วยฟอสเฟตบัฟเฟอร์
(ขนาด 50 มมค่า pH 7.0) สามครั้ง สามกรัมของเซลล์เปียกได้อย่างรวดเร็ว
กับพื้นทรายควอทซ์และไนโตรเจนเหลวและระงับใน
7 มล. ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ตัวอย่างถูกหมุนเหวี่ยงที่ 4? C ที่
13,000g เป็นเวลา 10 นาทีและสารละลายที่ถูกเก็บรวบรวม โยกย้ายงานทั้ง
โซลูชั่นโปรตีนโทรศัพท์มือถือทำจากตัวอย่างที่ 1 และ 2 ตัวอย่างที่ถูก
ทำเครื่องหมายเป็นฉัน I-pat ตามลำดับ สิบห้าไมโครกรัม patulin
ถูกบันทึกอยู่ในขนาด 5 ml S, S-pat, I, I-pat ที่ 25 องศาเซลเซียสและ patulin con-
centrations ได้รับการพิจารณาหลังจาก 24 ชั่วโมง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในการสร้างว่า พาตูลินการปฏิบัติกิจกรรมinducible และตรวจสอบการแปล , R . paludigenum ( 10 7เซลล์ / มิลลิลิตร ) เป็นเชื้อบริสุทธิ์ nydb ตัวอย่าง ( 1 ) nydb con - และTAINING 10 ลิตรกรัม / ลิตร พาตูลิน ( ตัวอย่าง 2 ) ที่ 28 ? ซี เขย่า( 150 รอบต่อนาที ) เป็นเวลา 48 ชั่วโมง และนำเซลล์ที่แยกจากกันโดยการเหวี่ยงแยก และนำตัวอย่างจากตัวอย่างที่ 1 และ2 ถูกทำเครื่องหมายเป็น S และ s-pat ตามลำดับ ส่วนเล็ก ๆของขแพทได้ถูกวิเคราะห์โดย HPLC เพื่อยืนยันว่าพาตูลินหายไปอย่างสมบูรณ์ เซลล์ที่ถูกล้างด้วยฟอสเฟตบัฟเฟอร์( 50 มม. , pH 7.0 ) 3 ครั้ง สามกรัมเซลล์เปียกได้อย่างรวดเร็วดินกับทรายควอตซ์ และไนโตรเจนเหลว และแขวนใน7 ml ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ จำนวนระดับที่ 4 C ที่13000g เป็นเวลา 10 นาที และนำกำลังรวบรวม ภายในเซลล์โปรตีนโซลูชั่นจากตัวอย่าง 1 ตัวอย่าง 2 และทำเครื่องหมายเป็นฉันและ i-pat ตามลำดับ 15 ไมโครกรัมพาตูลินได้เพิ่ม 5 ml , s-pat ผมและ i-pat 25 ? C และพาตูลินคอน -centrations ตัดสินใจหลังจาก 24 ชั่วโมง