- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
2.2.3. Synthesis of TMCMC1 g of TMC
2.2.3. Synthesis of TMCMC
1 g of TMC 72 h was added in 20 mL 42% NaOH solution at 30 ◦C,
followed by adding monochloroacetate dropwise until the final
concentration of NaOH was 18%. The reaction lasted for various
times. Then the pH was adjusted to 7 with HCl. The solution was
dialyzed against deionized water for 3 days by changing water once
a day, and then lyophilized.
2.3. Characterization
IR spectra were recorded with KBr pellets on a Nicolet NEXUS-
470 spectrometer. 1H NMR spectra were measured at 313 K on an
INOVA-600 spectrometer, using D2O as solvent. Elemental analysis
was performed with a Vario MICRO elemental analyzer. Thermalgravimetric
analysis was implemented using Universal V2.4F TA
thermal analyzer. The analysis was preformed under continuous
flow of dry nitrogen gas at a heating rate of 20 ◦C/min.
The degree of trimethylation for TMC was calculated using the
combined integral methods of peak areas in NMR spectra according
to the following equation:
N, N, N − trimethylation %
= [N(CH3)3]
[H2, H3, H4, H5, H6, H6
] × 6/9 × 100 (1)
where [N(CH3)3] was the integral of the N,N,N-trimethyl singlet
peak (ı = 3.1 ppm) (Rúnarsson et al., 2007). C/N ratios in EA data
were used to evaluate the degree of substitution (DS) of the other
chitosan derivatives. The substitution degrees were given in percentage.
2.4. Antibacterial test
Two methods were adopted for investigating the antibacterial
activity: determining minimum inhibitory concentration (MIC) in
both dilute acidic and weak basic conditions and viable cell account
after the treatment with chitosan and its derivatives in acidic conditions.
2.4.1. Determination of MIC
MIC was determined by an agar plate method (Sun et al., 2006)
with some modifications. In this method, the samples were prepared
at a concentration of 1% (w/v), then autoclaved at 121 ◦C
for 20 min. Duplicate twofold serial dilutions of each sample were
added to nutrient broth (pH 5.5 or pH 7.2) for concentration of 0.4%,
0.2%, 0.1%, 0.05%, 0.025%, 0.0125%, 0.00625%, and 0.00313% (w/v).
The pH was adjusted by 1% acetic acid or 1% sodium hydroxide.
The culture of each bacterium was diluted by sterile distilled water
to 105–106 CFU/mL. A loop of each suspension was inoculated on
nutrient medium with sample or control added, and then incubated
at 35 ◦C for 48 h. At last, the colonies were counted to value MIC.
The experiments were repeated for three times. MIC was defined as
the lowest concentration required inhibiting the growth of bacteria,
i.e. the concentration at which no microorganism colony or less
than five colonies were visible within 19–38 h (Wang et al., 2009).
2.4.2. Viable cell count at various conditions
Chitosan derivatives were dispersed in 10 mL nutrient broth
with the final concentration of 0.1% (wt%) and inoculated with
approximately 107 CFU/mL of the bacterial strains, and then incubated
in ambient air at 35 ◦C. After 1 h incubation, a 50 L aliquot or
the dilutions were spread on nutrient agar plates, which were incubated
at 35 ◦C for 24 h. Then the numbers of colonies were counted.
All the data were the means from at least three parallel experiments
with discrepancies among them less than 5%.
1 g of TMC 72 h was added in 20 mL 42% NaOH solution at 30 ◦C,
followed by adding monochloroacetate dropwise until the final
concentration of NaOH was 18%. The reaction lasted for various
times. Then the pH was adjusted to 7 with HCl. The solution was
dialyzed against deionized water for 3 days by changing water once
a day, and then lyophilized.
2.3. Characterization
IR spectra were recorded with KBr pellets on a Nicolet NEXUS-
470 spectrometer. 1H NMR spectra were measured at 313 K on an
INOVA-600 spectrometer, using D2O as solvent. Elemental analysis
was performed with a Vario MICRO elemental analyzer. Thermalgravimetric
analysis was implemented using Universal V2.4F TA
thermal analyzer. The analysis was preformed under continuous
flow of dry nitrogen gas at a heating rate of 20 ◦C/min.
The degree of trimethylation for TMC was calculated using the
combined integral methods of peak areas in NMR spectra according
to the following equation:
N, N, N − trimethylation %
= [N(CH3)3]
[H2, H3, H4, H5, H6, H6
] × 6/9 × 100 (1)
where [N(CH3)3] was the integral of the N,N,N-trimethyl singlet
peak (ı = 3.1 ppm) (Rúnarsson et al., 2007). C/N ratios in EA data
were used to evaluate the degree of substitution (DS) of the other
chitosan derivatives. The substitution degrees were given in percentage.
2.4. Antibacterial test
Two methods were adopted for investigating the antibacterial
activity: determining minimum inhibitory concentration (MIC) in
both dilute acidic and weak basic conditions and viable cell account
after the treatment with chitosan and its derivatives in acidic conditions.
2.4.1. Determination of MIC
MIC was determined by an agar plate method (Sun et al., 2006)
with some modifications. In this method, the samples were prepared
at a concentration of 1% (w/v), then autoclaved at 121 ◦C
for 20 min. Duplicate twofold serial dilutions of each sample were
added to nutrient broth (pH 5.5 or pH 7.2) for concentration of 0.4%,
0.2%, 0.1%, 0.05%, 0.025%, 0.0125%, 0.00625%, and 0.00313% (w/v).
The pH was adjusted by 1% acetic acid or 1% sodium hydroxide.
The culture of each bacterium was diluted by sterile distilled water
to 105–106 CFU/mL. A loop of each suspension was inoculated on
nutrient medium with sample or control added, and then incubated
at 35 ◦C for 48 h. At last, the colonies were counted to value MIC.
The experiments were repeated for three times. MIC was defined as
the lowest concentration required inhibiting the growth of bacteria,
i.e. the concentration at which no microorganism colony or less
than five colonies were visible within 19–38 h (Wang et al., 2009).
2.4.2. Viable cell count at various conditions
Chitosan derivatives were dispersed in 10 mL nutrient broth
with the final concentration of 0.1% (wt%) and inoculated with
approximately 107 CFU/mL of the bacterial strains, and then incubated
in ambient air at 35 ◦C. After 1 h incubation, a 50 L aliquot or
the dilutions were spread on nutrient agar plates, which were incubated
at 35 ◦C for 24 h. Then the numbers of colonies were counted.
All the data were the means from at least three parallel experiments
with discrepancies among them less than 5%.
0/5000
2.2.3 การสังเคราะห์ TMCMCเพิ่มใน 20 mL 42% NaOH โซลูชันที่ 30 ◦C, g 1 ของ TMC 72 hตาม ด้วยการเพิ่ม monochloroacetate dropwise จนถึงสุดท้ายความเข้มข้นของ NaOH เป็น 18% ปฏิกิริยาที่ lasted สำหรับต่าง ๆครั้ง แล้ว ถูกปรับ pH ให้ 7 กับ HCl โซลูชั่นdialyzed กับน้ำ deionized 3 วัน โดยเปลี่ยนน้ำครั้งวัน และ lyophilized แล้ว2.3 การจำแนกบันทึกกับ KBr ขี้บน Nicolet NEXUS แบบ IR แรมสเป็คตราสเปกโตรมิเตอร์ 470 1H NMR แรมสเป็คตราถูกวัดที่ 313 K ในการINOVA-600 สเปกโตรมิเตอร์ D2O ใช้ตัวทำละลาย วิเคราะห์ธาตุที่ดำเนินการ ด้วยการวิเคราะห์ธาตุ Vario ไมโคร Thermalgravimetricวิเคราะห์ได้ดำเนินการใช้ TA V2.4F สากลวิเคราะห์ความร้อน การวิเคราะห์ถูก preformed ภายใต้อย่างต่อเนื่องการไหลของก๊าซไนโตรเจนแห้งที่ความร้อนอัตรานาทีละ 20 ◦Cระดับของ trimethylation ใน TMC ถูกคำนวณโดยใช้การรวมวิธีการเป็นพื้นที่ที่สูงสุดในแรมสเป็คตรา NMR ตามการสมการต่อไปนี้:N, N, N − trimethylation %= [N (CH3) 3][H2, H3, H4, H5, H6, H6] 6/9 ×× 100 (1)ที่ [N (CH3) 3] ถูกทฤษฎีบูรณาการของ N, N, N-trimethyl เสื้อกล้ามสูงสุด (ı = 3.1 ppm) (Rúnarsson et al., 2007) อัตราส่วน C/N ในข้อมูลเอใช้ในการประเมินระดับของการทดแทน (DS) อื่น ๆไคโตซานตราสารอนุพันธ์ องศาแทนที่ได้รับในหน่วยเปอร์เซ็นต์2.4 การต้านเชื้อแบคทีเรียทดสอบวิธีที่สองถูกนำมาใช้เพื่อตรวจสอบยาปฏิชีวนะที่กิจกรรม: การกำหนดความเข้มข้นลิปกลอสไขต่ำสุด (MIC) ในdilute เปรี้ยว และอ่อนแอพื้นฐานเงื่อนไขและบัญชีเซลล์ทำงานได้หลังจากรักษาด้วยไคโตซานและอนุพันธ์ในสภาวะกรด2.4.1 การกำหนดของไมค์ไมค์ถูกกำหนด โดยวิธีการแผ่น agar (ซันและ al., 2006)มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง ในวิธีการนี้ มีเตรียมตัวอย่างที่ความเข้มข้น 1% (w/v), แล้ว autoclaved ที่ 121 ◦Cสำหรับ 20 นาทีซ้ำ dilutions ประจำสองเท่าของแต่ละอย่างได้เพิ่มธาตุอาหารซุป (pH 5.5 หรือ pH 7.2) ในความเข้มข้น 0.4%0.2%, 0.1%, 0.05%, 0.025%, 0.0125%, 0.00625% และ 0.00313% (w/v)มีการปรับปรุง pH ด้วยกรดอะซิติก 1% หรือ 1% โซเดียมไฮดรอกไซด์วัฒนธรรมของแบคทีเรียแต่ละถูกทำให้เจือจาง ด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อไป 105-106 CFU/mL วนของแต่ละระบบกันสะเทือนถูก inoculated ในธาตุอาหารปานกลางตัวอย่างหรือควบคุมเพิ่ม และ incubated แล้วที่ ◦C 35 สำหรับ 48 h ในที่สุด อาณานิคมได้นับค่า MICทดลองถูกทำซ้ำครั้งที่สาม ไมค์ถูกกำหนดเป็นเข้มข้นต่ำสุดที่ต้องการเติบโตของแบคทีเรีย inhibitingเช่นความเข้มข้น ในอาณานิคมยังไม่ใด หรือน้อยกว่ากว่าห้าอาณานิคมได้เห็นภายใน 19-38 h (Wang et al., 2009)2.4.2 การจำนวนเซลล์ที่ทำงานในเงื่อนไขต่าง ๆอนุพันธ์ไคโตซานได้กระจายใน 10 มล.ธาตุอาหารซุปมีความเข้มข้นสุดท้ายของ 0.1% (wt %) และ inoculated ด้วยประมาณ 107 CFU/mL ของสายพันธุ์แบคทีเรีย และ incubated แล้วในสภาวะอากาศที่ 35 ◦C หลังจากบ่ม 1 h, 50 L aliquot หรือdilutions ที่ถูกแพร่กระจายในแผ่นธาตุอาหาร agar ซึ่งถูก incubatedที่ ◦C 35 ใน 24 ชม แล้วนับจำนวนอาณานิคมได้ข้อมูลทั้งหมดที่ถูกวิธีจากทดลองน้อย 3 ขนานมีความขัดแย้งระหว่างกันน้อยกว่า 5%
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.2.3 การสังเคราะห์ TMCMC
1 กรัมของ TMC 72 ชั่วโมงถูกเพิ่มเข้ามาใน 20 มล 42% วิธีการแก้ปัญหา NaOH วันที่ 30 ◦C,
ตามด้วยการเพิ่ม dropwise
โมโนคลอโรจนสุดท้ายความเข้มข้นของNaOH 18%
ปฏิกิริยาที่กินเวลานานต่างๆครั้ง แล้วค่า pH ที่ถูกปรับให้ 7 กับ HCl วิธีการแก้ปัญหาที่ได้รับการ
dialyzed กับน้ำปราศจากไอออนเป็นเวลา 3
วันโดยการเปลี่ยนน้ำครั้งเดียวต่อวันและจากนั้นแห้ง.
2.3 ลักษณะสเปกตรัม IR บันทึกด้วยเม็ด KBr ในเล NEXUS- 470 สเปกโตรมิเตอร์ สเปกตรัม 1H NMR วัดที่ 313 K ในสเปกโตรมิเตอร์ INOVA-600 ใช้ D2O เป็นตัวทำละลาย การวิเคราะห์ธาตุได้ดำเนินการกับวิเคราะห์ธาตุ Vario MICRO Thermalgravimetric วิเคราะห์ได้รับการดำเนินการโดยใช้ยูนิเวอร์แซ V2.4F TA วิเคราะห์ความร้อน การวิเคราะห์ได้อย่างต่อเนื่องภายใต้ preformed การไหลของก๊าซไนโตรเจนแห้งในอัตราความร้อน 20 ◦C / นาที. ระดับของ trimethylation สำหรับ TMC ได้รับการคำนวณโดยใช้ร่วมกันวิธีการหนึ่งของพื้นที่สูงสุดในสเปกตรัมNMR ตามสมการต่อไป, เอ็น , N - trimethylation% = [N (CH3) 3] [H2, H3, H4, H5, H6, H6?] × 6/9 × 100 (1) ที่ [N (CH3) 3] เป็นหนึ่งของ N ไม่ , N, N-เสื้อกล้าม trimethyl สูงสุด (i = 3.1 ppm) (Rúnarsson et al., 2007) C / N อัตราส่วนในข้อมูล EA ถูกนำมาใช้ในการประเมินระดับของการทดแทน (DS) ของอื่น ๆอนุพันธ์ไคโตซาน องศาทดแทนที่ได้รับในอัตราร้อยละ. 2.4 ทดสอบการต้านเชื้อแบคทีเรียสองวิธีที่ถูกนำมาใช้สำหรับการตรวจสอบการต้านเชื้อแบคทีเรียกิจกรรม: การกำหนดความเข้มข้นต่ำสุด (MIC) ในทั้งเจือจางเงื่อนไขพื้นฐานที่เป็นกรดและอ่อนแอและบัญชีของเซลล์ที่มีชีวิตหลังการรักษาด้วยไคโตซานและอนุพันธ์ในสภาพที่เป็นกรด. 2.4.1 ความมุ่งมั่นของ MIC MIC ถูกกำหนดโดยวิธีการที่แผ่นวุ้น (Sun et al., 2006) มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง ในวิธีการนี้กลุ่มตัวอย่างได้เตรียมที่ความเข้มข้น 1% (w / v) เบาแล้ว 121 ◦Cเป็นเวลา20 นาที ซ้ำเจือจางอนุกรมสองเท่าของแต่ละตัวอย่างถูกเพิ่มลงไปในน้ำซุปสารอาหาร (pH 5.5 หรือค่า pH 7.2) ความเข้มข้น 0.4%, 0.2%, 0.1%, 0.05%, 0.025% 0.0125% 0.00625% และ 0.00313% (w / v ). ค่า pH มีการปรับขึ้น 1% กรดอะซิติกหรือโซเดียมไฮดรอกไซ 1%. วัฒนธรรมของแบคทีเรียแต่ละถูกเจือจางด้วยน้ำกลั่นปลอดเชื้อเพื่อ 105-106 CFU / มิลลิลิตร ห่วงของการระงับแต่ละเชื้อในสื่อสารอาหารที่มีตัวอย่างหรือการควบคุมการเพิ่มและบ่มแล้วที่35 ◦Cเป็นเวลา 48 ชั่วโมง ที่ล่าสุดอาณานิคมนับค่า MIC. การทดลองซ้ำสามครั้ง MIC ถูกกำหนดเป็นความเข้มข้นต่ำสุดที่จำเป็นในการยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อแบคทีเรียเช่นความเข้มข้นที่อาณานิคมจุลินทรีย์หรือไม่น้อยกว่าห้าอาณานิคมได้เห็นภายใน19-38 ชั่วโมง (Wang et al., 2009). 2.4.2 จำนวนเซลล์ทำงานได้ในสภาวะต่างๆอนุพันธ์ไคโตซานถูกกระจายตัวในน้ำซุป 10 มลสารอาหารที่มีความเข้มข้นสุดท้ายของ0.1% (โดยน้ำหนัก%) และเชื้อด้วยประมาณ107 โคโลนี / มิลลิลิตรของสายพันธุ์ของเชื้อแบคทีเรียและบ่มแล้วในอากาศแวดล้อมที่35 ◦C หลังจากบ่ม 1 ชั่วโมงที่หาร 50 ลิตรหรือเจือจางที่ถูกแพร่กระจายบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อซึ่งถูกบ่มที่35 ◦Cเป็นเวลา 24 ชั่วโมง จากนั้นตัวเลขของอาณานิคมนับ. ข้อมูลทั้งหมดที่ได้จากวิธีการอย่างน้อยสามการทดลองแบบคู่ขนานที่มีความแตกต่างในหมู่พวกเขาน้อยกว่า 5%
1 กรัมของ TMC 72 ชั่วโมงถูกเพิ่มเข้ามาใน 20 มล 42% วิธีการแก้ปัญหา NaOH วันที่ 30 ◦C,
ตามด้วยการเพิ่ม dropwise
โมโนคลอโรจนสุดท้ายความเข้มข้นของNaOH 18%
ปฏิกิริยาที่กินเวลานานต่างๆครั้ง แล้วค่า pH ที่ถูกปรับให้ 7 กับ HCl วิธีการแก้ปัญหาที่ได้รับการ
dialyzed กับน้ำปราศจากไอออนเป็นเวลา 3
วันโดยการเปลี่ยนน้ำครั้งเดียวต่อวันและจากนั้นแห้ง.
2.3 ลักษณะสเปกตรัม IR บันทึกด้วยเม็ด KBr ในเล NEXUS- 470 สเปกโตรมิเตอร์ สเปกตรัม 1H NMR วัดที่ 313 K ในสเปกโตรมิเตอร์ INOVA-600 ใช้ D2O เป็นตัวทำละลาย การวิเคราะห์ธาตุได้ดำเนินการกับวิเคราะห์ธาตุ Vario MICRO Thermalgravimetric วิเคราะห์ได้รับการดำเนินการโดยใช้ยูนิเวอร์แซ V2.4F TA วิเคราะห์ความร้อน การวิเคราะห์ได้อย่างต่อเนื่องภายใต้ preformed การไหลของก๊าซไนโตรเจนแห้งในอัตราความร้อน 20 ◦C / นาที. ระดับของ trimethylation สำหรับ TMC ได้รับการคำนวณโดยใช้ร่วมกันวิธีการหนึ่งของพื้นที่สูงสุดในสเปกตรัมNMR ตามสมการต่อไป, เอ็น , N - trimethylation% = [N (CH3) 3] [H2, H3, H4, H5, H6, H6?] × 6/9 × 100 (1) ที่ [N (CH3) 3] เป็นหนึ่งของ N ไม่ , N, N-เสื้อกล้าม trimethyl สูงสุด (i = 3.1 ppm) (Rúnarsson et al., 2007) C / N อัตราส่วนในข้อมูล EA ถูกนำมาใช้ในการประเมินระดับของการทดแทน (DS) ของอื่น ๆอนุพันธ์ไคโตซาน องศาทดแทนที่ได้รับในอัตราร้อยละ. 2.4 ทดสอบการต้านเชื้อแบคทีเรียสองวิธีที่ถูกนำมาใช้สำหรับการตรวจสอบการต้านเชื้อแบคทีเรียกิจกรรม: การกำหนดความเข้มข้นต่ำสุด (MIC) ในทั้งเจือจางเงื่อนไขพื้นฐานที่เป็นกรดและอ่อนแอและบัญชีของเซลล์ที่มีชีวิตหลังการรักษาด้วยไคโตซานและอนุพันธ์ในสภาพที่เป็นกรด. 2.4.1 ความมุ่งมั่นของ MIC MIC ถูกกำหนดโดยวิธีการที่แผ่นวุ้น (Sun et al., 2006) มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง ในวิธีการนี้กลุ่มตัวอย่างได้เตรียมที่ความเข้มข้น 1% (w / v) เบาแล้ว 121 ◦Cเป็นเวลา20 นาที ซ้ำเจือจางอนุกรมสองเท่าของแต่ละตัวอย่างถูกเพิ่มลงไปในน้ำซุปสารอาหาร (pH 5.5 หรือค่า pH 7.2) ความเข้มข้น 0.4%, 0.2%, 0.1%, 0.05%, 0.025% 0.0125% 0.00625% และ 0.00313% (w / v ). ค่า pH มีการปรับขึ้น 1% กรดอะซิติกหรือโซเดียมไฮดรอกไซ 1%. วัฒนธรรมของแบคทีเรียแต่ละถูกเจือจางด้วยน้ำกลั่นปลอดเชื้อเพื่อ 105-106 CFU / มิลลิลิตร ห่วงของการระงับแต่ละเชื้อในสื่อสารอาหารที่มีตัวอย่างหรือการควบคุมการเพิ่มและบ่มแล้วที่35 ◦Cเป็นเวลา 48 ชั่วโมง ที่ล่าสุดอาณานิคมนับค่า MIC. การทดลองซ้ำสามครั้ง MIC ถูกกำหนดเป็นความเข้มข้นต่ำสุดที่จำเป็นในการยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อแบคทีเรียเช่นความเข้มข้นที่อาณานิคมจุลินทรีย์หรือไม่น้อยกว่าห้าอาณานิคมได้เห็นภายใน19-38 ชั่วโมง (Wang et al., 2009). 2.4.2 จำนวนเซลล์ทำงานได้ในสภาวะต่างๆอนุพันธ์ไคโตซานถูกกระจายตัวในน้ำซุป 10 มลสารอาหารที่มีความเข้มข้นสุดท้ายของ0.1% (โดยน้ำหนัก%) และเชื้อด้วยประมาณ107 โคโลนี / มิลลิลิตรของสายพันธุ์ของเชื้อแบคทีเรียและบ่มแล้วในอากาศแวดล้อมที่35 ◦C หลังจากบ่ม 1 ชั่วโมงที่หาร 50 ลิตรหรือเจือจางที่ถูกแพร่กระจายบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อซึ่งถูกบ่มที่35 ◦Cเป็นเวลา 24 ชั่วโมง จากนั้นตัวเลขของอาณานิคมนับ. ข้อมูลทั้งหมดที่ได้จากวิธีการอย่างน้อยสามการทดลองแบบคู่ขนานที่มีความแตกต่างในหมู่พวกเขาน้อยกว่า 5%
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.2.3 . การสังเคราะห์ tmcmc
1 G ของ TMC 72 H เพิ่ม 20 มล. 42 % สารละลายโซเดียมไฮดรอกไซด์ที่ 30 ◦ C
ตามด้วยการเพิ่ม monochloroacetate dropwise จนความเข้มข้นสุดท้าย
ของ NaOH เป็น 18 % ปฏิกิริยาต่าง ๆนานครั้ง
แล้วปรับ pH 7 กับ HCL . สารละลายที่ผ่านคล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำกับ
3 วันเปลี่ยนน้ำครั้ง
วันแล้วแห้ง .
2.3 ลักษณะ
IR spectra ที่ถูกบันทึกไว้กับ KBR เม็ดบน nicolet Nexus -
470 สเปกโตรมิเตอร์ 1H NMR สเปกตรัม และวัดที่ 313 K บน
inova-600 สเปกโตรมิเตอร์โดยใช้ d2o เป็นตัวทำละลาย
วิเคราะห์ธาตุได้ด้วย Vario ไมโครธาตุที่วิเคราะห์ การวิเคราะห์ thermalgravimetric
ใช้ใช้ทา v2.4f สากลเชิงวิเคราะห์ การวิเคราะห์อย่างต่อเนื่อง
2 ภายใต้การไหลของก๊าซไนโตรเจนในอัตราความร้อน 20 ◦ C / นาที
ระดับ trimethylation สำหรับ TMC คือคำนวณโดยใช้วิธีการพื้นที่ส่วนหนึ่ง
รวมสูงสุดใน NMR สเปกตรัมเพื่อตามสมการดังนี้
N , N , N − trimethylation %
= [ N ( CH3 ) 3
[ H2 ] , H3 , H4 , h5 , H6 H6
] × 6 / 9 × 100 ( 1 )
ที่ไหน [ N ( CH3 ) 3 ] เป็นส่วนหนึ่งของ N , N , n-trimethyl เสื้อกล้าม
ยอด ( ı = 3.1 ppm ) ( R ú narsson et al . ,2007 ) C / N ratio ใน EA ข้อมูล
ถูกใช้เพื่อประเมินระดับของการแทนที่ ( DS ) ของสัญญาซื้อขายล่วงหน้าอื่น
ไคโตซาน ใช้องศาได้รับร้อยละ .
2.4 .
ทดสอบแบคทีเรียสองวิธีที่ใช้สำหรับการตรวจสอบฤทธิ์ต้านแบคทีเรีย
: การกําหนดการแสดงนิทรรศการ ( MIC )
2 และเงื่อนไขพื้นฐานที่อ่อนแอและกรดเจือจางได้
บัญชีมือถือหลังจากการรักษาด้วยไคโตซานและอนุพันธ์ของมันในสภาพที่เป็นกรด
เครื่องมือกำจัดเพื่อย้าย . หาไมค์
ไมค์ถูกกําหนดโดยวิธี agar plate ( Sun et al . , 2006 )
ที่มีการปรับเปลี่ยน ในวิธีการนี้ นำไป
ที่ความเข้มข้น 1% ( w / v ) แล้วสังเคราะห์ที่ 121 ◦ C
20 นาที ซ้ำสองเท่าต่อเนื่องวิธีการแต่ละจำนวน
เพิ่มซุปสารอาหาร ( pH 5.5 หรือ pH 72 ) ความเข้มข้น 0.4 %
0.2% 0.1% 0.05 % , 0.025 % ตัด % 0.00625 % และ 0.00313 % ( w / v )
1 % ปรับ pH ด้วยกรด หรือ 1 % โซเดียม ไฮดรอกไซด์
วัฒนธรรมของแต่ละเจือจางด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อแบคทีเรีย
105 - 106 cfu / ml ห่วงของแต่ละแขนเป็นเชื้อในอาหารที่มีตัวอย่าง
สารอาหารหรือควบคุมการเพิ่มและจากนั้นบ่มที่อุณหภูมิ 35 ◦
เป็นเวลา 48 ชั่วโมง ในที่สุดอาณานิคมถูกนับไมค์ค่า
การทดลองซ้ำ 3 ครั้ง ไมค์ถูกกำหนดความเข้มข้นต่ำสุดที่ยับยั้ง
ต้องการการเจริญเติบโตของแบคทีเรีย เช่นความเข้มข้น
ที่ไม่มีจุลินทรีย์อาณานิคมหรือน้อยกว่า
5 อาณานิคมคือมองเห็นได้ภายใน 19 – 38 H ( Wang et al . , 2009 ) .
2.4.2 . ใช้นับเซลล์ที่ต่างเงื่อนไข
ไคโตซานและการกระจายตัวใน 10 มล. สารอาหารซุป
ที่มีความเข้มข้นสุดท้าย 0.1 % ( โดยน้ำหนัก ) และใส่
ประมาณ 107 CFU / ml ของสายพันธุ์แบคทีเรีย แล้วบ่ม
ในอากาศที่ 35 ◦ C หลังจาก 1 ชั่วโมง ระยะเวลา 50 L
ส่วนลงตัวหรือเจือจางได้แพร่กระจายบนแผ่นวุ้น สารอาหารที่ถูกบ่ม
ที่ 22 ◦ C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง แล้วตัวเลขของอาณานิคมได้ถูกนับ .
ข้อมูลทั้งหมดเป็นค่าเฉลี่ยจากอย่างน้อยสามขนานการทดลอง
กับความขัดแย้งในหมู่พวกเขาน้อยกว่า 5%
1 G ของ TMC 72 H เพิ่ม 20 มล. 42 % สารละลายโซเดียมไฮดรอกไซด์ที่ 30 ◦ C
ตามด้วยการเพิ่ม monochloroacetate dropwise จนความเข้มข้นสุดท้าย
ของ NaOH เป็น 18 % ปฏิกิริยาต่าง ๆนานครั้ง
แล้วปรับ pH 7 กับ HCL . สารละลายที่ผ่านคล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำกับ
3 วันเปลี่ยนน้ำครั้ง
วันแล้วแห้ง .
2.3 ลักษณะ
IR spectra ที่ถูกบันทึกไว้กับ KBR เม็ดบน nicolet Nexus -
470 สเปกโตรมิเตอร์ 1H NMR สเปกตรัม และวัดที่ 313 K บน
inova-600 สเปกโตรมิเตอร์โดยใช้ d2o เป็นตัวทำละลาย
วิเคราะห์ธาตุได้ด้วย Vario ไมโครธาตุที่วิเคราะห์ การวิเคราะห์ thermalgravimetric
ใช้ใช้ทา v2.4f สากลเชิงวิเคราะห์ การวิเคราะห์อย่างต่อเนื่อง
2 ภายใต้การไหลของก๊าซไนโตรเจนในอัตราความร้อน 20 ◦ C / นาที
ระดับ trimethylation สำหรับ TMC คือคำนวณโดยใช้วิธีการพื้นที่ส่วนหนึ่ง
รวมสูงสุดใน NMR สเปกตรัมเพื่อตามสมการดังนี้
N , N , N − trimethylation %
= [ N ( CH3 ) 3
[ H2 ] , H3 , H4 , h5 , H6 H6
] × 6 / 9 × 100 ( 1 )
ที่ไหน [ N ( CH3 ) 3 ] เป็นส่วนหนึ่งของ N , N , n-trimethyl เสื้อกล้าม
ยอด ( ı = 3.1 ppm ) ( R ú narsson et al . ,2007 ) C / N ratio ใน EA ข้อมูล
ถูกใช้เพื่อประเมินระดับของการแทนที่ ( DS ) ของสัญญาซื้อขายล่วงหน้าอื่น
ไคโตซาน ใช้องศาได้รับร้อยละ .
2.4 .
ทดสอบแบคทีเรียสองวิธีที่ใช้สำหรับการตรวจสอบฤทธิ์ต้านแบคทีเรีย
: การกําหนดการแสดงนิทรรศการ ( MIC )
2 และเงื่อนไขพื้นฐานที่อ่อนแอและกรดเจือจางได้
บัญชีมือถือหลังจากการรักษาด้วยไคโตซานและอนุพันธ์ของมันในสภาพที่เป็นกรด
เครื่องมือกำจัดเพื่อย้าย . หาไมค์
ไมค์ถูกกําหนดโดยวิธี agar plate ( Sun et al . , 2006 )
ที่มีการปรับเปลี่ยน ในวิธีการนี้ นำไป
ที่ความเข้มข้น 1% ( w / v ) แล้วสังเคราะห์ที่ 121 ◦ C
20 นาที ซ้ำสองเท่าต่อเนื่องวิธีการแต่ละจำนวน
เพิ่มซุปสารอาหาร ( pH 5.5 หรือ pH 72 ) ความเข้มข้น 0.4 %
0.2% 0.1% 0.05 % , 0.025 % ตัด % 0.00625 % และ 0.00313 % ( w / v )
1 % ปรับ pH ด้วยกรด หรือ 1 % โซเดียม ไฮดรอกไซด์
วัฒนธรรมของแต่ละเจือจางด้วยน้ำกลั่นฆ่าเชื้อแบคทีเรีย
105 - 106 cfu / ml ห่วงของแต่ละแขนเป็นเชื้อในอาหารที่มีตัวอย่าง
สารอาหารหรือควบคุมการเพิ่มและจากนั้นบ่มที่อุณหภูมิ 35 ◦
เป็นเวลา 48 ชั่วโมง ในที่สุดอาณานิคมถูกนับไมค์ค่า
การทดลองซ้ำ 3 ครั้ง ไมค์ถูกกำหนดความเข้มข้นต่ำสุดที่ยับยั้ง
ต้องการการเจริญเติบโตของแบคทีเรีย เช่นความเข้มข้น
ที่ไม่มีจุลินทรีย์อาณานิคมหรือน้อยกว่า
5 อาณานิคมคือมองเห็นได้ภายใน 19 – 38 H ( Wang et al . , 2009 ) .
2.4.2 . ใช้นับเซลล์ที่ต่างเงื่อนไข
ไคโตซานและการกระจายตัวใน 10 มล. สารอาหารซุป
ที่มีความเข้มข้นสุดท้าย 0.1 % ( โดยน้ำหนัก ) และใส่
ประมาณ 107 CFU / ml ของสายพันธุ์แบคทีเรีย แล้วบ่ม
ในอากาศที่ 35 ◦ C หลังจาก 1 ชั่วโมง ระยะเวลา 50 L
ส่วนลงตัวหรือเจือจางได้แพร่กระจายบนแผ่นวุ้น สารอาหารที่ถูกบ่ม
ที่ 22 ◦ C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง แล้วตัวเลขของอาณานิคมได้ถูกนับ .
ข้อมูลทั้งหมดเป็นค่าเฉลี่ยจากอย่างน้อยสามขนานการทดลอง
กับความขัดแย้งในหมู่พวกเขาน้อยกว่า 5%
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- เพื่อให้พ่อแม่ผู้ที่ไม่สามารถเลี้ยงเด็กไ
- มีความสัมพันธ์กับชาวต่างชาติได้ง่ายขึ้น
- งอ
- Sacrifice to the public
- คุณอ่านหนังสือก่อนได้นะฉันไม่กวนแล้วพรุ่
- ฉันรักคุณ ฉันไม่ได้ตั้งใจทำให้คุณเจ็บ
- 我都認同.你說的！^^
- เขาได้เป็นผู้นำกองกำลังติดอาวุธก่อวินาศก
- วันหนึ่งเขาก็จะหายไป
- 2. categorical ban on smoking in public
- การออกบัตรสมาชิก
- aware
- 3. HIGH/LOW CONTEXTCOMMUNICATION STYLESH
- สาเหตุหลัก
- The media were autoclaved at 121°C for 1
- ฉันผิดมากเลยหรอ? ฉันเป็นผู้หญิงเลวหรอ? ถ
- ความประทับใจ
- วันนี้ ฉันขอโทษนะ ที่ไปกินเบียร์ไม่ได้ ฝ
- This assessment provides the first wall-t
- ขอให้มีความสุขมากๆ
- มีการโต้แย้งกันระหว่างกลุ่มบุคคลที่เห็นด
- วันนี้ ฉันขอโทษนะ ที่ไปกินเบียร์ไม่ได้ ฝ
- My sister enjoys listening to classical
- คุณจะทำตัวอย่างไร เมื่อคุณได้ไปอยู่กับ h
