PHB positive strains were further e

PHB positive strains were further evaluated by shake flask
screening in the nitrogen-deficient MSM medium containing only
0.89 g/L (NH4)2SO4 and 15 g/L glucose or xylose. The isolated
strains were cultivated at 30 C in 100-mL flasks containing
30 mL media on a rotary shaker at 150 rpm for 60 h. PHB was extracted
as described in Section 2.6 and PHB content was measured
as described in Section 2.7.
PHB positive strains were identified by 16S rDNA sequencing.
The genomic DNA was extracted according to the standard protocol
described by Moore et al. (2004). Full-length 16S rDNA sequences
were amplified by PCR using primers 27F (50
-AGA GTT
TGA TCM TGG CTC AG-30
) and 1492R (50
-TAC GGY TAC CTT GTT
ACG ACT T-30
). The PCR products were then separated by agarose
gel electrophoresis, purified using Qiagen PCR Purification Kit
according the manufacturer’s instruction and sequenced by ATI
biotech Pte Ltd., Singapore.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สายพันธุ์บวก PHB
ได้รับการประเมินต่อไปโดยการสั่นของขวดการตรวจคัดกรองในกลุ่มชายรักชายกลางขาดไนโตรเจนที่มีเพียง
0.89 กรัม / ลิตร (NH4) 2SO4 และ 15 g / L หรือกลูโคสไซโล ที่แยกสายพันธุ์ที่ได้รับการปลูกฝังวันที่ 30 ซีในขวด 100 มิลลิลิตรที่มี 30 มิลลิลิตรสื่อบนเครื่องปั่นหมุนที่ 150 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 60 ชั่วโมง PHB ถูกสกัดตามที่อธิบายไว้ในข้อ2.6 และเนื้อหา PHB วัดตามที่อธิบายไว้ในมาตรา2.7. สายพันธุ์บวก PHB ถูกระบุลำดับ 16S rDNA. ดีเอ็นเอจีโนมถูกสกัดตามโปรโตคอลมาตรฐานอธิบายโดยมัวร์และอัล (2004) ความยาวเต็ม 16S rDNA ลำดับถูกขยายโดยวิธี PCR โดยใช้ไพรเมอร์ 27 (50 -AGA GTT TGA TCM CTC TGG AG-30) และ 1492R (50 -TAC GGY TAC CTT GTT ACG ACT T-30) ผลิตภัณฑ์ PCR ถูกแยกออกแล้วโดย agarose ข่าวคราวบริสุทธิ์โดยใช้วิธี PCR Qiagen บริสุทธิ์ชุดตามคำแนะนำของผู้ผลิตและจัดลำดับโดยATI เทคโนโลยีชีวภาพ Pte Ltd. ประเทศสิงคโปร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

PHB บวกสายพันธุ์ ประเมินโดยการต่อขวดเขย่า
ไนโตรเจนในอาหารที่มีการเพิ่มเพียง
0.89 กรัม / ลิตร ( NH4 ) 2so4 15 กรัม / ลิตรและกลูโคสหรือน้ำตาลไซโลส . แยก
สายพันธุ์ปลูกที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส ใน 100 มิลลิลิตร ขวด 30 ml ประกอบด้วย
สื่อบนเครื่องปั่นหมุนที่ความเร็ว 150 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 60 ชั่วโมง PHB สกัด
ตามที่อธิบายไว้ในส่วน 2.6 และ PHB เนื้อหาวัด
ตามที่อธิบายไว้ในส่วนปี
PHB บวกสายพันธุ์ โดยระบุลำดับ 16S rDNA .
ดีเอ็นเอถูกสกัดตามมาตรฐานโปรโตคอล
( Moore et al . ( 2004 ) เต็มความยาว 16S rDNA ลำดับ
ถูกขยายโดยวิธี PCR โดยใช้ primers 27f ( 50
-
AGA gtt TGA TCM tgg CTC ag-30
) และ 1492r ( 50
- แทคทำ G และทั่วโลก gtt ACG ลบ 30

) ที่เพิ่มปริมาณแล้วแยกด้วยเจล ,
,บริสุทธิ์ใช้เชื้อบริสุทธิ์เพิ่มชุด
ตามคำสั่งของผู้ผลิต และทำการพัฒนาโดย ATI

Pte Ltd สิงคโปร์