3.2. Content of saponin B and DDMP saponin in peas
The results from the HPTLC-ESI- and MALDI-TOF-MS analyses
indicated variety-specific differences in the saponin concentration.
There were also differences between hulls and peeled seeds which
thereupon were quantified by HPTLC. The content of saponin B and
DDMP saponin was determined and added up to the total saponin
Fig. 2. Separation of saponins from six different pea varieties by HPTLC. Postchromatographic
derivatization with p-anisaldehyde sulphuric acid reagent. Documentation
at (A) UV 366 nm and (B) white light. Lanes 1–5: soyasaponin I standard (c = 0.125–
0.625 mg/mL), lanes 6–11: pea hulls, lanes 12–17: peeled peas. Lane 6/12: ‘Salamanca’
(Sal), lane 7/13: ‘Rocket’ (Roc), lane 8/14: ‘Navarro’ (Nav), lane 9/15: ‘Starter’ (Sta), lane
10/16: ‘James’ (Jam), and lane 11/17: ‘Gregor’ (Gre). (C) Densitometric evaluation at 545
nm of lane 6, AUC: area under the curve, and Rf: retardation factor.
6 V. Reim, S. Rohn / Food Research International 76 (2015) 3–10
amount. For a multiple determination the samples were prepared five
times. Soyasaponin I from soybeans was used as a standard. Due to
the instability of the DDMP conjugate, an adequate reference compound
is not commercially available. For this reason, the content of DDMP
saponin was only determined approximately using the calibration
curve of saponin B as well.
The working range of soyasaponin I was defined to be linear
between 0.125 mg/mL and 0.625 mg/mL with a suitable average
coefficient of determination R2 = 0.993 ± 0.002. The limit of detection
(LOD) and limit of quantification (LOQ) were calculated to be 0.06 ±
0.01 mg/mL and 0.21 ± 0.01 mg/mL respectively. Furthermore, the
analysis revealed a recovery rate of 90 ± 4%. The measuring precision
within (repeatability) and between (reproducibility) batches was
obtained for soyasaponin I standard (c = 0.125–0.625 mg/mL) as well
as for the variety ‘Rocket’ (hulls). The relative standard deviation within
batches of soyasaponin I standard and in the pea sample did not exceed
9%. In contrast, the reproducibility of the measurement revealed a
relative standard deviation of maximum 12% (standard) and 11%
(sample).
Quantitative HPTLC analysis confirmed differences in the content of
saponin B and DDMP saponin in the six pea varieties investigated. Both
saponins were detected in the hulls and the peeled peas, as well, whereas
saponin B predominated (Fig. 4)
3.2. เนื้อหาของ saponin B และ DDMP saponin ในถั่วผลลัพธ์จากการวิเคราะห์ HPTLC ESI - และ MALDI-TOF-MSระบุความแตกต่างหลากหลายเฉพาะในความเข้มข้นของ saponinนอกจากนี้ยังมีความแตกต่างระหว่าง hulls peeled เมล็ดซึ่งthereupon ถูก quantified โดย HPTLC เนื้อหาของ saponin B และกำหนด และเพิ่มค่า saponin รวม DDMP saponinFig. 2 แยกของ saponins จากพันธุ์ต่าง ๆ ถั่วหกโดย HPTLC Postchromatographicderivatization กับรีเอเจนต์กรดซัลฟุริก p anisaldehyde เอกสารประกอบที่ (A) UV 366 nm และ (B) สีขาวแสง ถนนหนทาง 1-5: soyasaponin ผมมาตรฐาน (c = 0.125 –0.625 mg/mL), ถนนหนทาง 6 – 11: hulls ถั่ว ถนนหนทาง 12 – 17: ปอกเปลือกถั่ว 6/12 เลน: 'ซาลามังก้า'(แซล), เลน 7/13: 'จรวด' (Roc), เลน 8/14: 'Navarro' (Nav), เลน 9/15: 'เริ่มต้น' (สตา) เลน10/16: 'James' (แยม), และเลน 11/17: 'เก' (Gre) ประเมินผล (C) Densitometric ที่ 545nm ของเลน 6, AUC: พื้นที่ภายใต้โค้ง และ Rf: ชะลอตัว6 V. Reim, S. Rohn / อาหารวิจัยนานาชาติ 76 (2015) 3 – 10ยอดเงิน สำหรับการกำหนดหลาย อย่างได้เตรียมไว้ห้าครั้ง Soyasaponin จากถั่วเหลืองที่เคยเป็นมาตรฐาน เนื่องความไม่แน่นอนของค่าสังยุค DDMP สารประกอบการอ้างอิงอย่างเพียงพอไม่ได้ใช้ในเชิงพาณิชย์ ด้วยเหตุนี้ เนื้อหาของ DDMPsaponin ถูกกำหนดใช้การปรับเทียบประมาณเท่านั้นเส้นโค้งของ saponin B เช่นช่วงทำงานของ soyasaponin ที่ผมถูกกำหนดให้เป็นเส้นตรงระหว่าง 0.125 mg/mL และ 0.625 mg/mL มีค่าเฉลี่ยที่เหมาะสมสัมประสิทธิ์ของการกำหนด R2 = 0.993 ± 0.002 ขีดจำกัดของการตรวจสอบ(ลอด) และจำนวนนับ (LOQ) คำนวณได้เท่ากับ 0.06 ±0.01 mg/mL และ 0.21 ± 0.01 mg/mL ตามลำดับ นอกจากนี้ การวิเคราะห์เปิดเผยอัตรากู้ 90 ± 4% ความแม่นยำในการวัดภายใน (ทำซ้ำใน) และระหว่าง (reproducibility) ชุดได้ soyasaponin ผมมาตรฐาน (c = 0.125-0.625 mg/mL) เช่นเป็นหลาย 'จรวด' (hulls) ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์ภายในชุดของผมมาตรฐาน และจากตัวอย่างถั่วไม่เกิน soyasaponin9% ในทางตรงกันข้าม การเปิดเผยของ reproducibility ของการประเมินการค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานสัมพัทธ์สูงสุด 12% (มาตรฐาน) และ 11%(ตัวอย่าง)เชิงปริมาณวิเคราะห์ HPTLC ยืนยันความแตกต่างในเนื้อหาของsaponin B และ DDMP saponin ในพันธุ์ถั่ว 6 ตรวจสอบ ทั้งสองอย่างsaponins พบ hulls ที่และที่ peeled ถั่ว เช่น ในขณะที่saponin B predominated (Fig. 4)
การแปล กรุณารอสักครู่..
