The rapidly advancing field of plan

The rapidly advancing field of plant synthetic biology requires transforming plants with multiple genes. This has sparked a growing interest in flexible plant transformation vectors, which can be used for multi-gene transformations. We have developed a novel binary vector series, named the PC-GW series (GenBank: KP826769–KP826773), for Agrobacterium-mediated plant transformation. The PC-GW vectors use the pCAMBIA vector backbone, and contain NPTII, hpt, bar, mCherry or egfp genes as selectable markers for plant transformation. In a modified multiple cloning site (MCS) of the T-DNA region, we have placed the attR1, attR2 and ccdB sequences for rapid cloning of one to four genes by Gateway™-assisted recombination. In addition, we have introduced four meganuclease sites, and other restriction sites for multi-gene vector construction. Finally, we have placed a CaMV 35S promoter and a 35S terminator on the 5′ and 3′ ends of the MCS. The CaMV 35S promoter is flanked by PstI restriction sites that can be used to replace it with another promoter sequence if needed. The PC-GW vectors provide choices for selectable markers, cloning methods, and can accommodate up to eight gene constructs in a single T-DNA, thereby significantly reducing the number of transformations or crosses needed to generate multi-transgene expressing plants.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

อย่างรวดเร็ว advancing ด้านชีววิทยาสังเคราะห์พืชต้องเปลี่ยนพืช มีหลายยีน นี้ได้จุดประกายสนใจเติบโตในพืชยืดหยุ่นเปลี่ยนแปลงเวกเตอร์ ซึ่งสามารถใช้สำหรับการแปลงหลายยีน เราได้พัฒนาชุดเวกเตอร์ฐานนวนิยาย ชื่อชุด PC GW (GenBank: KP826769 – KP826773), สำหรับพืช mediated อโกรแบคทีเรียมการเปลี่ยนแปลง เวกเตอร์ PC GW ใช้แกนหลักแบบเวกเตอร์ pCAMBIA และประกอบด้วยยีน NPTII, hpt บาร์ mCherry หรือ egfp เป็นเครื่องหมายที่เลือกสำหรับการแปลงพืช ในการปรับเปลี่ยน หลาย cloning ไซต์ (เอ็มซี) ภาค T-ดีเอ็นเอ เราวางลำดับ attR1, attR2 และ ccdB สำหรับการอย่างรวดเร็วโคลนของยีนหนึ่ง-สี่โดย recombination เกตเวย์™ช่วย นอกจากนี้ เราได้แนะนำเว็บไซต์ meganuclease 4 และไซต์อื่น ๆ ข้อจำกัดสำหรับยีนหลายเวกเตอร์ก่อสร้าง สุดท้าย เราได้ทำโปรโมเตอร์ CaMV 35S และเทอร์มิเนเตอร์ที่ 35S บนปลาย 5′ และ 3′ ของเอ็มซี โปรโมเตอร์ 35S CaMV เป็นนัก PstI จำกัดไซต์ที่สามารถใช้เพื่อแทนที่ ด้วยลำดับโปรโมเตอร์อื่นถ้าจำเป็น เวกเตอร์ PC GW ให้เลือกเครื่องหมายเลือก วิธี โคลน และสามารถรองรับโครงสร้างยีนแปดในเดียว T-ดีเอ็นเอ ลดจำนวนของแปลงหรือตัดที่จำเป็นสำหรับการสร้างพืชแสดงหลาย transgene บ๊อกซ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สนามก้าวหน้าอย่างรวดเร็วของพืชชีววิทยาสังเคราะห์ต้องเปลี่ยนพืชที่มียีนหลาย นี้ได้จุดประกายความสนใจเพิ่มขึ้นในพาหะเปลี่ยนแปลงพืชที่มีความยืดหยุ่นซึ่งสามารถนำมาใช้สำหรับการแปลงหลายยีน เราได้พัฒนาชุดเวกเตอร์ไบนารีนวนิยายชื่อชุด PC-GW (GenBank: KP826769-KP826773) สำหรับการเปลี่ยนแปลงพืช Agrobacterium พึ่ง เวกเตอร์ PC-GW ใช้กระดูกสันหลังเวกเตอร์ pCAMBIA และมี NPTII, hpt บาร์ mCherry หรือยีน EGFP เป็นเครื่องหมายเลือกสำหรับการเปลี่ยนแปลงของพืช ในเว็บไซต์ที่มีการปรับเปลี่ยนหลายโคลน (MCS) ของภูมิภาค T-DNA เราได้วาง attR1, attR2 และลำดับ ccdB สำหรับการโคลนอย่างรวดเร็วของ 1-4 ยีนโดยเกตเวย์™รวมตัวกันอีก -assisted นอกจากนี้เราได้นำสี่เว็บไซต์ meganuclease และเว็บไซต์อื่น ๆ ที่มีข้อ จำกัด ในการก่อสร้างเวกเตอร์หลายยีน สุดท้ายเราได้วางโปรโมเตอร์ CaMV 35S และ 35S เทอร์มิในวันที่ 5 และ 3 'สิ้นสุดของพิธีกร โปรโมเตอร์ CaMV 35S ถูกขนาบข้างด้วย PstI เว็บไซต์ข้อ จำกัด ที่สามารถนำมาใช้เพื่อแทนที่ด้วยลำดับก่อการอีกหากจำเป็น เวกเตอร์ PC-GW ให้ทางเลือกสำหรับเครื่องหมายเลือกวิธีการโคลนและสามารถรองรับได้ถึงแปดโครงสร้างของยีนใน T-DNA เดียวจึงช่วยลดจำนวนของการเปลี่ยนแปลงหรือไม้กางเขนจำเป็นในการสร้างหลายยีนแสดงพืช

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อย่างรวดเร็ว advancing ด้านชีววิทยาสังเคราะห์พืชต้องเปลี่ยนพืชมีหลายยีน นี้ได้จุดประกายความสนใจเพิ่มขึ้นในเวกเตอร์พืชเปลี่ยนแปลงยืดหยุ่นซึ่งสามารถใช้สำหรับการแปลงหลายยีน . เราได้พัฒนาชุดเวกเตอร์ไบนารีใหม่ ชื่อ pc-gw ชุด ( ขนาด : kp826769 – kp826773 ) สำหรับ Agrobacterium โดยแปลงพืชเวกเตอร์ฟรีเวกเตอร์ที่ pc-gw ใช้ pcambia กระดูกสันหลังและมี nptii HPT , บาร์ , mcherry หรือ egfp ยีนเป็นเครื่องหมายที่เลือกสำหรับการเปลี่ยนแปลงของพืช ในการดัดแปลงหลายเว็บไซต์ ( MCS ) ของ t-dna ภูมิภาค เราได้วาง attr1 attr2 ccdb , และลำดับสำหรับการอย่างรวดเร็วของหนึ่งถึงสี่ประตู™ยีนช่วยการ . นอกจากนี้ เราได้แนะนำ meganuclease 4 เว็บไซต์และเว็บไซต์ข้อ จำกัด อื่น ๆสำหรับการก่อสร้างเวกเตอร์ > ของหลาย สุดท้าย เราได้วาง 35S CaMV promoter และ 35s Terminator 3 ใน 5 นั้นได้รับปลายของ MCS ที่ขนาบข้างด้วย 35S CaMV promoter ทวีคูณจำกัดเว็บไซต์ที่สามารถใช้เพื่อแทนที่ด้วยอื่นการลำดับ ถ้าจำเป็น เวกเตอร์ที่ pc-gw ให้ตัวเลือกเพื่อเลือกเครื่องหมาย , โคลนวิธีการและสามารถรองรับได้ถึงแปดยีนโครงสร้างใน t-dna เดียว จึงช่วยลดจำนวนของการแปลงหรือตัดต้องสร้างหลายยีนแสดงพืช .