To measure the loading efficiency o

To measure the loading efficiency of DNA, 16 μl of the chitosan–DNA NP was spun down at 15,000 rpm for 30 min (Avanti J-25 centrifuge, Beckman Coulter Inc., Fullerton, CA, USA). The supernatant was mixed with Hoechst 33258 (0.1 μg/ml) at a ratio of 1:1 (v/v) and measured for DNA content in the fluorimeter at excitation and emission wavelengths of 350 and 455 nm, respectively. Hoechst 33258 is a bisbenzimidazole derivative that exhibits enhanced fluorescence upon binding to the A–T rich regions of double stranded DNA [17], thereby allowing for DNA quantification in solutions and cells by fluorometry [18]. DNA loading efficiency (%) for each batch of NP was the amount of condensed DNA (difference between the total amount of DNA used for the NP preparation and the amount of non-entrapped DNA remaining in the supernatant) calculated as a percent of the total amount of DNA used.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การวัดประสิทธิภาพการโหลดของดีเอ็นเอ μl 16 ของ NP ไคโตซานดีเอ็นเอถูกจัดปั่นลงที่ 15000 rpm ใน 30 นาที (เรียนโรส J-25 เครื่องหมุนเหวี่ยง Beckman Coulter Inc. ฟูลเลอร์ตัน CA, USA) Supernatant ที่ผสมกับอย่างไร Hoechst 33258 (0.1 μg/ml) ในอัตราส่วน 1:1 (v/v) และวัดเนื้อหาดีเอ็นเอใน fluorimeter ที่ความยาวคลื่นในการกระตุ้นและปล่อยก๊าซของ 350 และ 455 nm ตามลำดับ อย่างไร Hoechst 33258 เป็นอนุพันธ์ของ bisbenzimidazole ที่จัดแสดง fluorescence เพิ่มเมื่อรวมกับภูมิภาค A-T อุดมไปด้วยเอ็นตกค้างคู่ [17], จึงอนุญาตให้นับดีเอ็นเอในเซลล์และการแก้ไขปัญหา โดย fluorometry [18] ดีเอ็นเอที่โหลดประสิทธิภาพ (%) แต่ละชุดของ NP จำนวนดีเอ็นเอแบบบีบ (ส่วนต่างระหว่างยอดรวมของดีเอ็นเอที่ใช้สำหรับเตรียมสอบ NP และยอดเงินที่เหลืออยู่ใน supernatant ที่เอ็นไม่เก็บกัก) คำนวณเป็นเปอร์เซ็นต์ของยอดเงินรวมของดีเอ็นเอที่ใช้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การวัดประสิทธิภาพในการโหลดของดีเอ็นเอ 16 ไมโครลิตรของไคโตซานดีเอ็นเอ NP ก็หมุนตัวลงที่ 15,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 นาที (Avanti J-25 centrifuge, Beckman Coulter อิงค์ Fullerton, CA, USA) สารละลายที่ได้รับการผสมกับ Hoechst 33258 (0.1 g / ml) ในอัตราส่วน 1: 1 (v / v) และวัดปริมาณดีเอ็นเอใน fluorimeter ในการกระตุ้นและการปล่อยความยาวคลื่น 350 นาโนเมตรและ 455 ตามลำดับ Hoechst 33,258 เป็นอนุพันธ์ bisbenzimidazole ที่แสดงเพิ่มเรืองแสงเมื่อผูกพันกับ A-T ภูมิภาคท​​ี่อุดมไปด้วยดีเอ็นเอควั่นคู่ [17] ซึ่งจะช่วยให้สามารถปริมาณดีเอ็นเอในการแก้ปัญหาและเซลล์โดย fluorometry [18] มีประสิทธิภาพในการโหลดดีเอ็นเอ (%) สำหรับชุดของ NP แต่ละปริมาณของดีเอ็นเอย่อ (ผลต่างระหว่างจำนวนของดีเอ็นเอที่ใช้สำหรับการเตรียมความพร้อม NP และปริมาณของดีเอ็นเอที่ไม่เก็บกักเหลืออยู่ในสารละลายที่) คิดเป็นร้อยละของจำนวนที่ ปริมาณของดีเอ็นเอที่ใช้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อวัดประสิทธิภาพการโหลดของดีเอ็นเอ 16 μ L ของไคโตซาน–ดีเอ็นเอ NP คือปั่นลงมาที่ 15000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 นาที ( ลุกขึ้น j-25 centrifuge , Beckman Coulter อิงค์ , Fullerton , CA , USA ) ที่นำ มาผสมกับ Hoechst 33258 ( 0.1 μ g / ml ) ในอัตราส่วน 1 : 1 ( v / v ) และวัดหาดีเอ็นเอ เนื้อหาใน fluorimeter ที่กระตุ้นและการปล่อยความยาวคลื่น 350 และ 455 นาโนเมตรbisbenzimidazole Hoechst 33258 เป็นอนุพันธ์ที่แสดงการเพิ่มขึ้นเมื่อผูกกับ A และ T รวยภูมิภาคของคู่เกลียวดีเอ็นเอ [ 17 ] จึงอนุญาตให้ปริมาณดีเอ็นเอในเซลล์และโซลูชั่น fluorometry [ 18 ]ดีเอ็นเอประสิทธิภาพการโหลด ( % ) สำหรับแต่ละชุดของ NP คือตัวของดีเอ็นเอ ( ความแตกต่างระหว่างยอดรวมของดีเอ็นเอที่ใช้สำหรับการเตรียมการและปริมาณของ NP ไม่กักดีเอ็นเอที่เหลืออยู่ในน่าน ) คำนวณเป็นเปอร์เซ็นต์ของยอดเงินรวมของดีเอ็นเอที่ใช้