effects. Previous studies from our

effects. Previous studies from our laboratory and others show that exposure
of cells to HNE results in extensive protein modification [43,44].
Early studies to identify protein adducts relied largely on 2D-gel electrophoresis
coupled by Western blotting using antibodies specific for
HNE. This approach is useful for determining if a particular protein of
interest is adducted. However, the limitation of Western blotting is
that it does not allow the global analysis of potential electrophile
protein targets. Thus, a considerable obstacle in defining the role of
electrophile adduction in cell biology is the limitation in our ability to
monitor electrophile adduction in cellular systems. Identification and
characterization of electrophile protein targets in biological samples
is significantly complicated by the relatively low levels of adducts in
comparison to the large abundance of unmodified proteins. Global
analysis of electrophile adducts requires methodology to perform high
affinity capture of adducted proteins. Presently, the most effective
methods to study HNE susceptible protein involve a mass spectrometry
(MS)-based proteomic approach. Such methodologies not only allow
detection of protein targets at high resolution but also permit the
subsequent identification of specific amino acid residues modified by
lipid electrophiles.
The discovery of protein adducts has been greatly accelerated by the
use of alkynylated electrophiles thatmimic their native counterparts in
the adduction of target proteins [43]. Alkynylated electrophiles display
similar toxicity and react with target protein nucleophiles with similar
chemistry compared to non-alkynylated electrophiles. Alkynylated
electrophiles are also stable in cells and in vivo, which makes them

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผลกระทบ แสงที่แสดงก่อนหน้านี้ศึกษาจากห้องปฏิบัติการของเราและผู้อื่นของเซลล์ HNE ผลปรับเปลี่ยนโปรตีนอย่างละเอียด [43,44]ศึกษาก่อนเพื่อระบุโปรตีน adducts electrophoresis 2D เจลอาศัยส่วนใหญ่ในควบคู่ โดยตะวันตก blotting วิธีใช้แอนตี้เฉพาะสำหรับHNE วิธีการนี้มีประโยชน์สำหรับการกำหนดถ้าโปรตีนเฉพาะของสนใจเป็น adducted อย่างไรก็ตาม ข้อจำกัดของ blotting วิธีตะวันตกคือที่ไม่สามารถวิเคราะห์ศักยภาพ electrophile สากลโปรตีนเป้าหมาย ดังนั้น อุปสรรคมากในการกำหนดบทบาทของadduction electrophile ชีววิทยาเซลล์เป็นข้อจำกัดในความสามารถของเราไปตรวจสอบ electrophile adduction ในระบบเซลลูลาร์ รหัส และคุณสมบัติของ electrophile โปรตีนเป้าหมายในตัวอย่างชีวภาพซับซ้อนเป็นอย่างมาก โดยในระดับค่อนข้างต่ำของ adducts ในเปรียบเทียบกับความใหญ่ของโปรตีน unmodified ส่วนกลางวิเคราะห์ electrophile adducts ต้องการวิธีดำเนินการสูงจับความสัมพันธ์ของโปรตีน adducted ปัจจุบัน ที่มีประสิทธิภาพสูงสุดวิธีการศึกษา HNE ไวต่อโปรตีนเกี่ยวข้องกับการโตรเมท(MS) -โดยใช้วิธี proteomic วิธีการดังกล่าวไม่เพียงแต่ช่วยให้ตรวจพบโปรตีนเป้าหมายที่ความละเอียดสูง แต่ใบอนุญาตรหัสต่อ ๆ ไปของตกกรดอะมิโนเฉพาะที่ถูกปรับเปลี่ยนโดยไขมัน electrophilesการค้นพบโปรตีน adducts ได้รับการเร่งอย่างมากโดยใช้ alkynylated electrophiles thatmimic ปราบปรามเจ้าในadduction ของโปรตีนเป้าหมาย [43] แสดง electrophiles Alkynylatedความเป็นพิษและตอบสนองกับเป้าหมาย nucleophiles โปรตีนด้วยคล้ายคล้ายกันเคมีเปรียบเทียบกับ electrophiles ไม่ alkynylated Alkynylatedelectrophiles ยังมีเสถียรภาพในเซลล์ และในสัตว์ ทดลอง ซึ่งทำให้พวกเขา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผล . การศึกษาก่อนหน้านี้จากห้องปฏิบัติการของเราและผู้อื่นแสดงให้เห็นว่าแสง
ของเซลล์เพื่อผลลัพธ์ในการดัดแปลงโปรตีน hne อย่างละเอียด [ 43,44 ] .
ก่อนการศึกษาระบุโปรตีน adducts อาศัยส่วนใหญ่ใน 2D gel electrophoresis
คู่โดย Western blotting โดยใช้แอนติบอดีต่อ
hne . วิธีการนี้จะเป็นประโยชน์สำหรับการกำหนดถ้าโปรตีนเฉพาะของดอกเบี้ย adducted
. อย่างไรก็ตามข้อจำกัดของ Western blotting คือ
ที่ไม่อนุญาตให้ส่วนกลางวิเคราะห์ศักยภาพของอิเล็กโตรไฟล์
โปรตีนเป้าหมาย ดังนั้น อุปสรรคมากในการกำหนดบทบาทของ
ฝาในหุบในชีววิทยา เซลล์มีข้อจำกัดในความสามารถของเรา

ตรวจสอบฝาในหุบในระบบเซลล์ การจำแนกชนิดและคุณสมบัติของโปรตีนเป้าหมาย

อิเล็กโตรไฟล์ในตัวอย่างทางชีวภาพเป็นอย่างซับซ้อน โดยในระดับที่ค่อนข้างต่ำของ adducts ใน
เปรียบเทียบกับความอุดมสมบูรณ์ของโปรตีนที่มีขนาดใหญ่ขึ้น . การวิเคราะห์ทั่วโลก
ของฝาใน adducts ต้องการวิธีการดำเนินการจับตะบอย
ของ adducted โปรตีน ปัจจุบัน มีประสิทธิภาพมากที่สุด วิธีการศึกษา
hne อ่อนแอโปรตีนเกี่ยวข้องกับมวลสาร
( MS ) ซึ่งโปรตีนเข้าไปเช่น วิธีการไม่เพียง แต่ช่วยให้
ตรวจจับชิ้นงานโปรตีนที่ความละเอียดสูง แต่ยังอนุญาตให้ตัวที่ตามมาของกรดอะมิโน
กาก
ดัดแปลงโดยเฉพาะไขมันแห่งความสงบ .
ค้นพบ adducts โปรตีนอย่างมากเร่งโดย
ใช้ alkynylated แห่งความสงบ thatmimic counterparts ดั้งเดิมของพวกเขา ในหุบของโปรตีนเป้าหมาย
[ 43 ]alkynylated แห่งความสงบแสดง
คล้ายพิษและทำปฏิกิริยากับโปรตีนเป้าหมาย nucleophiles กับเคมีคล้ายกัน
เมื่อเทียบกับไม่ alkynylated แห่งความสงบ . alkynylated
แห่งความสงบยังมั่นคงในเซลล์และในสัตว์ทดลอง ซึ่งทำให้พวกเขา