Sampleswere taken 24 h after challe

Sampleswere taken 24 h after challenge tomeasure adhesion of bacteria
to gills using qPCR analysis. Eight fish were collected from each
treatment. As described by Beck et al. (2012), a section of the left second
gill arch (approximately 50mg)was taken fromeach fish. Sampleswere
stored at 80 °C until DNA extraction. All DNA extractions were performed
according to the manufacturer's directions using a DNeasy
Blood and Tissue Kit (Qiagen, Valencia, California). The extracted template
DNA (composed of catfish genomic and bacterial DNA) was used
for pathogen detection, identity confirmation, and quantification using
the primers of Panangala et al. (2007) which were FcFp [50-CCTGTA
CCTAATTGGGGAAAAGAGG-30], FcRp [50-CGGTTATGGCCTTGTTTATC
ATAGA-30] and FAM labeled probe [50-ACAACAATGATTTTGCAGGAGG
AGTATCTGATGGG-30]. This primer and fluorescent probe-set targets a
region of the chondroitin AC lyase gene of F. columnare. Primers and
FAMlabeled probewere obtained fromApplied Biosystems Incorporated
(Foster City, California)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Sampleswere ถ่าย 24 ชมหลังจากยึดเกาะ tomeasure ท้าทายของแบคทีเรียเพื่อใช้วิเคราะห์ qPCR gills ปลาแปดถูกรวบรวมจากแต่ละรักษา ตามที่อธิบายไว้โดยเบ็ค et al. (2012), ส่วนที่สองด้านซ้ายเหงือกโค้ง (ประมาณ 50 มิลลิกรัม) ถูกนำปลา fromeach Sampleswereเก็บไว้ที่ 80 ° C จนสกัดดีเอ็นเอ ได้ทำการสกัดดีเอ็นเอทั้งหมดตามคำแนะนำของผู้ผลิตใช้เป็น DNeasyเลือดและเนื้อเยื่อชุด (Qiagen, Valencia แคลิฟอร์เนีย) แบบแยกใช้ดีเอ็นเอ (ประกอบด้วยเชื้อแบคทีเรีย และ genomic DNA ปลาดุก)การศึกษาตรวจสอบ การยืนยันตัวตน และนับโดยใช้ไพรเมอร์ของ Panangala et al. (2007) ซึ่ง FcFp [50-CCTGTACCTAATTGGGGAAAAGAGG-30], FcRp [50 CGGTTATGGCCTTGTTTATCATAGA-30] และ FAM ที่ชื่อโพรบ [50-ACAACAATGATTTTGCAGGAGGAGTATCTGATGGG-30] สีรองพื้นและเป้าหมายของชุดโพรบเรืองแสงนี้เป็นภูมิภาคของยีน lyase chondroitin AC ของ F. columnare ไพรเมอร์ และรับ fromApplied Biosystems Incorporated probewere FAMlabeled(เมืองฟอสเตอร์ แคลิฟอร์เนีย)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Sampleswere ดำเนินการ 24 ชั่วโมงหลังจากที่ท้าทายการยึดเกาะ tomeasure
ของแบคทีเรียเพื่อเหงือกโดยใช้การวิเคราะห์qPCR
ปลาแปดถูกเก็บรวบรวมจากกันรักษา ตามที่อธิบายไว้โดยเบ็คและอัล (2012)
ส่วนที่สองซ้ายโค้งเหงือก(ประมาณ 50mg) ถูกนำปลา fromeach Sampleswere
เก็บไว้ที่ 80 องศาเซลเซียสจนการสกัดดีเอ็นเอ สกัดดีเอ็นเอทั้งหมดได้ดำเนินการตามทิศทางของผู้ผลิตโดยใช้ DNeasy เลือดและเนื้อเยื่อ Kit (Qiagen, วาเลนเซีย, แคลิฟอร์เนีย) แม่แบบการสกัดดีเอ็นเอ (ประกอบด้วยจีโนมปลาดุกและ DNA ของเชื้อแบคทีเรีย) ถูกนำมาใช้ในการตรวจหาการติดเชื้อการยืนยันตัวตนและการหาปริมาณการใช้ไพรเมอร์ของPanangala et al, (2007) ซึ่งเป็น FcFp [50 CCTGTA CCTAATTGGGGAAAAGAGG-30] FcRp [50 CGGTTATGGCCTTGTTTATC ATAGA-30] และ FAM ที่มีข้อความแสดงความคิดเห็น [50 ACAACAATGATTTTGCAGGAGG AGTATCTGATGGG-30] ไพรเมอร์นี้และเป้าหมายการสอบสวนชุดเรืองแสงภูมิภาคของ chondroitin AC ไอเลสของยีนเอฟ columnare ไพรเมอร์และFAMlabeled probewere ได้ fromApplied Biosystems Incorporated (ฟอสเตอร์ซิตี, แคลิฟอร์เนีย)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

คนถ่าย 24 ชั่วโมงหลังจากการท้าทายกินแบคทีเรีย
ต่อเหงือกโดยใช้การวิเคราะห์ qpcr . แปดปลาจากการเก็บรักษาแต่ละคน

ตามที่อธิบายไว้โดย Beck et al . ( 2012 ) , ส่วนของเหงือกโค้งซ้าย 2
( ประมาณ 50 ) ถ่ายของปลา จำนวน 80 ° C
เก็บไว้จนกว่าการสกัดดีเอ็นเอ การสกัดดีเอ็นเอมีการปฏิบัติ
ตามทิศทางของผู้ผลิตใช้เลือดและเนื้อเยื่อ ( เพิ่มชุด dneasy
, วาเลนเซีย , แคลิฟอร์เนีย ) สกัดดีเอ็นเอแม่แบบ
( ประกอบด้วย ปลาดุก และพันธุกรรมดีเอ็นเอแบคทีเรีย ) ถูกใช้เพื่อตรวจหาเชื้อโรค
, การยืนยันตัวตน และปริมาณการใช้ไพรเมอร์ของ
panangala et al . ( 2007 ) ซึ่ง fcfp [ 50-cctgta

[ 50-cggttatggccttgtttatc fcrp cctaattggggaaaagagg-30 ]ataga-30 ] ของคุณและข้อความโพรบ [ 50-acaacaatgattttgcaggagg
agtatctgatggg-30 ] ไพรเมอร์ และชุดสอบสวน fluorescent เป้าหมาย
ภูมิภาคของ chondroitin AC lyase ยีนของ F . columnare . ไพรเมอร์และ
famlabeled probewere ได้รับ fromapplied ซึ่งรวม
( Foster City , California )