The procedure was based on the assa

The procedure was based on the assay of Engwall and Perlmann
(1972). The standard curve was prepared using purified LV. Nunc-
Immunoplate Polisorp microtiter plates were loaded with 50 lL/
well of the LV standard (0–120 ng) dissolved in a buffer containing
15 mM sodium carbonate, 35 mM sodium bicarbonate, pH 9.6
(coating buffer). Samples of hemolymph, ovary, hepatopancreas
and eggs were diluted with the coating buffer. Aliquots of 50 lL
were pipeted into the wells and incubated at 37 C for 90 min.
The antigen solutions were then shaken out, and each well was
filled with 300 lL of PBS, pH 7.4, containing 3% (w/v) non-fat dry
milk. The plates were incubated at room temperature for 2 h and
subsequently washed three times with 0.05% (v/v) Tween in PBS.
The anti-LV rabbit serum diluted in PBS-Tween (1:1000) containing
3% non fat dry milk was poured into each well, and plates were
incubated overnight at 4 C and washed three times as above
indicated.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ขั้นตอนเป็นไปตามการวิเคราะห์ของ Engwall และ Perlmann(1972) มีเตรียมเส้นโค้งมาตรฐานใช้บริสุทธิ์ LV. Nunc -แผ่น microtiter Immunoplate Polisorp ถูกโหลด ด้วย 50 จะ /ดีของมาตรฐาน LV (0 – 120 ng) ละลายในบัฟเฟอร์ที่ประกอบด้วย15 มม.โซเดียมคาร์บอเนต โซเดียมไบคาร์บอเนตขนาด 35 มม. pH 9.6(เคลือบบัฟเฟอร์) ตัวอย่างของ hemolymph รังไข่ hepatopancreasและไข่ที่ถูกผสมกับบัฟเฟอร์เคลือบ Aliquots 50 จะมี pipeted เป็นบ่อ และ incubated ที่ 37 C สำหรับ 90 นาทีตรวจหาการแก้ไขปัญหาถูกเขย่าแล้ว และแต่ละดีถูกเติม 300 จะของ PBS ค่า pH 7.4 ประกอบด้วยแห้งไม่มีไขมัน 3% (w/v)นม แผ่นก็ incubated ที่อุณหภูมิห้องใน 2 h และต่อมาล้างครั้งที่ 3 0.05% (v/v) Tween ใน PBSเซรั่มต่อต้าน LV กระต่ายที่ผสมใน PBS-Tween (1:1000) ประกอบด้วยไม่ใช่ไขมันนมแห้งถูก poured ในแต่ละดี และแผ่นได้ 3%incubated ค้างคืนที่ 4 C และหินสามครั้งกับข้างบนระบุ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ขั้นตอนที่อยู่บนพื้นฐานของการทดสอบของ Engwall และ Perlmann
(1972) กราฟมาตรฐานได้รับการจัดทำขึ้นโดยบริสุทธิ์ LV Nunc-
Immunoplate Polisorp แผ่นไมโครได้รับการเต็มไปด้วย 50 LL /
ดีของมาตรฐาน LV (0-120 ศึกษา) ที่ละลายในบัฟเฟอร์ที่มี
โซเดียมคาร์บอเนตขนาด 15 มม, 35 มิลลิโซเดียมไบคาร์บอเนต, พีเอช 9.6
(บัฟเฟอร์เคลือบ) ตัวอย่างของเลือด, รังไข่, ตับ
และไข่ถูกเจือจางด้วยบัฟเฟอร์เคลือบ aliquots 50 lL
ถูก pipeted เป็นบ่อและบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 90 นาที.
โซลูชั่นแอนติเจนถูกเขย่าแล้วออกและดีแต่ละ
ที่เต็มไปด้วย 300 lL ของพีบีเอสพีเอช 7.4 ที่มี 3% (w / v) ไม่ -fat แห้ง
นม แผ่นถูกบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 2 ชั่วโมงและ
ล้างต่อมาสามครั้งกับ 0.05% (v / v) Tween ในพีบีเอส.
กระต่ายต่อต้าน LV เจือจางในซีรั่มพีบีเอส-Tween (1: 1000) ที่มี
3% ไม่ไขมันนมแห้ง ถูกเทลงในแต่ละดีและแผ่นถูก
บ่มค้างคืนที่ 4 องศาเซลเซียสและล้างสามครั้งดังกล่าว
ระบุ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ขั้นตอนบนพื้นฐานของการทดสอบและ engwall perlmann
( 1972 ) เส้นโค้งมาตรฐาน เตรียมใช้บริสุทธิ์ LV . ขณะนี้ -
immunoplate polisorp ไมโครจานถูกโหลด ด้วย 50 จะ /
ดีของ LV มาตรฐาน ( 0 – 120 กรัม ) ละลายในบัฟเฟอร์ที่มี
โซเดียมไบคาร์บอเนตโซเดียมคาร์บอเนต 15 มม. , 35 มม. , pH 9.6
( เคลือบ buffer ) ตัวอย่างเลือดกุ้ง
รังไข่และไข่ถูกเจือจางด้วยสารเคลือบ . เฉยๆของ 50 จะเป็น pipeted เข้า
บ่อบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 90 นาที 
โซลูชั่นแอนติเจนแล้วสลัดออก , และแต่ละคนเป็นอย่างดี
เติม 300 จะของ PBS ที่ pH 7.4 ที่ 3% ( w / v ) ไม่อ้วนแห้ง
นม จานถูกบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 2 ชั่วโมงและล้างสามครั้งกับ
ต่อมา 0.05 เปอร์เซ็นต์ ( v / v )
Tween ใน PBSเซรั่มต่อต้าน LV กระต่ายเจือจางใน PBS ทวี ( 000 ) ประกอบด้วย
3 % ปลอดไขมันนมแห้งถูกเทลงไปในแต่ละ , และแผ่นถูก
บ่มค้างคืนที่ 4  C และล้างสามครั้งตามข้างบน
ระบุ