2.9. Free fumonisin extractionIn or

2.9. Free fumonisin extraction
In order to extract free fumonisins, 5 g of milled maize kernels
were extracted with 40 ml of water/methanol mixture (3/7 v/v) by
blending the sample in a high-speed blender Ultraturrax T 25
(v ¼ 1; 4000 rpm, IKA, Stauffen, Germany) for 3 min. Then, the
sample was filtered on a paper filter and 4 ml of the extract were
evaporated to dryness under nitrogen flow and the residue was
redissolved in 1 ml of water/methanol mixture (3:7 v/v) before LCMS/
MS analysis.
2.10. Total fumonisin extraction
For total fumonisin extraction, the maize sample (2.5 g) was
previously treated with 50 ml of aqueous KOH 2 M in order to
obtain the hydrolysis of hidden fumonisins. The samples were
blended in a high-speed blender Ultraturrax T 25 (IKA-Werke
GmbH & Co., Staufen, Germany) (v ¼ 1, 4000 rpm) and then stirred
at constant speed at room temperatures for 1 h. After this step,
hydrolysed fumonisins were extracted adding 50 ml of acetonitrile,
shaking the solution for 5 min using the high-speed blender
Ultraturrax T 25 (v ¼ 1, 4000 rpm). In order to separate the two
formed layers, samples were centrifuged for 10 min at 1369 g at
25
C. After this step, 4 ml of extract containing hydrolysed fumonisins
were put into a vial and dried under nitrogen flow. Then, the
dried residue was redissolved with 0.4 ml of water/methanol
mixture (3:7 v/v) and analysed by LC-MS/MS apparatus.
LC-MS/MS analysiswas performed by a 2695 Alliance separation
system (Waters Co., Milford, MA, USA) equipped with a Quattro API
triple quadrupole mass spectrometer with an electrospray source
(Micromass, Waters, Manchester, U.K.) on a Synergy Fusion RP

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.9 สกัดฟูโมนิซิฟรี
เพื่อดึง fumonisins ฟรี 5 กรัมเมล็ดข้าวโพดข้าวสาร
ถูกสกัดด้วย 40 มล. ผสมน้ำ / เมทานอล (3/7 v / v) โดย
การผสมตัวอย่างในเครื่องปั่นความเร็วสูง Ultraturrax T 25
(V ¼ 1; 4000 รอบต่อนาที, IKA, Stauffen, เยอรมนี) เป็นเวลา 3 นาที จากนั้น
กลุ่มตัวอย่างถูกกรองบนกระดาษกรองและ 4 มล. ของสารสกัดที่ถูก
ระเหยแห้งภายใต้การไหลของไนโตรเจนและสารตกค้างที่ถูก
redissolved ใน 1 มิลลิลิตรของน้ำ / เมทานอลผสม (3: 7 v / v) ก่อน LCMS /
วิเคราะห์ MS
2.10 ฟูโมนิซิสกัดรวม
สำหรับการสกัดฟูโมนิซิรวมตัวอย่างข้าวโพด (2.5 กรัม) คือการ
ได้รับการรักษาก่อนหน้านี้กับ 50 มิลลิลิตรน้ำเกาะ 2 เมตรเพื่อให้
ได้รับการย่อยสลายของ fumonisins ที่ซ่อนอยู่ ตัวอย่างถูก
ปั่นในเครื่องปั่นความเร็วสูง Ultraturrax T 25 (IKA-Werke
GmbH & Co. , Staufen, เยอรมนี) (V ¼ 1, 4000 รอบต่อนาที) และจากนั้นกวน
ที่ความเร็วคงที่ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1 ชั่วโมง หลังจากขั้นตอนนี้
fumonisins ย่อยถูกสกัดเพิ่ม 50 มล acetonitrile,
สั่นแก้ปัญหาเป็นเวลา 5 นาทีโดยใช้เครื่องปั่นความเร็วสูง
Ultraturrax T 25 (V ¼ 1, 4000 รอบต่อนาที) เพื่อที่จะแยกสอง
ชั้นรูปตัวอย่างที่ถูกปั่นเป็นเวลา 10 นาทีที่ 1,369 กรัมที่
25 องศาเซลเซียส หลังจากขั้นตอนนี้ 4 มล. ของสารสกัดที่มี fumonisins ย่อย
ได้ใส่ลงในขวดและแห้งภายใต้การไหลของไนโตรเจน จากนั้น
ตกค้างแห้ง redissolved 0.4 มิลลิลิตรของน้ำ / เมทานอล
ผสม (3: 7 v / v) และวิเคราะห์โดย LC-MS / MS อุปกรณ์.
LC-MS / MS analysiswas ดำเนินการโดยพันธมิตร 2695 แยก
ระบบ (วอเตอร์ จำกัด , ฟอร์ด, MA, USA) พร้อมกับ Quattro API
สาม quadrupole สเปกโตรมิเตอร์มวลกับแหล่ง electrospray
(Micromass น้ำ, แมนเชสเตอร์, สหราชอาณาจักร) ในฟิวชั่น RP Synergy

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.9 . การสกัดฟูโมนิซินฟรีเพื่อดึงฟูโมนิซินฟรี 5 กรัมบดเมล็ด ข้าวโพดถูกสกัดด้วยเมทานอลผสมน้ำ 40 มิลลิลิตร / 3 / 7 v / v ) โดยผสมตัวอย่างในเครื่องปั่นความเร็วสูง ultraturrax T 25( 5 ¼ 1 ; 4000 รอบต่อนาที , อิกะ stauffen , Germany ) นาน 3 นาที แล้วใช้กรองบนกระดาษกรองและ 4 มิลลิลิตร สารสกัดระเหยแห้งภายใต้การตกค้างไนโตรเจนและredissolved ใน 1 มิลลิลิตรของน้ำ / เมทานอลผสม ( 3 : 7 v / v ) / ก่อนหรือการวิเคราะห์ MS2.10 . การสกัดฟูโมนิซินรวมสำหรับการสกัดฟูโมนิซินรวมข้าวโพดตัวอย่าง ( 2.5 กรัม ) คือที่เคยได้รับการรักษาด้วย 50 มล. ของน้ำเกาะ 2 M เพื่อได้รับการย่อยสลายของฟูโมนิซินที่ซ่อนอยู่ กลุ่มตัวอย่างผสมในเครื่องปั่นความเร็วสูง ultraturrax T 25 ( Ika werkeGmbH & Co . , Staufen , เยอรมนี ) ( V ¼ 1 , 4000 รอบต่อนาที ) แล้ว คนที่ความเร็วรอบคงที่ที่อุณหภูมิในห้องเป็นเวลา 1 ชั่วโมงหลังจากขั้นตอนนี้ที่ฟูโมนิซินสกัดเพิ่ม 50 ml ของไนเขย่าสารละลาย 5 นาทีโดยใช้เครื่องปั่นความเร็วสูงultraturrax T 25 ( V ¼ 1 , 000 รอบต่อนาที ) เพื่อที่จะแยกสองขึ้นชั้น จำนวนระดับ 10 นาทีที่ 810 กรัมที่25 . หลังจากขั้นตอนนี้ , 4 ml สารสกัดที่ประกอบด้วยน้ำตาลฟูโมนิซินใส่ลงไปในขวด และแห้งภายใต้การไหลของแก๊สไนโตรเจน งั้นกากแห้ง redissolved กับ 0.4 มิลลิลิตรน้ำเมทานอลส่วนผสม ( 3 : 7 v / v ) และวิเคราะห์ด้วยอินซูลิน MS เครื่องมืออินซูลิน MS และดำเนินการโดย 2695 พันธมิตรแยกระบบ ( น้ำ Co . , ฟอร์ด , MA , USA ) พร้อมกับ Quattro APIสามคำแมสสเปกโตรมิเตอร์ด้วยวิธีพ่นละอองไฟฟ้าแหล่ง( micromass น้ํา แมนเชสเตอร์ , UK ) ในระบบ RP ฟิวชั่น