the following conditions: 94 C for 5 min and then 35 cycles
(denaturation at 94 C, 30 s; primer annealing at 54 C, 30 s; primer
extension at 72 C, 1 min) followed by a final elongation step at
72 C for 10 min. 1.0% agarose gel electrophoresis was used to
examine the quality and quantity of these PCR amplification
products (5 mL).
Sequencing was performed in the BBT Co., Ltd. (Beijing, China).
The 16S partial sequences were mostly approximately 1400 bp. The
identification of the colonies was completed by using the EZTaxon
database, which contains 16S rRNA gene sequences of type strains
with validly published prokaryotic names (Chun et al., 2007)
(http://www.eztaxon.org/). Minimum values of 97% similarity were
used to determine whether the sequences belonged to the same
species (Noseda et al., 2012).
2.7. Statistical analysis
Each analysis was performed in triplicate (except microbiological
analyses, which were performed in duplicate). The least significant
difference (LSD) procedure was used to test for differences
between means (significance was defined at P < 0.05) using SPSS
17.0 (SPSS Inc., Chicago, IL) software.
3. Results and discussion
3.1. Sensory analysis
สภาพ: 94 C 5 นาทีแล้ว 35 รอบ(denaturation ที่ 94 C, 30 s พื้นการอบเหนียวที่ 54 C, 30 s พื้นส่วนขยายที่ 72 C, 1 นาที) ตาม ด้วยขั้นตอนสุดท้าย elongation ที่ซี 72 สำหรับ 10 นาที 1.0% agarose เจ electrophoresis ถูกใช้ตรวจสอบคุณภาพและปริมาณของ PCR ขยายเหล่านี้ผลิตภัณฑ์ (5 มล.)ลำดับที่ดำเนินการในการ BBT Co., Ltd. (ปักกิ่ง จีน)ลำดับบางส่วน 16S ทาสีประมาณ 1400 bp.รหัสของอาณานิคมที่เสร็จสมบูรณ์ โดยใช้การ EZTaxonฐานข้อมูล ลำดับยีนของ 16S rRNA ของชนิดสายพันธุ์ประกอบด้วยมี validly ประกาศชื่อ prokaryotic (ชุน et al., 2007)(http://www.eztaxon.org/) มีค่าต่ำสุดของคล้าย 97%ใช้เพื่อกำหนดว่า ลำดับการเป็นสมาชิกเหมือนกันชนิด (Noseda et al., 2012)2.7. สถิติวิเคราะห์ทำการวิเคราะห์แต่ละอย่างใน triplicate (ยกเว้นทางจุลชีววิทยาวิเคราะห์ ซึ่งถูกทำสำเนา) สำคัญน้อยที่สุดใช้ขั้นตอนต่าง (LSD) เพื่อทดสอบความแตกต่างระหว่างวิธีการ (มีกำหนดนัยสำคัญที่ P < 0.05) โดยใช้โปรแกรม17.0 (โปรแกรม Inc. ชิคาโก IL) ซอฟต์แวร์3. ผลลัพธ์ และสนทนา3.1 การวิเคราะห์รับความรู้สึก
การแปล กรุณารอสักครู่..
เงื่อนไขต่อไปนี้: 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาทีแล้ว 35 รอบ?
(denaturation ที่ 94 C, 30 วินาที; หลอมไพรเมอร์ที่ 54 C, 30 วินาที; ไพรเมอร์?
นามสกุลที่ 72 C, 1 นาที?) ตามด้วยขั้นตอนการยืดตัวสุดท้าย ที่
72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที 1.0% ข่าวคราว agarose
ถูกใช้ในการตรวจสอบคุณภาพและปริมาณของเหล่านี้ขยายPCR
ผลิตภัณฑ์ (5 มิลลิลิตร).
ลำดับที่ได้ดำเนินการใน BBT จำกัด (กรุงปักกิ่งประเทศจีน).
16S ลำดับบางส่วนส่วนใหญ่ประมาณ 1,400 bp
บัตรประจำตัวของอาณานิคมเป็นที่เรียบร้อยแล้วโดยใช้ EZTaxon
ฐานข้อมูลที่มี 16S rRNA ลำดับยีนของสายพันธุ์ชนิดที่มีการตีพิมพ์อย่างถูกต้องชื่อโปรคาริโอ (จุน et al., 2007) (http://www.eztaxon.org/) ค่าต่ำสุดของความคล้ายคลึงกัน 97% ถูกใช้ในการตรวจสอบว่าลำดับเป็นเดียวกันสายพันธุ์(Noseda et al., 2012). 2.7 การวิเคราะห์ทางสถิติการวิเคราะห์แต่ละคนได้ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า(ยกเว้นทางจุลชีววิทยาการวิเคราะห์ซึ่งได้รับการดำเนินการในที่ซ้ำกัน) อย่างน้อยอย่างมีนัยสำคัญที่แตกต่างกัน (LSD) ขั้นตอนที่ถูกใช้ในการทดสอบความแตกต่างระหว่างหมายความว่า(อย่างมีนัยสำคัญที่ถูกกำหนดไว้ที่ P <0.05) โดยใช้โปรแกรม SPSS 17.0 (SPSS อิงค์, Chicago, IL) ซอฟแวร์. 3 และการอภิปรายผล3.1 การวิเคราะห์ทางประสาทสัมผัส
การแปล กรุณารอสักครู่..