Pellet was spun at 200 ×g at 4 °C f

Pellet was spun at 200 ×g at 4 °C for 5 min
and then an equal volume of 1.08 M sucrose solution was added and
spun at 2000 g for 5 min to remove large debris. Supernatant was
transferred to a 13.2 mL thinwall ultraclear centrifuge tube (BeckmanCoulter
344059) and layered with a gradient of 0.27 M sucrose,
0.135 M sucrose and Top solution buffer (25 mM Tris–HCl; 1 mM
EDTA; 1 mM EGTA; protease inhibitor cocktail). Spun in SW41 rotor
using a Beckman L8-70M ultracentrifuge at 35,000 rpm for 30 min at
4 °C. The top layer (white, cloudy) was transferred via a glass pipet to
a siliconized microcentrifuge tube and spun at 18,000 ×g for 10 min
and the bottom, aqueous layer was removed.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เม็ดได้ที่ 200 × g ที่ 4 ° C สำหรับ 5 นาทีปั่นและได้เพิ่มปริมาณเป็นเท่าของซูโครส 1.08 กก M และปั่นที่ g 2000 สำหรับ 5 นาทีเอาเศษขยะขนาดใหญ่ Supernatant ถูกโอนย้ายไปหลอดเครื่องหมุนเหวี่ยง ultraclear thinwall มล 13.2 (BeckmanCoulter344059) และชั้น ด้วยการไล่ระดับสีของซูโครส 0.27 M0.135 M ซูโครสและบัฟเฟอร์ของโซลูชันบนสุด (25 มม.ตรี – HCl; 1 mMEDTA มม. 1 EGTA รติเอสเตอร์ค็อกเทล) ปั่นในใบพัด SW41ใช้ ultracentrifuge Beckman L8 - 70M ที่ 35000 rpm 30 นาทีที่4 องศาเซลเซียส ชั้นบนสุด (สีขาว มีเมฆมาก) ถูกโอนย้ายผ่าน pipet แก้วการการ siliconized microcentrifuge หลอด และปั่นที่ 18000 × g สำหรับ 10 นาทีและด้านล่าง ชั้นอควีถูกเอาออก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เม็ดที่ได้ปั่นกรัม 200 × 4 ° C เป็นเวลา 5
นาทีและจากนั้นปริมาณเท่ากับ1.08 แก้ปัญหา M
ซูโครสถูกบันทึกและปั่นที่2,000 กรัมเป็นเวลา 5 นาทีเพื่อขจัดเศษซากขนาดใหญ่ ใสถูกโอนไปยัง 13.2 มิลลิลิตรหลอด centrifuge thinwall UltraClear (BeckmanCoulter 344059) และชั้นที่มีการไล่ระดับสี 0.27 M ซูโครส0.135 M ซูโครสและบัฟเฟอร์แก้ปัญหายอดนิยม (25 มิลลิ Tris-HCl 1 มิลลิEDTA 1 มิลลิ EGTA; ยับยั้งเอนไซม์โปรติเอค๊อกเทล ) เสาเข็มในโรเตอร์ SW41 ใช้เบคค์ L8-70M ultracentrifuge ที่ 35,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 นาทีที่4 ° C ชั้นบนสุด (สีขาวขุ่น) ถูกย้ายผ่านปิเปตแก้วหลอดไมโครsiliconized และหมุนตัวที่ 18,000 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาทีและด้านล่าง, ชั้นน้ำจะถูกลบออก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เม็ดมาปั่นที่ 200 × g 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาทีโดย
แล้วปริมาณเท่ากับ 1.08 M sucrose และโซลูชั่นเพิ่ม
ปั่นที่ 2000 กรัม เป็นเวลา 5 นาที เพื่อเอาเศษใหญ่ น่านคือ
ย้ายไป 13.2 หลอด centrifuge ultraclear thinwall ml ( beckmancoulter
344059 ) และชั้นด้วยการไล่ระดับของ 3 M sucrose ซูโครสและด้านบน
0.135 M สารละลายบัฟเฟอร์ ( ณ 25 มิลลิเมตร– HCl ; 1 mM EDTA หน่วย 1 มม. ;
;โปรตีเ นฮิบิเตอร์ค็อกเทล ) ปั่นใน sw41 ใบพัด
ใช้เบค l8-70m Ultracentrifuge อยู่ที่ 35 , 000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 นาทีที่
4 องศา ชั้นบน ( สีขาวขุ่น ) โอนผ่านทางปิเปตแก้ว

siliconized หลอดไมโครเซนตริฟิวจ์เป็นปั่นที่ 18000 × 10
กรัมมินและน้ำชั้นล่าง ถูกถอดออกไป