for estimation of flavonoids. 0.5 ml of concentration 100-
500μg/ml of herbal preparation was mixed with 1 ml
aluminium trichloride in ethanol (20g/l) and diluted with
ethanol to 25 ml. The absorbance was read after 40 minutes
incubation at 37°C spectrophotometrically at 415nm. Rutin (a
citrus flavonoids glycoside) of concentration 0.5mg/ml, 1.0
mg/ml, 1.5 mg/ml, 2.0 mg/ml and 2.5 mg/ml was used as a
reference compound and absorbance was measured under the
same conditions. All determinations were carried in
triplicate. The amount of flavonoids in herbal preparation
was calculated as milligram of rutin/g of mixture.
Estimation of flavonols
The content of flavonols was determined by the method of
Yermakov et al 1987 [16] with slight modifications like
reduction in total volume of reagents used. 0.05 ml of various
concentrations (100-500μg) was treated with 1ml of 2%
aluminium trichloride in ethanol and 1ml of 5% sodium
acetate. The absorption was read at 400nm was read after 2.5
hours at 37°C. The same procedure was carried out for 2ml
of reference compound rutin for concentration 0.2mg/ml, 0.4
mg/ml, 0.6 mg/ml, 0.8 mg/ml and 1.0 mg/ml. All
determinations were carried out in triplicate .The content of
flavonols was calculated in terms of milligram of rutin /g of
mixture.
Method for DPPH radical scavenging assay
Radical scavenging activity of plant extracts against stable 2,
2 diphenyl 2 picryl hydrazyl hydrate (DPPH) was determined
by the slightly modified method of Brand-Williams et al
1995. [17] DPPH reacts with an antioxidant compound, which
can donate hydrogen, and reduce DPPH. The change in
colour (from deep violet to light yellow) was measured at
517 nm on a UV visible light spectrophotometer. The
solution of DPPH in methanol 6 × 10-5 M was prepared fresh
daily before UV measurements. Three ml of this solution was
mixed with 100 microgram/ml concentration of individual
plant extracts as well as herbal preparation. The samples
were kept in the dark for 15 minutes at room temperature and
the decrease in absorbance was measured. The experiment
was carried out in triplicate. Radical scavenging activity was
calculated by the following formula.
% Inhibition = [(A B –A A)/A B] × 100
Where A B = absorption of blank sample (t= 0 min)
A A = absorption of test extract solution (t=15 mins) [18]
Table 1:
สำหรับการประเมินของ flavonoids 0.5 ml ของความเข้มข้น 100-500μg/ml การเตรียมสมุนไพรที่ผสมกับ 1 mltrichloride อะลูมิเนียมในเอทานอล (20g/l) และแตกออกด้วยเอทานอล 25 ml Absorbance ที่ถูกอ่านหลังจาก 40 นาทีบ่มที่ 37° C ที่ 415nm spectrophotometrically Rutin (aส้ม flavonoids glycoside) ของความเข้มข้น 0.5 mg/ml, 1.0mg/ml, 1.5 mg/ml, 2.0 mg/ml และ 2.5 mg/ml ถูกใช้เป็นอ้างอิงผสม และมีวัด absorbance ภายใต้การเงื่อนไขเดียวกัน Determinations ทั้งหมดได้ดำเนินการในtriplicate ยอดของ flavonoids ในการเตรียมสมุนไพรมีคำนวณเป็น milligram rutin/g ของส่วนผสมประเมิน flavonolsเนื้อหาของ flavonols ถูกกำหนด โดยวิธีการYermakov et al 1987 [16] มีปรับเปลี่ยนเล็กน้อยเช่นลดปริมาณรวมของ reagents ใช้ 0.05 ml ของต่าง ๆความเข้มข้น (100-500μg) ได้รับมล 1% 2trichloride อะลูมิเนียมในเอทานอล 1 มิลลิลิตรของ 5% โซเดียมacetate ดูดซึมได้อ่านที่ 400nm ถูกอ่านหลัง 2.5ชั่วโมงที่ 37 องศาเซลเซียส กระบวนการเดียวกันถูกดำเนินการใน 2mlอ้างอิงผสม rutin สำหรับความเข้มข้น 0.2 mg/ml, 0.4mg/ml, 0.6 mg/ml, 0.8 mg/ml และ 1.0 mg / ml. ทั้งหมดdeterminations ได้ดำเนินการใน triplicate เนื้อหาของคำนวณใน milligram /g rutin ของ flavonolsส่วนผสมของวิธี DPPH รุนแรง scavenging assayกิจกรรม scavenging รุนแรงพืชสารสกัดจากมั่นคง 2กำหนด 2 ฟีนิลได 2 picryl hydrazyl ผับ/เลาจน์ (DPPH)โดยวิธีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อยของแบรนด์วิลเลียมส์ et al1995 [DPPH 17] ทำปฏิกิริยากับสารต้านผสม ที่สามารถบริจาคไฮโดรเจน และลด DPPH การเปลี่ยนแปลงสี (จากลึกม่วงกับสีเหลืองอ่อน) เป็นวัดที่517 nm ในการ UV เห็นแสงเครื่องทดสอบกรดด่าง ที่โซลูชันของ DPPH ในเมทานอล 6 × 10-5 M ที่เตรียมสดทุกวันก่อนที่วัดรังสียูวี 3 ml ของโซลูชันนี้ได้ผสมกับสมาธิระดับ 100 microgram/ml ของแต่ละบุคคลโรงงานผลิตสารสกัดและเตรียมสมุนไพร ตัวอย่างถูกเก็บไว้ในมืดใน 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง และมีวัด absorbance ที่ลดลงนี้ ทดลองได้ดำเนินการใน triplicate กิจกรรมรุนแรง scavenging ได้คำนวณตามสูตรต่อไปนี้ยับยั้งการ% = [(แบบ B – A A) /A B] × 100A B =การดูดซึมของตัวอย่างว่างเปล่า (t = 0 นาที)A =ดูดซึมสารสกัดของทดสอบ (t = 15 นาที) [18]ตารางที่ 1:
การแปล กรุณารอสักครู่..

สำหรับการประมาณของ flavonoids 0.5 มล. ของความเข้มข้น 100
500μg / ml ของการเตรียมสมุนไพรผสมกับ 1 มล.
ไตรคลอไรด์อลูมิเนียมในเอทานอล (20 กรัม / ลิตร)
และเจือจางด้วยเอทานอล25 มล. การดูดกลืนแสงได้อ่านหลังจาก 40
นาทีบ่มที่อุณหภูมิ37 องศาเซลเซียส spectrophotometrically ที่ 415nm รูติน
(กส้มflavonoids glycoside) ของ 0.5mg ความเข้มข้น / ml 1.0
มก. / มล., 1.5 มก. / มล., 2.0 มก. / มล. และ 2.5 มก. / มล. ใช้เป็นสารประกอบอ้างอิงและการดูดกลืนแสงวัดภายใต้เงื่อนไขเดียวกัน พิจารณาทั้งหมดได้รับการดำเนินการในการเพิ่มขึ้นสามเท่า จำนวนของ flavonoids ในการเตรียมสมุนไพรที่คำนวณได้เป็นมิลลิกรัมรูติน / g ผสม. ประมาณ flavonols เนื้อหาของ flavonols ถูกกำหนดโดยวิธีการของYermakov et al, 1987 [16] มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อยเช่นการลดลงของปริมาณรวมของสารเคมีที่ใช้ 0.05 มลต่างๆความเข้มข้น(100-500μg) ได้รับการรักษาด้วย 1ml 2% ไตรคลอไรด์อลูมิเนียมในเอทานอลและ 1ml ของโซเดียม 5% อะซิเตท การดูดซึมได้อ่านที่ 400nm ได้อ่านหลังจาก 2.5 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ขั้นตอนเดียวกันได้ดำเนินการสำหรับ 2ml ของรูตินสารอ้างอิงความเข้มข้น 0.2 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร 0.4 มก. / มล., 0.6 มก. / มล., 0.8 มก. / มล. และ 1.0 มก. / มล. ทั้งหมดหาความได้ดำเนินการเพิ่มขึ้นสามเท่าในเนื้อหาได้โดยเริ่มต้นของflavonols ที่คำนวณได้ในแง่ของการมิลลิกรัมรูติน / กรัมผสม. วิธีการทดสอบการต้านอนุมูล DPPH ต้านหัวรุนแรงของสารสกัดจากพืชที่มีเสถียรภาพกับ 2 2 2 diphenyl picryl hydrazyl ไฮเดรต (DPPH) ถูกกำหนดโดยวิธีการแก้ไขเล็กน้อยของแบรนด์วิลเลียมส์et al, 1995 [17] DPPH ทำปฏิกิริยากับสารต้านอนุมูลอิสระซึ่งสามารถบริจาคไฮโดรเจนและลดDPPH การเปลี่ยนแปลงสี (จากสีม่วงลึกกับแสงสีเหลือง) วัดที่ 517 นาโนเมตรใน spectrophotometer แสงที่มองเห็นยูวี แก้ปัญหาของ DPPH ในเมทานอล 6 × 10-5 M ถูกจัดทำสดใหม่ทุกวันก่อนที่วัดรังสียูวี สามมล. ของการแก้ปัญหานี้ได้รับการผสมกับ100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรความเข้มข้นของแต่ละสารสกัดจากพืชเช่นเดียวกับการเตรียมสมุนไพร กลุ่มตัวอย่างที่ถูกเก็บไว้ในที่มืดเป็นเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิห้องและการลดลงของการดูดกลืนแสงที่ถูกวัด การทดลองที่ได้ดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่า ต้านอนุมูลอิสระได้รับการคำนวณโดยใช้สูตรต่อไปนี้.% ยับยั้ง = [(AB -AA) / AB] × 100 ที่ไหน AB = การดูดซึมของกลุ่มตัวอย่างที่ว่างเปล่า (t = 0 นาที) AA = การดูดซึมของสารสกัดจากวิธีการแก้ปัญหาการทดสอบ (t = 15 นาที) [18] ตารางที่ 1:
การแปล กรุณารอสักครู่..
