even ทททกว่าคือ a reduction of the

even ทททกว่าคือ a reduction of the
expression and/or the enzymatic activity by อย่างน้อย 99.9%. The term "reduced expression
and/or activity of the enzyme that is encoded by the IdhA-gene", "reduced activity of the 35 enzyme that is encoded by the pfID-gene", "reduced activity of the enzyme that is encoded
by the pflA-gene" or "reduced activity of the enzyme that is encoded by the pckA- gene"
also encompasses a modified microorganism which has no detectable expression and/or
activity of these enzymes. Methods for the detection and determination of the expression
and/or activity of the enzyme that is encoded by the said genes can be found, for example: 40
Methods for determining the phosphoenolpyruvate คาร์บอกซีlase expression or activity are, for example, disclosed in G.P. Bridger, T.K. Sundaram (1976) Occurrence of
phosphenolpyruvate คาร์บอกซีlase in the extremely thermophilic bacterium Thermus
aquaticus, J Bacteriol. 125, 1211-1213; P. Maeba, B. D. Sanwal (1969)
Phosphoenolpyruvate คาร์บอกซีlase from Salmonella typhimurium strain LT2, Methods in
Enzymology 13, 283-288; or J. L. Canovas, H. L. Kornberg (1969) Phosphoenolpyruvate 5 คาร์บอกซีlase from Escherichia coli, Methods in Enzymology 13, 288-292. Preferred is the
method described in disclosed in G.P. Bridger, T.K. Sundaram (1976).
Methods for determining the lactate ดีไฮโดรจีเนส expression or activity are, for example,
disclosed by Bunch et al in "The idhA gene encoding the fermentative lactate de 10 hydrogenase of Escherichia Coll', Microbiology (1997), Vol. 143, pages 187-155; or
Bergmeyer, H.U., Bergmeyer J. and Grassi, M. (1983-1986) in "Methods of Enzymatic
Analysis", 3rd Edition, Volume III, pages 126-133, Verlag Chemie, Weinheim; or Enzymes
in Industry: Production and Applications, Second Edition (2004), Wolfgang Aehle, page 23.
Preferred is the last method.
15
Methods for determining the pyruvate formate lyase expression or activity are, for example, disclosed in by Knappe and Blaschkowski in "Pyruvate formate-/yase from Escherichia coli and its activation system", Methods Enzymol (1975), Vol. 41, pages 508-518; or Asanuma
N. and Hino T. in "Effects of pH and Energy Supply on Activity and Amount of Pyruvate-
20 Formate-Lyase in Streptococcus bovis", Appl. Environ. Microbiol. (2000), Vol. 66, pages 3773-
3777". Preferred is the last method.
Methods for determining the ไพรูเวต ฟอร์เมต-ไลเอส activating enzyme expression or
activity ไพรูเวต ฟอร์เมต ไลเอส activity are disclosed by Takahashi-Abbe S., Abe K., 25 Takahashi N., Biochemical and functional properties of a ไพรูเวต ฟอร์เมต-ไลเอส (PFL)-
activating system in Streptococcus mutans (2003) Oral Microbiology Immunology 18, 293-
297.
The term "reduced expression of an enzyme" includes, for example, the expression of the 30 enzyme by said genetically manipulated (e.g., genetically engineered) microorganism at a
lower level than that expressed by the ไวด์ไทป์ of said microorganism. Genetic
manipulations for reducing the expression of an enzyme can include, but are not limited to,
deleting the gene or parts thereof encoding for the enzyme, altering or modifying regulatory
sequences or sites associated with expression of the gene encoding the enzyme (e.g., by 35 removing strong โปรโมเตอร์ or repressible โปรโมเตอร์), modifying proteins (e.g., regulatory
proteins, suppressors, enhancers, transcriptional activators and the like) involved in
transcription of the gene encoding the enzyme and/or the translation of the gene product, or
any other conventional means of decreasing expression of a particular gene routine in the
art (including, but not limited to, the use of antisense nucleic acid molecules or other 40 methods to knock-out or block expression of the target protein). Further on, one may
introduce destabilizing elements into the mRNA or introduce genetic modifications leading
to deterioration of ribosomal binding sites (RBS) of the RNA. Further on, one may introduce
antisense or RNAi-constructs into the genome leading to deterioration of the RNA. It is also
possible to change the codon usage of the gene in a way, that the translation efficiency and speed is decreased.

According to a preferred embodiment of the modified microorganism according to the 5 การประดิษฐ์นี้, a reduction of the expression and/or activity of the enzyme encoded by
the IdhA-gene, OD- gene, OA-gene and/or pckA-gene is achieved by a modification of the
IdhA-gene, OD gene, pfiA-gene and/or pckA-gene, โดยที่ this/these gene modification(s)
is(are) ทททคือ realized by a deletion of one or more of said genes or อย่างน้อย a part
thereof, a deletion of a regulatory element of the one or more of said genes or parts thereof, 10 such as a promotor sequence, by a frameshift, by introducing a stop codon, by an
introduction of อย่างน้อย one deleterious mutation into one or more of said genes. Further on, one may introduce antisense or RNAi-constructs into t

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทททกว่าคือแม้เป็นการลดการ นิพจน์และ/หรือกิจกรรมเอนไซม์ในระบบอย่างน้อย 99.9% คำว่า "ลดนิพจน์ และ/หรือกิจกรรมของเอนไซม์ที่ถูกเข้ารหัส โดยยีน IdhA" "ลดกิจกรรมของเอนไซม์ 35 ที่ถูกเข้ารหัส โดยยีน pfID" "ลดกิจกรรมของเอนไซม์ที่ถูกเข้ารหัส โดย pflA-ยีน" หรือ"ลดกิจกรรมของเอนไซม์ที่ถูกเข้ารหัส โดยยีน pckA" นอกจากนี้ยัง ครอบคลุมจุลินทรีย์แก้ไขซึ่งมีนิพจน์ไม่สามารถตรวจสอบได้ และ/หรือ กิจกรรมของเอนไซม์เหล่านี้ วิธีการตรวจสอบและกำหนดนิพจน์ และ/หรือสามารถพบกิจกรรมของเอนไซม์ที่ถูกเข้ารหัส โดยยีนว่า ตัวอย่าง: 40วิธีกำหนดนิพจน์ คาร์บอกซีlase phosphoenolpyruvate หรือกิจกรรม ตัวอย่าง ได้เปิดเผยใน G.P. Bridger ทีเค.ซันดารามเกิด (1976)คาร์บอกซีlase phosphenolpyruvate ในแบคทีเรียมาก thermophilic Thermusaquaticus, J Bacteriol 125, 1211-1213 P. Maeba, Sanwal D. B. (1969)คาร์บอกซีlase Phosphoenolpyruvate จากซัล typhimurium ต้องใช้ LT2 วิธีการใน งานของเอ็นไซม์ 13, 283-288 หรือ J. L. Canovas, H. L. Kornberg (1969) Phosphoenolpyruvate 5 คาร์บอกซีlase จาก Escherichia coli วิธีการในงานของเอ็นไซม์ 13, 288-292 ต้องมีการ วิธีที่อธิบายไว้ใน Bridger เผยแพร่เมื่อใน G.P. ทีเค.ซันดาราม (1976)Methods for determining the lactate ดีไฮโดรจีเนส expression or activity are, for example, disclosed by Bunch et al in "The idhA gene encoding the fermentative lactate de 10 hydrogenase of Escherichia Coll', Microbiology (1997), Vol. 143, pages 187-155; or Bergmeyer, H.U., Bergmeyer J. and Grassi, M. (1983-1986) in "Methods of Enzymatic Analysis", 3rd Edition, Volume III, pages 126-133, Verlag Chemie, Weinheim; or Enzymes in Industry: Production and Applications, Second Edition (2004), Wolfgang Aehle, page 23. Preferred is the last method.15Methods for determining the pyruvate formate lyase expression or activity are, for example, disclosed in by Knappe and Blaschkowski in "Pyruvate formate-/yase from Escherichia coli and its activation system", Methods Enzymol (1975), Vol. 41, pages 508-518; or AsanumaN. and Hino T. in "Effects of pH and Energy Supply on Activity and Amount of Pyruvate-20 Formate-Lyase in Streptococcus bovis", Appl. Environ. Microbiol. (2000), Vol. 66, pages 3773- 3777". Preferred is the last method.Methods for determining the ไพรูเวต ฟอร์เมต-ไลเอส activating enzyme expression or activity ไพรูเวต ฟอร์เมต ไลเอส activity are disclosed by Takahashi-Abbe S., Abe K., 25 Takahashi N., Biochemical and functional properties of a ไพรูเวต ฟอร์เมต-ไลเอส (PFL)- activating system in Streptococcus mutans (2003) Oral Microbiology Immunology 18, 293- 297.The term "reduced expression of an enzyme" includes, for example, the expression of the 30 enzyme by said genetically manipulated (e.g., genetically engineered) microorganism at a lower level than that expressed by the ไวด์ไทป์ of said microorganism. Genetic manipulations for reducing the expression of an enzyme can include, but are not limited to, deleting the gene or parts thereof encoding for the enzyme, altering or modifying regulatory sequences or sites associated with expression of the gene encoding the enzyme (e.g., by 35 removing strong โปรโมเตอร์ or repressible โปรโมเตอร์), modifying proteins (e.g., regulatory proteins, suppressors, enhancers, transcriptional activators and the like) involved in transcription of the gene encoding the enzyme and/or the translation of the gene product, or any other conventional means of decreasing expression of a particular gene routine in the art (including, but not limited to, the use of antisense nucleic acid molecules or other 40 methods to knock-out or block expression of the target protein). Further on, one may introduce destabilizing elements into the mRNA or introduce genetic modifications leading to deterioration of ribosomal binding sites (RBS) of the RNA. Further on, one may introduce antisense or RNAi-constructs into the genome leading to deterioration of the RNA. It is alsopossible to change the codon usage of the gene in a way, that the translation efficiency and speed is decreased.According to a preferred embodiment of the modified microorganism according to the 5 การประดิษฐ์นี้, a reduction of the expression and/or activity of the enzyme encoded by the IdhA-gene, OD- gene, OA-gene and/or pckA-gene is achieved by a modification of the IdhA-gene, OD gene, pfiA-gene and/or pckA-gene, โดยที่ this/these gene modification(s) is(are) ทททคือ realized by a deletion of one or more of said genes or อย่างน้อย a part thereof, a deletion of a regulatory element of the one or more of said genes or parts thereof, 10 such as a promotor sequence, by a frameshift, by introducing a stop codon, by anintroduction of อย่างน้อย one deleterious mutation into one or more of said genes. Further on, one may introduce antisense or RNAi-constructs into t

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แม้ทททกว่าคือการลดลงของการแสดงออกและ / หรือเอนไซม์โดยอย่างน้อย 99.9%
คำว่า
"ลดการแสดงออกและ/ หรือการทำงานของเอนไซม์ที่มีการเข้ารหัสโดย IdhA ยีน", "กิจกรรมที่ลดลงของเอนไซม์ที่ 35 ที่มีการเข้ารหัสโดย pfID ยีน",
"กิจกรรมที่ลดลงของเอนไซม์ที่มีการเข้ารหัสโดยpflA ยีน "หรือ" กิจกรรมที่ลดลงของเอนไซม์ที่ถูกเข้ารหัสโดยยีน pckA-
"ยังครอบคลุมจุลินทรีย์ที่มีการปรับเปลี่ยนซึ่งไม่มีการตรวจพบการแสดงออกและ/
หรือกิจกรรมของเอนไซม์เหล่านี้ วิธีการในการตรวจสอบและความมุ่งมั่นในการแสดงออกและ / หรือการทำงานของเอนไซม์ที่ถูกเข้ารหัสโดยยีนกล่าวสามารถพบได้เช่น: 40 วิธีการในการกำหนด phosphoenolpyruvate คาร์บอกซีแสดงออก Lase หรือกิจกรรมที่มีการยกตัวอย่างเช่นการเปิดเผย ใน GP Bridger, TK Sundaram (1976) เกิดphosphenolpyruvate คาร์บอกซี Lase ในแบคทีเรียทนร้อนมาก Thermus aquaticus เจ Bacteriol 125, 1211-1213; พี Maeba, BD Sanwal (1969) Phosphoenolpyruvate คาร์บอกซี Lase จากเชื้อ Salmonella typhimurium LT2 ความเครียดวิธีการในเอนไซม์13 283-288; หรือ JL Canovas, HL Kornberg (1969) Phosphoenolpyruvate 5 คาร์บอกซี Lase จากเชื้อ Escherichia coli, วิธีการในเอนไซม์ 13, 288-292 ที่ต้องการเป็นวิธีการที่อธิบายไว้ในที่เปิดเผยใน GP Bridger, TK Sundaram (1976). วิธีการในการกำหนดให้น้ำนมดีไฮโดรจีเนสแสดงออกหรือกิจกรรมที่มีการยกตัวอย่างเช่นการเปิดเผยโดยพวง et al, ใน "ยีน idhA เข้ารหัสนมหมัก 10 hydrogenase ของ Escherichia Coll 'จุลชีววิทยา (1997), ฉบับที่ 143 หน้า 187-155. หรือ Bergmeyer, HU, Bergmeyer เจและ Grassi, M. (1983-1986) ใน "วิธีการของเอนไซม์วิเคราะห์" ฉบับที่ 3 เล่มที่สาม, หน้า 126-133, เวอร์ Chemie, Weinheim หรือเอนไซม์ในอุตสาหกรรมการผลิตและการประยุกต์ใช้งานพิมพ์ครั้งที่สอง(2004) โวล์ฟกัง Aehle, หน้า 23 ที่ต้องการเป็นวิธีสุดท้าย. 15 วิธีการในการกำหนดรูปแบบการแสดงออกไพรูไอเลส หรือกิจกรรมที่มีการยกตัวอย่างเช่นการเปิดเผยโดย Knappe และ Blaschkowski ใน "ไพรู formate- / มิวสิคจากอีโคและระบบการเปิดใช้งาน" วิธี Enzymol (1975) ฉบับที่ 41, หน้า 508-518. หรือ Asanuma เอ็นและฮีโน่ ตันใน "ผลของพีเอชและการจัดหาพลังงานในกิจกรรมและจำนวน Pyruvate- 20 รูปแบบเอกสาร-ไอเลสใน Streptococcus bovis" Appl Environ Microbiol (2000) ฉบับ 66 หน้า 3773- 3777 "ที่ต้องการเป็นวิธีสุดท้าย.. วิธีการในการกำหนดไพรูเวตฟอร์เมต - ไลเอสเปิดใช้งานการแสดงออกของเอนไซม์หรือกิจกรรมไพรูเวตฟอร์เมตไลเอสกิจกรรมที่ได้รับการเปิดเผยโดยทากาฮาชิ-พระเอสเอ็บเค 25 ทากาฮาชิเอ็นคุณสมบัติทางชีวเคมีและการทำงานของไพรูเวตฟอร์เมต - ไลเอส (PFL) - ระบบการเปิดใช้งานใน Streptococcus mutans (2003) ช่องปากวิทยาภูมิคุ้มกันวิทยา 18 293- 297 คำว่า "การแสดงออกที่ลดลงของเอนไซม์" รวมถึงยกตัวอย่างเช่นการแสดงออกของเอนไซม์ที่ 30 โดยกล่าวว่าพันธุกรรมจัดการ (เช่นดัดแปลงพันธุกรรม) จุลินทรีย์ในระดับต่ำกว่าที่แสดงโดยไวด์ไทป์กล่าวว่าจุลินทรีย์. ทางพันธุกรรมผสมเพื่อลดการแสดงออกของเอนไซม์ที่สามารถรวมแต่ไม่ได้ จำกัด เฉพาะการลบยีนหรือบางส่วนเข้ารหัสสำหรับเอนไซม์การเปลี่ยนแปลงหรือการปรับเปลี่ยนกฎระเบียบลำดับหรือเว็บไซต์ที่เกี่ยวข้องกับการแสดงออกของยีนเอนไซม์(เช่น 35 ลบโปรโมเตอร์ที่แข็งแกร่งหรือ repressible โปรโมเตอร์) การปรับเปลี่ยนโปรตีน (เช่นกฎระเบียบโปรตีนsuppressors, เพิ่ม, กระตุ้นการถอดรหัสและชอบ) มีส่วนร่วมในการถอดรหัสของยีนเข้ารหัสเอนไซม์และ/ หรือการแปลของผลิตภัณฑ์ยีนหรืออื่นๆ วิธีการทั่วไปของการลดการแสดงออกของยีนประจำโดยเฉพาะอย่างยิ่งในศิลปะ(รวมถึง แต่ไม่ จำกัด การใช้งานของโมเลกุลของกรดนิวคลี antisense หรืออื่น ๆ 40 วิธีการที่จะเคาะออกหรือปิดกั้นการแสดงออกของโปรตีนเป้าหมาย) เพิ่มเติมเกี่ยวกับหนึ่งอาจแนะนำองค์ประกอบทำให้เกิดความวุ่นวายเข้า mRNA หรือแนะนำการปรับเปลี่ยนพันธุกรรมชั้นนำของการเสื่อมสภาพของเว็บไซต์ที่มีผลผูกพันไรโบโซม(RBS) ของอาร์เอ็นเอ เพิ่มเติมเกี่ยวกับหนึ่งอาจแนะนำantisense หรือ RNAi สร้างลงในจีโนมที่นำไปสู่การเสื่อมสภาพของอาร์เอ็นเอที่ นอกจากนี้ยังเป็นไปได้ที่จะเปลี่ยนการใช้งาน codon ของยีนในลักษณะที่มีประสิทธิภาพการแปลและความเร็วจะลดลง. ตามที่ศูนย์รวมที่ต้องการของจุลินทรีย์ที่มีการปรับเปลี่ยนตามที่ 5 การประดิษฐ์นี้การลดลงของการแสดงออกและ / หรือ กิจกรรมของเอนไซม์เข้ารหัสโดยIdhA ยีนยีน OD-, โอเอยีนและ / หรือ pckA ยีนจะทำได้โดยการปรับเปลี่ยนของที่IdhA ยีนยีน OD, pfiA ยีนและ / หรือ pckA-ยีนโดยที่ นี้ / ปรับเปลี่ยนยีนเหล่านี้ (s) คือ (จะ) ทททคือตระหนักโดยการลบหนึ่งหรือมากกว่าของกล่าวว่ายีนหรืออย่างน้อยส่วนหนึ่งของมันเป็นลบเป็นองค์ประกอบการกำกับดูแลของหนึ่งหรือมากกว่าของกล่าวว่ายีนหรือบางส่วน10 เช่นลำดับโปรโมเตอร์โดย frameshift โดยการแนะนำ codon หยุดโดยการแนะนำของอย่างน้อยหนึ่งกลายพันธุ์อันตรายเป็นหนึ่งหรือมากกว่าของยีนที่กล่าวว่า เพิ่มเติมเกี่ยวกับหนึ่งอาจแนะนำ antisense หรือ RNAi-สร้างเข้าไปในเสื้อ