Microbial inhibition assaysDetectio

Microbial inhibition assays
Detection of antimicrobial activity in the extracts and measurements
of minimum inhibitory (MIC) and minimum bactericidal
(MBC) concentrations against bacteria and yeast were accomplished
using a broth dilution technique performed in 96-well
microtiter plates according to methods described by Delaquis
et al.22 Stock solutions of each extract in water were adjusted to
pH 4, 5, 6 and 7 with 5 mol L−1 HCl or 10 mol L−1 NaOH. Suitably
diluted aliquots (100 μL) were transferred to the wells of microtiter
plates containing 100 μL TSBYE + 0.30% (w/v) agar adjusted to
the desired pH to achieve final extract concentrations of 0.02–2.50
mg mL−1 for methanol extracts and 0.08–10.00 mg mL−1 for
hot-water extracts. Inocula with approximately 1.0 × 104 CFU
mL−1 were then added to each well. The plates were incubated at
30 ◦C for 24 h with the lids on and the wells were examined for the
presence of growth. MIC was defined as the lowest concentration
that prevented visible growth. Aliquots (10 μL) from wells without
growth were transferred to TSAYE which was incubated for 24 h at
30 ◦C to recover viable bacterial cells. MBC was defined as the lowest
concentration for which there was no evidence of growth after
recovery. Three independent replicates performed with inoculum
prepared from fresh cultures were carried out for each MIC/MBC
determination. Screening of extracts for antifungal effects was
accomplished by the poisoned agarmethod. Extracts were added
to cooled (50 ◦C) PDA at the desired concentration before dispensing
into Petri plates.Mycelial plugs (approximately 2mm)removed
from active cultures with a sterile cork borer were added to the
center of the PDA plates. The plates were observed for evidence
of radial growth after 5 days incubation at room temperature.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ยับยั้งจุลินทรีย์ assays
ตรวจกิจกรรมจุลินทรีย์สารสกัดและวัด
ลิปกลอสไขต่ำสุด (MIC) และต่ำสุด bactericidal
(MBC) ความเข้มข้นของเชื้อแบคทีเรียและยีสต์ได้สำเร็จ
ใช้ซุปเจือจางเทคนิคดำเนินการใน 96-ดี
microtiter แผ่นตามวิธีที่อธิบายไว้ โดย Delaquis
et al.22 หุ้นโซลูชั่นของสารสกัดแต่ละน้ำถูกปรับปรุง
pH 4, 5, 6 และ 7 กับ 5 โมล L−1 HCl หรือ 10 โมล L−1 NaOH เหมาะสม
aliquots แตกออก (100 μL) ถูกโอนย้ายไปบ่อของ microtiter
แผ่นปรับมี 100 μL TSBYE 0.30% (w/v) agar
pH ต้องให้มีความเข้มข้นของสารสกัดสุดท้าย 0.02 – 2.50
mL−1 mg สารสกัดเมทานอลและ 0.08 – 10.00 มิลลิกรัม mL−1 สำหรับ
สารสกัดน้ำร้อน Inocula มีประมาณ 1.0 × 104 CFU
แล้วเพิ่ม mL−1 ให้ดีละกัน แผ่นก็ incubated ที่
30 ◦C สำหรับ h 24 มีฝาบนและบ่อถูกตรวจสอบสำหรับการ
ของเติบโต MIC ถูกกำหนดเป็นความเข้มข้นต่ำ
ที่ไม่สามารถมองเห็นการเจริญเติบโต Aliquots (10 μL) จากบ่อโดย
เติบโตถูกโอนย้ายไป TSAYE ซึ่งถูก incubated ใน 24 ชมที่
30 ◦C ฟื้นเซลล์แบคทีเรียทำงาน ช่อง MBC ถูกกำหนดเป็นสุด
ความเข้มข้นที่มีความเจริญเติบโตหลังจาก
กู้คืน เหมือนกับอิสระสามดำเนินกับ inoculum
เตรียมจากสดวัฒนธรรมได้ดำเนินการสำหรับแต่ละ MIC/ช่อง MBC
กำหนด คัดแยกสำหรับผลต้านเชื้อราได้
โดย poisoned agarmethod เพิ่มสารสกัดจาก
ไปเย็น ๆ (50 ◦C) PDA ที่ความเข้มข้นต้องก่อนมหาศาล
เป็นจาน Petriเอาปลั๊ก mycelial (ประมาณ 2 มิลลิเมตร)
จากงานวัฒนธรรมกับ borer กอซคอร์กถูกเพิ่มเข้าไป
ศูนย์กลางของแผ่น PDA แผ่นสุภัคสำหรับหลักฐาน
โตรัศมีหลังจากบ่ม 5 วันที่อุณหภูมิห้อง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จุลินทรีย์ตรวจการยับยั้ง
การตรวจหาฤทธิ์ต้านจุลชีพในสารสกัดและการวัด
ของการยับยั้งต่ำสุด (MIC) และฆ่าเชื้อแบคทีเรียต่ำสุด
(MBC) ความเข้มข้นของเชื้อแบคทีเรียและยีสต์ได้ประสบความสำเร็จ
โดยใช้เทคนิคการเจือจางน้ำซุปดำเนินการใน 96 ทั้ง
แผ่นไมโครตามวิธีการอธิบายโดย Delaquis
และ โซลูชั่น al.22 หุ้นของสารสกัดในน้ำในแต่ละที่จะมีการปรับ
ค่า pH 4, 5, 6 และ 7 มี 5 mol L-1 HCl หรือ 10 mol L-1 NaOH เหมาะสม
aliquots เจือจาง (100 ไมโครลิตร) ถูกย้ายไปที่หลุมของไมโคร
แผ่นมี 100 ไมโครลิตร TSBYE + 0.30% (w / v) วุ้นปรับ
ค่าพีเอชที่ต้องการเพื่อให้บรรลุความเข้มข้นของสารสกัดจากสุดท้ายของ 0.02-2.50
mg mL-1 สำหรับสารสกัดเมทานอลและ 0.08-10.00 mg mL-1 สำหรับ
สารสกัดจากน้ำร้อน แผลฟกช้ำที่มีประมาณ 1.0 × 104 CFU
ml-1 ถูกเพิ่มไปยังแต่ละดี แผ่นถูกบ่มที่
30 ◦Cเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่มีฝาปิดและหลุมถูกตรวจสอบสำหรับ
การปรากฏตัวของการเจริญเติบโต MIC ถูกกำหนดเป็นความเข้มข้นต่ำสุดที่
จะป้องกันไม่ให้การเจริญเติบโตที่มองเห็นได้ aliquots (10 ไมโครลิตร) จากบ่อที่ไร้
การเจริญเติบโตถูกย้ายไป TSAYE ซึ่งถูกบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่
30 ◦Cที่จะกู้คืนเซลล์แบคทีเรียทำงานได้ MBC ถูกกำหนดเป็นต่ำสุดที่
ความเข้มข้นที่มีหลักฐานของการเติบโตหลังจากที่ไม่มี
การกู้คืน สามซ้ำอิสระดำเนินการกับหัวเชื้อ
ที่เตรียมจากวัฒนธรรมสดได้ดำเนินการสำหรับแต่ละ MIC / MBC
ความมุ่งมั่น การตรวจคัดกรองของสารสกัดจากผลกระทบต้านเชื้อราได้
ประสบความสำเร็จโดย agarmethod วางยาพิษ สารสกัดจากมีการเพิ่ม
การระบายความร้อน (50 ◦C) พีดีเอที่มีความเข้มข้นที่ต้องการก่อนที่จะจ่าย
เป็นปลั๊ก Petri plates.Mycelial (2mm โดยประมาณ) ออก
จากวัฒนธรรมที่ใช้งานกับก๊อกหนอนเจาะผ่านการฆ่าเชื้อถูกเพิ่มเข้าไปใน
ศูนย์กลางของแผ่นพีดีเอ แผ่นพบหลักฐาน
ของการเจริญเติบโตในแนวรัศมี 5 วันหลังจากบ่มที่อุณหภูมิห้อง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

จุลินทรีย์ ยับยั้ง การตรวจหาฤทธิ์ต้านจุลชีพในเลือด

ของขั้นต่ำและการวัดสารยับยั้งแบคทีเรีย
( MIC ) และต่ำสุด ( MBC ) เข้มข้น ต่อต้านแบคทีเรีย และยีสต์ได้สำเร็จโดยใช้เทคนิค broth dilution

( 96 ดีไมโครจานตามวิธีการที่อธิบายโดย delaquis
และ al.22 หุ้นโซลูชั่นของแต่ละสารสกัดจากน้ำคือ ปรับ
พีเอช 4 , 5 , 6 และ 7 กับ 5 mol − 1 ลิตร หรือ 10 mol − 1 HCL ลิตร NaOH เหมาะสม
เจือจางเฉยๆ ( 100 μ L ) ถูกย้ายไปยังบ่อไมโคร
แผ่น ( 100 μผม tsbye 0.30 % ( w / v ) วุ้นที่ต้องการปรับ pH ให้

สุดท้ายสกัดความเข้มข้น 0.02 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร– 2.50
− 1 สารสกัดเมทานอลและ 0.08 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร– 10.00 − 1 สำหรับ
ร้อน สารสกัด inocula ที่มีประมาณ 1.0 × 104 CFU
มล − 1 ) จากนั้นเพิ่มแต่ละครั้งได้อีกด้วย จานถูกบ่มที่อุณหภูมิ 30 C
◦ 24 H กับฝาบน และ เวลส์ เพื่อตรวจวัด
มีการเจริญเติบโต ไมค์ถูกกำหนดเป็นค่าความเข้มข้นที่ขัดขวางการเจริญเติบโต
มองเห็น เฉยๆ ( 10 μ L ) จากหลุมโดยไม่
การเจริญเติบโตถูกย้าย tsaye ซึ่งถูกบ่มเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ที่กู้ได้ 30 ◦
C เซลล์แบคทีเรีย .ซึ่งถูกกำหนดไว้ในขณะที่ความเข้มข้นต่ำสุด
ซึ่งไม่มีหลักฐานของการเติบโตหลังจาก
การกู้คืน สามแบบอิสระดำเนินการกับเชื้อที่เตรียมจากเชื้อสด
ทดลองแต่ละไมค์ / MBC
ความมุ่งมั่น การคัดกรองสารสกัดสำหรับผลการเจริญของเชื้อรา
ได้ โดยวางยา agarmethod . สารสกัดเพิ่ม
จะเย็น ( 50 ◦ C ) PDA ที่ต้องการสมาธิก่อนจ่ายยา
ใน Petri จาน มีปลั๊ก ( ประมาณ 2mm ) เอาออก
จากวัฒนธรรมที่ใช้งานกับหนอนจุกปลอดเชื้อถูกเพิ่มไปยัง
ศูนย์ของ PDA แผ่น จานที่พบหลักฐาน
เจริญรัศมี หลังจาก 5 วัน บ่มที่อุณหภูมิห้อง