Analytical procedure
A sample of 1.00 ml hydrolysate is taken after
various intervals of time and is placed in a 100ml mea-
surement flask. Immediately after sampling, 0.5 ml 2
mol l-1 HCl is added in order to stop further hydroly-
sis in the enzymatic case. Under acidic hydrolysis the
addition of HCl is not necessary. 25 ml distilled wa-
ter, 25.00 ml Fehling I and 25.00 ml Fehling II solu-
tions are added to the sample. The resulting solution
is homogenized. The flask is placed in a boiling water
bath for 5 minutes. Then the solution in the flask is
cooled to room temperature and filled up to the mark
with distilled water. The resulting sediment of Cu2O is
filtered through a paper filter suitable for the filtering
of fine crystalline residues.
A sample of filtrate with a volume of 25.00 ml is
transferred to a 300 ml Erlenmeyer flask. 8 ml acetate
buffer and 0.10 0.15g PAR are added. The surplus Cu2+
is titrated with a standard solution of EDTA until the color
of the solution changes from red to yellow-green.
The quantity of Cu, g, (contained in Cu2O)
equivalent to the oxidized sugar is calculated by the
formula
EP(CCu .VCu −CEDTA .VEDTA )ACu .10−3.100
mCu=
Vs
where: Ccu is the concentration of Cu2+; mol l-1 of the
titrated solution with volume 25.00 ml; VCu is the vol-
76
T. Kolusheva, A. Marinova
ume of the Cu2+ solution, 25.00 ml; CEDTA is the concen-
tration of the EDTA solution, mol l-1; V EPis theEDTA
titrated volume of the EDTA solution, ml; ACu is the atomic
mass of Cu; Vs is the volume of the sample of filtrate,
25.00 ml.
The quantity of the reducing sugars (inverted sugar
or glucose) is calculated from the resulting quantity of
Cu, by the use of the tables of Bertrand [1].
The experiments described throughout the method
for analysis of the reducing sugars were done with hy-
drolysates obtained under enzyme starch hydrolysis with
a thermo-stable bacterial á-Amylase, producer strain of
Bac. Subtilis XK-86.
The optimal conditions we established for hydroly-
sis are as follows: concentration of substrate 250 g l-1, pH
= 7, supported by 1/15 mol l-1 phosphate buffer, concen-
tration of the enzyme 12 units/ml suspension; tempera-
ture of hydrolysis 90°C [7, 8].
ขั้นตอนวิเคราะห์
ตัวอย่างด้วย 1.00 ml ถูกตั้งขึ้นหลังจาก
ต่าง ๆ ช่วงเวลา และอยู่ใน 100ml mea แบบ
surement หนาว ทันทีหลังจากการสุ่มตัวอย่าง 0.5 ml 2
โมล HCl l 1 เพิ่มเพื่อหยุดเพิ่มเติม hydroly-
sis ในกรณีเอนไซม์ในระบบ ภายใต้ไฮโตรไลซ์เปรี้ยว
เพิ่ม HCl ไม่จำเป็น 25 ml กลั่น wa-
เธอ 25.00 ml Fehling ฉันและ 25.00 ml Fehling II solu-
tions ถูกเพิ่มเข้าไปตัวอย่าง การแก้ปัญหาที่เกิดขึ้น
homogenized เป็นเป็นกลุ่ม หนาวที่อยู่ในน้ำเดือด
ห้องน้ำ 5 นาที แล้วการแก้ปัญหาในหนาว
เย็น ๆ อุณหภูมิห้อง และเติมถึงหมาย
กับน้ำที่กลั่น เป็นตะกอนเกิดขึ้นของ Cu2O
กรองผ่านตัวกรองกระดาษเหมาะสำหรับการกรอง
ของดีตกผลึก
เป็นตัวอย่างของสารกรอง ด้วย 25.00 ml
โอนไป 300 มล. Erlenmeyer หนาว acetate 8 ml
บัฟเฟอร์และ 0.10 0.15g หุ้นเพิ่ม Cu2 เกิน
titrated ด้วยโซลูชั่นมาตรฐานของ EDTA จนสี
เปลี่ยนโซลูชันจากสีแดงกับสีเหลือง-เขียว
ปริมาณของ Cu, g, (อยู่ใน Cu2O)
เทียบเท่าน้ำตาลตกแต่งตาม
สูตร
EP (CCuVCu −CEDTAACu VEDTA) . 10−3.100
หลัก =
Vs
ที่: Ccu เป็นความเข้มข้นของ Cu2 l-1 โมลของ
titrated ด้วยปริมาตร 25.00 ml VCu เป็น vol-
76
ต. Kolusheva, A. Marinova
ออฟฟิศ Cu2 โซลูชัน 25.00 ml CEDTA เป็น concen-
tration โซลูชัน EDTA, l-1 โมล TheEDTA V EPis
titrated ปริมาตร EDTA โซลูชัน ml ACu เป็นที่อะตอม
มวลของ Cu เทียบกับคือ ปริมาตรของตัวอย่างของสารกรอง,
25.00 ml.
ปริมาณของน้ำตาลลดลง (กลับน้ำตาล
หรือกลูโคส) คำนวณจากปริมาณผล
Cu โดยใช้ตารางของเบอร์ [1] .
ทดลองอธิบายตลอดทั้งวิธีการ
สำหรับการวิเคราะห์น้ำตาลลดลงทำกับฮี-
drolysates รับใต้ไฮโตรไลซ์แป้งเอนไซม์กับ
เทอร์โมคอกแบคทีเรียá Amylase โปรดิวเซอร์ต้องใช้ของ
บัค Subtilis XK 86.
สภาวะเราก่อตั้งขึ้นใน hydroly-
sis จะเป็นดังนี้: ความเข้มข้นของพื้นผิว 250 g l-1, pH
= 7 สนับสนุน 1/15 โมล l 1 ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ concen-
tration ระงับหน่วย/มลเอนไซม์ 12 อุณหภูมิ-
ture ไฮโตรไลซ์ 90° C [7, 8] การ
การแปล กรุณารอสักครู่..

ขั้นตอนการวิเคราะห์
ตัวอย่าง 1.00 มลไฮโดรไลถูกนำตัวไปหลังจาก
ช่วงเวลาที่แตกต่างกันของเวลาและจะอยู่ใน 100ml เด็ดขาด
ขวด surement ทันทีหลังจากที่สุ่มตัวอย่าง 0.5 มล 2
mol L-1 HCl ถูกเพิ่มเพื่อหยุด hydroly- เพิ่มเติม
sis ในประเทศไทยกรณีของเอนไซม์ ภายใต้การย่อยสลายเป็นกรด
เพิ่มขึ้นของ HCl ไม่จำเป็น 25 มลกลั่น WA-
ตรี 25.00 มล Fehling I และ 25.00 มล Fehling II สารละลาย
tions มีการเพิ่มตัวอย่าง การแก้ปัญหาที่เกิดขึ้น
จะหดหาย กระติกน้ำที่วางอยู่ในน้ำเดือด
อาบน้ำเป็นเวลา 5 นาที แล้วการแก้ปัญหาในขวดที่มีการ
ระบายความร้อนที่อุณหภูมิห้องและเต็มไปถึงเครื่องหมาย
ด้วยน้ำกลั่น ตะกอนที่เกิดจาก Cu2O ถูก
กรองผ่านกระดาษกรองที่เหมาะสมสำหรับการกรอง
ของผลึกปรับส่วนที่เหลือ
เป็นตัวอย่างของการกรองที่มีปริมาณ 25.00 มลถูก
ถ่ายโอนไปยัง 300 มลรูปกรวยขวด 8 ml acetate
buffer และ 0.10 ?? 0.15g PAR จะมีการเพิ่ม ส่วนเกิน Cu2 +
จะปรับขนาดด้วยสารละลายมาตรฐานของ EDTA จนกว่าสี
ของการเปลี่ยนแปลงการแก้ปัญหาจากสีแดงเป็นสีเหลืองสีเขียว
ปริมาณของ Cu, g (ที่มีอยู่ใน Cu2O)
เทียบเท่ากับน้ำตาลออกซิไดซ์ที่มีการคำนวณโดย
สูตร
อี (CCU .VCu -CEDTA .VEDTA) ACU 0.10-3.100
MCU =
Vs
ที่: CCU คือความเข้มข้นของ Cu2 +; mol L-1 จาก
การแก้ปัญหาปรับขนาดที่มีปริมาณ 25.00 มล; VCU เป็น VOL-
76 ต Kolusheva, A. Marinova เมะของโซลูชั่น Cu2 + 25.00 มล; CEDTA เป็นความเข้มข้นของการแก้ปัญหาการเคี้ยว EDTA, mol L-1; V Epis theEDTA ปริมาณการปรับขนาดของการแก้ปัญหา EDTA, มล; ACU เป็นอะตอมมวลของ Cu; Vs คือปริมาตรของตัวอย่างของการกรอง, 25.00 มลปริมาณของน้ำตาลลด (ฤๅษีน้ำตาลหรือกลูโคส) คำนวณจากปริมาณผลของทองแดงโดยใช้ตารางของเบอร์ทรานด์ [1] การทดลองที่อธิบายไว้ตลอด วิธีการวิเคราะห์ในการลดน้ำตาลได้ทำกับเชียdrolysates ที่ได้รับภายใต้การทำงานของเอนไซม์ย่อยแป้งที่มีสายพันธุ์เทอร์โมที่มีเสถียรภาพแบคทีเรียอะไมเลสซึ่งเป็นผู้ผลิตBac subtilis XK-86 สภาวะที่เหมาะสมที่เราจัดตั้งขึ้นเพื่อ hydroly- SIS มีดังนี้ความเข้มข้นของสารตั้งต้นที่ 250 กรัมต่อลิตร-1, ค่า pH = 7 สนับสนุนโดย 1/15 โมลบัฟเฟอร์ L-1 ฟอสเฟตเข้มข้นเคี้ยวของเอนไซม์ 12 / หน่วยมลระงับ; อุณหภูมิข้อมูล ture ของการย่อยสลาย 90 ° C [7, 8]
การแปล กรุณารอสักครู่..
