All solid samples were homogenized

All solid samples were homogenized by grinding in liquid niogen, used immediately, or stored at
80 C prior to DNA xtraction. The total DNA extraction from200mg of each of the less
rocessed samples (feeds, flour, mince, biscuits, snacks & tofu) was arried out using the Foodproof GMO Sample Preparation Kit acording to the manufacturers' instructions, except that the initial xtraction step was routinely extended from 30 to 60 min, and at he final step 40 ml Elution Buffer was used in 2  20 ml elutions, to ecover DNA at the highest possible concentration. For the more ifficult samples (soy sauce, milk, infant formula & chocolate) a
modified version of the cetyltrimethylammonium bromide (CTAB) recipitation method was used. Specifically, 200 mg or 200 mlof omogenized sample was incubated with 1 ml Edward's buffer
0.5% (w/v) SDS, 250 mM NaCl, 25 mM EDTA, 200 mM Tris pH 8.0)t 95 C for 5min (Cold Spring Harbor Laboratory, 2005). Theywere hen spun down at relative centrifugal force of 16,000 g in a
microcentrifuge for 10 min, and the supernatant was extracted wice with chloroform to remove protein. The aqueous (upper) hase was then incubated with 2 volumes of CTAB precipitation
olution, after which the CTAB protocol was followed as previously escribed (Mafra et al., 2008).When necessary two or more repeat
NA extractions from each sample were carried out to increase
NA yield. DNA yield and purity were evaluated by UV spectrohotometry at 230, 260 & 280 nm using a NanoDrop 2000c inrument (Thermo Scientific, Wilmington, DE, USA). DNA integrity
was assessed by agarose gel electrophoresis, inwhich 25e100 ng of
urified DNA samples were separated on 1% agarose gels containng GelRed nucleic acid stain (Biotium, Hayward, CA, USA) in 0.5 BE buffer.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตัวอย่างของแข็งทั้งหมด homogenized เป็นกลุ่ม โดยการบดใน niogen เหลว ใช้ทันที หรือเก็บไว้ที่ 80 C ก่อน xtraction ดีเอ็นเอ From200mg สกัดดีเอ็นเอทั้งหมดของแต่ละน้อยตัวอย่าง rocessed (ตัวดึงข้อมูล flour ไส้ ขนมปัง ขนมขบเคี้ยว และเต้าหู้) ถูก arried ออกใช้อยู่ Foodproof จีเอ็มโออย่างเตรียมชุดกับคำแนะนำของผู้ผลิต ยกเว้น ว่า xtraction เริ่มต้นขั้นตอนเป็นประจำขยาย 30-60 นาที ที่เขา final ก้าว 40 ml Elution บัฟเฟอร์ถูกใช้ใน 2 20 ml elutions การ ecover ดีเอ็นเอที่ความเข้มข้นได้สูงสุด ตัวอย่างของ ifficult เพิ่มเติม (ซอสถั่วเหลือง น้ำนม สูตรทารก และช็อคโกแลต) เป็นรุ่น modified cetyltrimethylammonium โบรไมด์ (CTAB) recipitation วิธีใช้ Specifically, 200 มิลลิกรัม หรืออย่าง omogenized mlof 200 ถูก incubated กับ 1 ml บัฟเฟอร์ของเอ็ดเวิร์ด0.5% (w/v) SDS, NaCl, EDTA, 25 มม. 250 มม. 200 มม.ทริสเรทติ้ง pH 8.0) t 95 C ใน 5 นาที (เย็นสปริงท่าปฏิบัติ 2005) ไก่ Theywere ลงที่ปั่นเหวี่ยงสัมพัทธ์ของ 16000 จุดในการmicrocentrifuge 10 นาที และ supernatant ถูกแยก wice ด้วยคลอโรฟอร์มเอาโปรตีน Hase (บน) อควีถูก incubated แล้ว มีวอลุ่ม 2 ของฝน CTABolution ที่มีโพรโทคอล CTAB เป็นก่อนหน้านี้ตาม escribed (Mafra et al., 2008) เมื่อน้อยจำเป็นสองซ้ำนาสกัดจากตัวอย่างแต่ละที่ดำเนินการเพื่อเพิ่มนาผลผลิต มีประเมินผลผลิตดีเอ็นเอและความบริสุทธิ์ โดย spectrohotometry UV ที่ 230, 260 และ 280 nm โดยใช้ inrument NanoDrop 2000c (เทอร์โม Scientific วิลมิ DE สหรัฐอเมริกา) ความสมบูรณ์ของดีเอ็นเอถูกประเมิน โดย agarose เจ electrophoresis ใน ng 25e100 ใดของตัวอย่างดีเอ็นเอ urified ได้แยกจากกันใน 1% agarose เจ containng GelRed กรดนิวคลีอิกคราบ (Biotium, Hayward, CA, USA) ในบัฟเฟอร์จะ 0.5

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กลุ่มตัวอย่างที่เป็นของแข็งทั้งหมดถูกปั่นโดยการบดใน niogen ของเหลวใช้งานได้ทันทีหรือเก็บไว้ที่? 80? C ก่อนที่จะ XTraction ดีเอ็นเอ การสกัดดีเอ็นเอรวม from200mg
ของแต่ละน้อยตัวอย่างrocessed (ฟีด fl ของเราสับ, ขนมปัง, ขนมและเต้าหู้) ถูก arried ออกใช้จีเอ็มโอ foodproof การเตรียมสารตัวอย่างชุดกำกับคำแนะนำของผู้ผลิตยกเว้นว่าขั้นตอน XTraction เริ่มต้นเป็นประจำ ขยาย 30-60 นาทีและในขั้นตอนที่เขา fi NAL 40 มล. ชะบัฟเฟอร์ที่ใช้ใน 2 หรือไม่? 20 มล. elutions เพื่อ Ecover ดีเอ็นเอที่มีความเข้มข้นเป็นไปได้สูงสุด สำหรับตัวอย่างมากขึ้นถ้าลัทธิสาย (ซอสถั่วเหลือง, นม, สูตรสำหรับทารกและช็อคโกแลต)
ต่อสายModi รุ่นของโบรไมด์เอ็ด cetyltrimethylammonium นี้ (CTAB) วิธี recipitation ถูกนำมาใช้ ระบุไว้ cally 200 มิลลิกรัมหรือ 200 mlof ตัวอย่าง omogenized ถูกบ่ม 1 มล. บัฟเฟอร์เอ็ดเวิร์ดที่
0.5% (w / v) SDS 250 มิลลิโซเดียมคลอไรด์, EDTA 25 มิลลิ 200 มิลลิทริสพีเอช 8.0) ที 95? C เป็นเวลา 5 นาที (ห้องปฏิบัติการ Cold Spring Harbor 2005) ไก่ Theywere ปั่นลงที่แรงเหวี่ยงญาติของ 16,000
กรัมในไมโครเป็นเวลา10 นาทีและใสถูกสกัดด้วยคลอโรฟอร์ม wice การลบโปรตีน น้ำ (บน) hase ถูกบ่มแล้วกับ 2 ปริมาณฝน CTAB
olution หลังจากที่โปรโตคอล CTAB ตามมาเป็น escribed ก่อนหน้านี้ (Mafra et al., 2008)
เมื่อจำเป็นสองคนหรือมากกว่าซ้ำสกัดNA จากแต่ละตัวอย่างได้ดำเนินการ
เพื่อเพิ่มผลผลิตNA ผลผลิตดีเอ็นเอและความบริสุทธิ์ได้รับการประเมินโดย spectrohotometry รังสียูวีที่ 230, 260 และ 280 นาโนเมตรโดยใช้ NanoDrop 2000c inrument (เทอร์โม scienti สาย C, Wilmington, DE, สหรัฐอเมริกา) ความสมบูรณ์ของดีเอ็นเอได้รับการประเมินโดยข่าวคราว agarose, inwhich 25e100 งะของสายURI เอ็ดตัวอย่างดีเอ็นเอถูกแยกออกเมื่อวันที่ 1% agarose เจล containng GelRed คราบกรดนิวคลีอิก (Biotium เฮย์เวิร์ด, CA, USA) ใน 0.5? พ.ศ. บัฟเฟอร์