Results of recent studies on the model higher plant Arabidopsis thaliana have led us to learn about the generality and versatility of two-component systems (TCS) in eukaryotes. In the plant, TCS are crucially involved in certain signal transduction mechanisms underlying the regulation of plant development in response to a subset of plant hormones, namely, cytokinin and ethylene. Results of extensive plant genomics revealed that these hormone-responsive TCS are evolutionarily conserved in many other plants, including mosses, grasses, crops, and trees. In particular, the conserved cytokinin-responsive TCS is typical in the sense that the signaling pathway consists of cytokinin-receptor histidine kinases (HK), histidine-containing phosphotransfer (HPt) factors, and downstream phosphoaccepting response regulators (RR), which together act as His-to-Asp multistep phosphorelay components, and which together modulate the downstream network of cytokinin-responsive gene regulation. The ethylene-responsive TCS is atypical in that ethylene-receptor HKs appear to directly interact with the downstream mitogen-activated protein kinase (MAPK) cascade. The ethylene-responsive HKs have already been introduced in the previous edition of Methods in Enzymology [Schaller, G. E., and Binder, B. M. (2007). Biochemical characterization of plant ethylene receptors following transgenic expression in yeast. Methods Enzymol. 422, 270–287]. Hence, here we focus on the cytokinin-receptor HKs, which are capable of functioning in microorganisms, such as Escherichia coli and Saccharomyces cerevisiae. Some versatile protocols useful for analyzing plant TCS factors by employing these microorganisms will be introduced.
ผลการศึกษาล่าสุดในรูปแบบโรงงาน Arabidopsis thaliana ที่สูงขึ้นทำให้เราเรียนรู้เกี่ยวกับทั่วไปและความเก่งกาจของสององค์ประกอบระบบ (TCS) ในยูคาริโอ ในโรงงาน, TCS มีส่วนร่วมในการขับเคลื่อนกลไกการส่งสัญญาณบางอย่างอยู่ภายใต้กฎระเบียบของการพัฒนาพืชที่ตอบสนองต่อการย่อยของฮอร์โมนพืชคือไซโตไคนิเอทิลีนและ ผลการค้นหาของฟังก์ชั่นที่กว้างขวางพืชเปิดเผยว่าเหล่านี้ TCS ฮอร์โมนตอบสนองป่าสงวนวิวัฒนาการในพืชอื่น ๆ อีกมากมายรวมทั้งมอส, หญ้า, พืชและต้นไม้ โดยเฉพาะอย่างยิ่งการอนุรักษ์ไซโตไคนิตอบสนอง TCS เป็นเรื่องปกติในแง่ที่ว่าเส้นทางการส่งสัญญาณประกอบด้วยไคเนสส์ไซโตไคนิรับฮิสติดีน (HK), ฮิสติดีนที่มี phosphotransfer (HPT) ปัจจัยและปลายน้ำหน่วยงานกำกับดูแลการตอบสนอง phosphoaccepting (RR) ซึ่งร่วมกันทำหน้าที่ เป็นของเขาไปงูเห่าส่วนประกอบ multistep phosphorelay และซึ่งร่วมกันปรับเปลี่ยนเครือข่ายท้ายน้ำของการควบคุมยีนไซโตไคนิตอบสนอง เอธิลีนที่ตอบสนองต่อ TCS เป็นความผิดปกติในการที่เอทิลีนรับ HKS ปรากฏว่าติดต่อโดยตรงกับล่อง mitogen เปิดใช้งานโปรตีนไคเนส (MAPK) น้ำตก HKS เอทิลีนที่ตอบสนองได้รับแล้วนำในรุ่นก่อนหน้าของวิธีการในเอนไซม์ [Schaller, GE และ Binder, BM (2007) ลักษณะทางชีวเคมีของตัวรับเอทิลีนของพืชต่อไปนี้การแสดงออกของยีนในยีสต์ วิธีการ Enzymol 422, 270-287] ดังนั้นที่นี่เรามุ่งเน้นไปที่ไซโตไคนิรับ HKS ซึ่งมีความสามารถในการทำงานในจุลินทรีย์เช่น Escherichia coli และ Saccharomyces cerevisiae บางโปรโตคอลที่หลากหลายที่มีประโยชน์สำหรับพืชวิเคราะห์ปัจจัย TCS โดยการใช้จุลินทรีย์เหล่านี้จะได้รับการแนะนำ
การแปล กรุณารอสักครู่..